全自动生化分析仪的检测质量控制及管理

李俊良 李桂花 李聚林

(1 广西龙潭医院医学装备科，广西柳州市 545005；2 桂平市中医医院检验科，广西桂平市 537200；3 广西血液中心，广西柳州市 545005)

【提要】 全自动生化分析仪的检测质量控制及管理必须注意科学地利用该仪器的结构优势与性能特点，严格落实受检样品的质量管理，认真把握准确性与精密度两个关键指标，注重室内质控、室间质评、仪器计量监测和厂家检查校准，还应加强人才培养与队伍建设、实验室环境标准、仪器分类编码与标识，以及各项规章制度管理，切实保障仪器质量与安全。

全自动生化分析仪因检测功效高、检测结果较可靠而得到广泛应用。随着人们健康需求的不断增长以及国家医疗卫生事业的蓬勃发展，近20年来医疗机构包括采供血机构也开始陆续引进全自动生化分析仪，并广泛使用其进行相关生化检验，以提高检测效率，保障检测质量，取得较好效果。为了更好地发挥全自动生化分析仪的作用与功效，现对全自动生化分析仪的检测质量控制及管理作一综述。

1 做好全自动生化分析仪的检测质量控制

全自动生化分析仪检测的波长范围一般为340～800 nm，常设340 nm、380 nm、412 nm、450 nm、505 nm、546 nm、570 nm、605 nm、660 nm、700 nm、740 nm、800 nm共12个固定波长，分析方法可达20种或更多，测定项目数可达45～103项，测试速度可为330 T/h、360 T/h、400 T/h、540 T/h，最小加样量2 μL，最小试剂量20 μL，最小反应液量100 μL，恒温系统可分别为恒温水浴、恒温气浴、液气双向同步恒温3种，反应盘温度多数为(37±0.1)℃，比色杯有特殊材质硬质比色杯、特种光学塑料比色杯。可检测丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、总蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐、二氧化碳结合力、尿酸、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖等。样本类型主要为血清、血浆、尿液、脑脊液等。

科学地运用全自动生化分析仪的结构优势与性能特点做好检测质量控制主要体现在以下方面：(1)在溶血、黄疸、脂肪浑浊样本等干扰测定时，用双波长检测比用单波长的分析效果好[1]，而且不影响检测灵敏度。(2)双试剂法由于孵育时间长，防干扰能力强，可提高工作试剂的稳定性和检测准确性[2-3]，液体型双试剂除了使用更方便，还具有提高检测的重复性作用。(3)仪器恒温可靠，可使样品与试剂的反应稳定完全，对保证检测数据的准确性与重复性有益，检测结果更可靠，其中水浴恒温式比空气浴恒温式温度更稳定。仪器的结构优势与性能特点还包括单项与多项质控线性定标、质控、监控、维护、远程维护模块的应用、加样针与试剂针漏液监测、反应盘与试剂仓温度监测、气压与水压检测、质控数据和质控图等信息记录及统计、故障报警、异常结果报警、杯空白对照、试剂批号的扫码录入与确认、试剂余量查询、加样针智能液面探测与堵针检测、加样针与试剂针冲洗时间设置、数据备份、系统恢复、仪器运行初始化、关机前仪器自动清洗等。此外，仪器还具备急诊快速检测通道设置、质控品专用检测位设置、各类样本的合理排序与准确检测依次运行，以及质控对照随患者样本一起进行检测、设施和控制程序自动化与手动相结合等特点。

2 严格落实受检样品的质量管理

受检样品的质量是影响检测工作质量的重要因素。留取标本的基本原则是保持离体标本质和量的完整性，保持标本完整性的主要方法是保持标本新鲜。衡量标本是否新鲜的简单尺度，是从标本采集到检验所允许的时限。标本越新鲜，交叉污染越低，则检测结果更接近受检者当时的生理或病理实际状况。管理好标本的采集与转运可降低70%的检验差错率[4]。

受检样品的质量受性别、年龄、饮食、药物、环境、情绪、体位、活动状态等许多因素影响，例如直立时的血容量比卧位平躺时减少600～700 mL，从卧位到直立时血容量可减少10%左右[4]。长期素食者的尿液偏碱性；维生素B12接近缺乏者胆红素则较高；禁食、减肥者的血糖和胰岛素降低，血酮体可明显增高，血清中多种酶的活性增高，严重者还可发生酸中毒；饮酒者发生轻度醉酒时，葡萄糖浓度可增加20%～50%。口服避孕药也可影响许多项目的测定。

血浆的丙氨酸氨基转移酶半衰期为47 h[5]。血清中的丙氨酸氨基转移酶在0～4 ℃时可稳定3 d，当存放于-20 ℃其稳定状态可长于3 d；含乙二胺四乙酸盐抗凝剂血浆中的丙氨酸氨基转移酶在室温(15～30 ℃)或冰箱(2～8 ℃)中可稳定7 d；-25 ℃以下环境其保存不超过30 d，包括质控血清都不能反复冰冻保存。许多生化酶都具有蛋白质特性，存在生理病理性波动。丙氨酸氨基转移酶水平的个体差异也较大，除了心血管、骨骼、肝胆等疾病以及毒物、药物等影响因素外，性别、年龄、饮酒、疲劳、肥胖、剧烈运动等也可影响丙氨酸氨基转移酶水平。正常新生儿丙氨酸氨基转移酶水平比成年人高约2倍[2]；男性普遍高于女性，甚至是女性的4.48倍[6]；18～25岁年龄组，尤其是学生与军人较低[7-8]，25～45岁年龄组较高[9-10]。在相关实验设计、检测结果评估及疾病诊断时应注意考虑样本的个体差异以及理化变性等因素。

3 全自动生化分析仪准确性与精密度核心指标的检验与评估

准确性与精密度是衡量所有医用检测仪器设备性能的重要核心指标，并广泛应用于医用检测系统仪器设备的采购前论证、设备验收、维修、日常质控与质量管理、配对资料研究等评估与确认。国际临床化学联合会将准确度定义为分析项目测定值与其“真值”之间的一致性。准确度即真实性、准确性，精密度即分析方法对同一样本产生重复测量相同值的能力[2]。

全自动生化分析仪检测准确度通常利用质控标准品参比、室内及室间质控参比、同质资料配对比较验证，试验标本数至少用40例进行准确度估计[11]，其中包括均数和标准差(standard deviation，SD)比较、结合相关分析、正态性检验、离群点检测、X-Y散点图、线性回归等综合分析，接受标准为相关系数r≥0.975或r2≥0.95。其中的SD是通过质控标本分析或方法评估实验数据所获得的精密度指标。SD越大说明数据越分散、精密度越差。相关系数愈接近-1或1，说明两个变量直线关系愈密切；相关系数愈接近0，直线关系愈不密切[12]。准确度估计应注意两种方法检测结果或/和诊断结果的比较[11]。

精密度即检测结果的可重现性。仪器检测的精密度评估可采用高、中、低3个浓度质控标准品，对每个水平的质控品与常规标本检测同时进行，分别对高、中、低3个浓度质控品做批内和天间合计测试20次[13]，目前多为按每天每样品测试4次，在5 d完成每个质控品的20次检测[14]，计算其SD及变异系数。精密度的好坏通常采用不精密度表示，不精密度通常以变异系数体现[11]。

4 检测过程交叉污染的预防和处理

交叉污染由于受到物理、化学和生物间的干扰作用，可明显影响检测的准确性、精密度，从而增加了检测结果的不确定性，如碱性磷酸酶与淀粉酶对镁离子测试污染率可达10%左右[15]。OLYMPUS平均交叉污染率为0.13%，其中丙氨酸氨基转移酶、总胆红素、甘油三酯的交叉污染率分别为0.01%、0.05%、0[16]。在碱性条件下的反应项目如肌酐苦味酸速率法、果糖胺动力法，因受酸性试剂的影响而反应速率减慢。按自动生化分析仪的检定要求，流动吸收池式仪器的交叉污染率应小于2%[2]。

交叉污染的预防和处理方法包括：(1)利用多数大中型全自动生化分析仪配置的防交叉污染程序，易污染项目在测定前可设计仪器对加样针或/和试剂针用蒸馏水或超纯水冲洗2次以上；(2)在仪器项目检测顺序安排时，尽量将有污染的项目隔开，易污染项目测定当中须间隔2～3个非污染检测项目，或者2个有干扰的项目间至少要有1个非干扰项目, 在样本编号时最好将被干扰项目置于干扰项目之前[15]；(3)将具有相同检测原理的项目放在一起，将具有相同酸碱度的检测项目也放在一起，分类隔离，尽量减少标本与试剂或项目间的干扰；(4)由厂家提供给客户使用的仪器参数、项目的位置安排,建议不要随意更改，防止造成测定结果不可靠；(5)由于仪器故障引起的交叉污染，必要时应邀请本医院工程师或/和仪器厂家或外包维修公司处理，非经使用部门或检验技术人员许可，不得轻易拆修仪器，以免小故障导致大问题。

5 须注意的其他问题

5.1 积极开展室内质控和室间质评活动 室内质量控制是以获得可靠的实验室测定结果为目的，证实测定结果可靠性以及符合规定限制或标准、排除误差的自我监控过程与活动。室间质评即室间质量评价，通常是质量监督管理机构、国内或国际的参比实验室和其他第三方机构采取一定的方法，连续、客观地评价各实验室的试验结果，并发现室内质控不易发现的不准确性，了解各实验室结果的差异，并帮助纠正[17]。两者均对质量管理有益。

5.2 每年1～2次的计量检定和厂家校准检查 全自动生化分析仪在使用中会产生损耗，其性能指标、技术参数会随使用时间、工作频率、工作条件或操作不当而变化，运用法定计量技术与设备对仪器进行周期性鉴定，既是国家法规的要求，也有利于发现仪器设备性能的变化及存在问题，并有效处理和纠正。因此，定期与及时地对仪器设备进行校准、维修，根据检查、校准、维修结果提出合理化建议，使仪器设备处于受控状态具有重要意义[18-19]。

5.3 加强人才培养，强化医学检验技术队伍建设 有不少院校医学检验技术专业的生物化学检验实践教学都存在重手工轻仪器的现象,脱离了临床实际[20]，医学检验队伍学历层次偏低，对检验工作喜爱者仅占4.7%，愿意被称为技师者所占比例很低(6.3%)[21]，如引导或教育不当，技术人才会愈加短缺，爱岗敬业问题也面临新的考验。有研究表明，仅以行政命令推动知识共享难以获得预期效果，还将损害知识传授者的教学热情，并进一步降低组织对内部知识市场进行投入的可能性[22-23]。教育培训方面，尤其是医疗设备应用教学，通过以问题为基础的教学法和结合典型案/病例的教学法能较容易实现教学目的[24-26]。在单位各部门内部形成传、帮、带的良好团队氛围与严谨好学、积极向上的新风尚，有助于克服业务方面的短板与不足[27]。

5.4 仪器安放、环境管理和维护保养 仪器安装水平倾斜度应<1/200，实验室环境温度一般为[(18～32)±2]℃，相对湿度为40%～80%，仪器离墙>50 cm，使用电压(220±22)V，交流电源频率50/60 Hz，仪器接地电阻应小于10 Ω，电源板短路负荷<2 A，闸刀开关与配电板负荷为15 A，应注意配置不间断电源[28]。仪器与配电盘及给排水设备的距离应<10 m。仪器室内无移动电话、对讲机等电磁干扰，附近无离心机等高频放电电器及大功率电器，以防影响仪器的正常运行。仪器室应清洁少尘，有适当光线与通风透气，无阳光直射，不能用电扇直吹，不能在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所安装和使用仪器[1]，并且安全设施完善，走廊无障碍。实验室内应有相关的卫生与安全标识。仪器按国家有关规定进行分类编码，关键设备应用唯一性标识[29-30]。

全自动生化分析仪由于功能多，结构较复杂，维护保养难度较大，要求维护保养人员具有高度的责任心与较好的技能，了解并熟练掌握其性能及结构特点，努力做好各项工作，确保仪器处于长期稳定、性能指标合格、数据安全的良好状态[31-32]，尤其强调对医用大型设备和关键设备的定期检查、检验、校准、保养、维护，必须达到计/剂量准确、辐射防护安全、性能指标合格等，保障医疗质量安全[28，31]。

6 结 语

为了进一步做好全自动生化分析仪的检测质量控制，首先要注意科学地利用全自动生化分析仪的结构优势与性能特点，严格落实质控试剂和受检样品的质量管理，认真把握准确性与精密度这两个质量控制核心指标的检验与评估，注意预防和控制检测质量的干扰因素与交叉污染，积极开展室内质控与室间质评以及每年1～2次的计量检定和厂家检验校准，并有效加强人力资源管理与人才培养教育，强化与完善操作规程等质量与安全管理体系和管理规章制度建设，认真做好仪器安放、实验室环境管理和仪器维护保养各项工作，使全自动生化分析仪的检测质量控制及管理工作成为临床诊疗服务的有效保障。