上皮性卵巢癌化疗增敏方法及机制的研究进展

王 永，闻先萍，杨军文

(皖南医学院弋矶山医院妇产科，安徽 芜湖 241000)

卵巢癌(Ovarian cancer，OC)是女性最致命的生殖系统恶性肿瘤，有数据统计表明2018年全美国共计有22240例新发病例和14070例死亡病例，其发病与死亡均位于女性恶性肿瘤前列[1]。上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer,EOC)作为最常见卵巢癌病理类型，约占总体的90%以上。外科肿瘤细胞减灭合并术后化疗是目前EOC的主要治疗方法，根据NCCN指南给出的化疗方案首选使用紫杉烷类联合铂类。多数患者在经过初次治疗后症状得到有效的缓解，但大部分在治疗后的5年内会出现复发、转移以及死亡，使得治疗失败，高治疗失败率归咎其原因，多与化疗耐药产生有关，化疗不敏感，达不到理想的治疗效果，因此对于提高EOC对化疗药物敏感性的研究意义非凡。本文将就最新的关于如何实现EOC化疗增敏的方法研究进行归纳综述。

1 靶向靶点增敏

液泡ATP酶(V-ATPase)为存在于细胞或囊泡膜上的质子泵，能够调节细胞内外的pH值。Shine.L等人[2]研究指出，在癌细胞中，胞膜相关的V-ATPase会挤出质子并酸化细胞外基质，通过抑制和破坏肿瘤的pH梯度，加快化疗药物在肿瘤细胞中的代谢，缩短作用的时间。Arpita Kulshrestha等[3]人发现在耐药的卵巢癌细胞中V-ATPase′a 2′亚型(V0a2)的表达明显升高，通过进一步研究发现，VOa2可以酸化耐药OC的胞浆，从而减少耐药OC细胞对铂类介导的DNA损伤，使得化疗的敏感性降低，从而产生化疗耐药。有学者发现给予肿瘤细胞质子泵或者 V-ATPase抑制剂可以提升化疗的细胞毒作用，增加治疗的敏感性，深入研究得出V0a2的抑制会阻断自噬通量并抑制促进顺铂介导的细胞死亡的ERK/MEK途径[4]。因此，我们认为抑制V0a2可以提高内源性和外源性凋亡促使癌症细胞的死亡，降低耐药OC细胞的保护性自噬水平，进而提高化疗的敏感性。热休克蛋白60(HSP60)是一种线粒体伴侣蛋白，作为EOC细胞上的另一靶点，已被指出与OC患者总体生存率密切相关。Amy K.Harper等[5]研究发现，使用单克隆抗体靶向EOC中的HSP60联合化疗时对细胞杀伤具有显著的协同作用，HSP60可作为诱导EOC细胞细胞毒性的潜在靶点。HSP60的表达能够抑制抑癌基因p53和caspase依赖的凋亡，通过靶向HSP60减少其表达，使得凋亡增加，化疗效果随之增强[6]。还有报道指出，miR-130b在耐药的OC细胞中的表达是呈下调或者沉默的，这提示了其与肿瘤化疗耐药的产生正相关[7]。有学者发现研究[8]，miR-130b可以诱导转录激活物TAp63(一种已知的肿瘤抑制因子)自我激活，同时可以增强野生型p53和规避突变型p53；miR-130b/TAp63轴还可介导BCL2基因，以此影响着肿瘤细胞的凋亡、迁移及侵袭，使得化疗效果增强。再者还有一些近年来研究较为广泛的经典靶向，例如血管内皮生长因子-VEGF受体和血管生成素的表达高低被发现与OC的预后呈正相关，与OC细胞的生理发展过程密切联系，此外，聚腺苷酸二磷核糖聚合酶(PARP)、程序性细胞死亡1(PD-1)及其配体PDL-1，这些靶点能够影响癌症细胞的DNA的损伤修复及躲避免疫系统的能力，促凋亡，故而联合化疗药物使用可以增加化疗的敏感性[9]。这些化疗增敏的靶点与化学抑制剂不同，靶向相应靶点将特异性增加OC细胞的凋亡，这也能够使得药物对正常细胞的毒性降低，减少了治疗的副作用。

2 载体介导增敏

常规的静脉化疗给药，化疗药物会爆发性的释放，不仅会加重正常器官的损伤，还影响化疗的效果。因此运用一定的载体使化疗药物缓慢可控的释放不仅减少了化疗的副作用还能提高化疗的效果。我们发现纳米颗粒技术可担此重任，作为药物的载体，靶向的运输治疗药物，并使得药物在目标中可控的释放，能够有效的减少治疗的副作用。Muhammad Muzamil Khan等[10]运用脂质-聚合物杂化纳米颗粒作为姜黄素与顺铂化疗作用的载体进行研究，发现该颗粒可以将化疗药物送达至特定的癌细胞，再以一种受控的方式释放，并展示出了更强的细胞毒性作用，以及更小的副作用。还有相关报道指出[11]，OC细胞的代谢对半胱氨酸和谷胱甘肽(GSH)有很大的依赖，而这些硫醇可以在卡铂暴露的情况下保护OC细胞免受伤害，因此硫醇类产生的增加影响了化疗的效果。L-丁硫氨酸亚砜亚胺(L-buthionine sulfoximine，L-BSO)，作为γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶抑制剂，可以有效的抑制GSH的合成，同时还能够减少细胞中GSH参与生理活动，降低其利用度，使肿瘤细胞对卡铂的耐药性降低[12]。Adriana Cruz等[13]发现叶酸聚脲树状大分子(PUREG4-FA2)纳米颗粒是L-BSO合适的运输载体，运用此载体可以将L-BOS靶向运送至OC细胞，降低了对正常细胞的损伤，使治疗更具有针对性，该研究还观察到L-BOS通过该种治疗，使肿瘤的大小、GSH的水平及腹膜扩散的程度显著降低，实现了增强化疗效果的目的。

3 药物增敏

有实验表明，二甲双胍的使用可以使得OC细胞的生长被抑制，一些研究还证实了二甲双胍和紫杉醇联合化疗可以明显提高化疗的敏感性[14]。De-Hua Wei等[15]研究发现化疗时联合使用二甲双胍，可使低浓度的化疗药物发挥出更高水平的化疗效果。通过进一步的研究发现，二甲双胍是通过作用于基因P53及线粒体基因组D-loop区，影响了肿瘤细胞的凋亡及生长，进而产生化疗增敏的效果。Guoqiang Jiang等[16]发现隐丹参酮也有化疗增敏的效果，其对OC细胞具有明显抗肿瘤作用，使OC细胞对铂类化疗敏感。隐丹参酮作用的机制是它参与了调节凋亡相关蛋白，使得Bax/Bcl2比值增高，通过线粒体相关和caspase依赖的凋亡途径，调节OC细胞的凋亡；再者在常规铂类化疗的同时联合使用隐丹参酮，发现可以明显诱导OC细胞的DNA损伤及凋亡升高；此外，隐丹参酮可以降低OC细胞中的MMP-2和MMP-9的蛋白水平，抑制OC细胞的侵袭及迁移，使之达到化疗增敏的效果。另有一药物—姜黄素，它可以在细胞的G2/M期时抑制细胞增殖周期，使细胞对辐射更敏感，同时还可通过抑制DNA拓扑异构酶II诱导OC细胞的凋亡，并已证实其与化疗药物联合使用，可增加耐药癌细胞对化疗的敏感性[17]。

4 其他

近年来临床上一些新的化疗给药方式同样也表现出减低卵巢癌化疗耐药的发生，增加化疗的效果。杨杨等[18]学者发现，中晚期的OC患者术后联合腹腔热灌注化疗，可以明显降低OC的复发率和延迟了治疗后的复发时间，其机制是热灌注能够使OC细胞膜通透性增加，化疗药物更易进入肿瘤细胞内，肿瘤细胞中的化疗药物浓度提高，化疗效果也相应的得到了提升，使得化疗耐药的产生大大减少；再者腹腔热灌注通过与OC细胞直接的接触，可以直接有效地杀灭腹腔中游离OC细胞，减低了腹腔转移的可能性。另有学者研究指出，OC化疗耐药的产生可能与肿瘤细胞的自噬作用降低有关，秦佳乐等[19]研究发现，激活紫杉醇耐药的OC细胞的自噬活性,可导致OC细胞的死亡增加,提升了对紫杉醇化疗的敏感性。也有临床工作者使用携带 hTERT 启动子的重组腺病毒载体感染化疗耐药的OC细胞[20]，发现顺铂对耐药的OC细胞杀伤力明显增加，其原因是重组腺病毒的介导产物可以影响ERCC1基因的表达，使肿瘤细胞生长受限；同时还可增强化疗药物对肿瘤细胞DNA的损伤，诱导并促进凋亡发生，增加了顺铂对肿瘤细胞的杀伤效果。与此同时还有很多其他与卵巢癌化疗增敏相关的方式及药物仍在不断探索中，等待着我们继续去发现。

5 总结

化疗药物在临床上的使用对于卵巢癌的治疗、减少治疗后的复发转移以及增加患者的生存周期有着非同一般的意义，但是化疗耐药的产生，严重制约了化疗应有的效果，这无疑是给患者的生命线上形成了一道天堑。尽管国内外众多学者对于如何增加化疗效果进行了孜孜不倦的研究，同时也提出或给出了相应对的方法，使得化疗的效果一定程度上得到了提升，降低或延缓了化疗耐药的发生，但最终耐药的产生并且复发的结局不可避免，因此，对于增加化疗敏感性的研究仍然任重而道远，仍需要我们不断积极的去探索去发现。