岩 锐
(云南省普洱市孟连县动物卫生监督所,云南 普洱 665800)
猪瘟病毒(CSFV)属于黄病毒科瘟病毒属,该病原感染猪只后可引发严重的临床症状,其中包括体温升高、饮食欲废绝、皮肤发绀、腹泻或便秘,且妊娠母猪可出现繁殖障碍性疾病(如流产、死胎等),而特征性病理变化则包括有脾脏边缘梗死、肾脏表面点状出血、回肠末端等处有纽扣状溃疡等[1-2]。猪圆环病毒2型(PCV2)是导致断奶仔猪多系统衰竭综合征的重要病原之一,该病原可感染不同发育阶段猪群,但对仔猪危害更为严重,可导致病畜出现淋巴结肿大、呼吸困难等症状,是重要的可引起猪群发生免疫抑制的病原,对我国养殖业危害巨大[3]。
目前对于传染性病原的防控主要依赖于疫苗的免疫接种与加强饲养管理水平等,但部分猪场在对猪群进行疫苗免疫接种时往往存在少打或漏打的情况,或者免疫程序不科学合理,疫苗运输保存方法不科学等原因,都会导致猪群对特定病原存在特定免疫空窗期,极易受到相应病原的感染。文章以一例CSFV和PCV2混合感染的案例诊断与治疗为切入点,详细阐述其发病原因与诊断经过,为此类疫病的防控提供科学参考。
孟连某生猪散养户饲养母猪30余头,同时在2020年7月中旬从外购入60余头保育猪进行饲养。8月初,该场新购的部分保育猪开始发病,主要表现为精神沉郁、采食量下降、体温升高等,同时伴有腹泻和发抖症状。养殖户采用抗生素药物治疗基本无效,期间已有18头保育猪发病,6头发病死亡。其后,养殖户于8月20日至孟连县动物卫生监督所进行报告并咨询诊断、治疗方法。
笔者前往该场进行现场诊断,对即将死亡的病猪进行解剖,观察其病理变化。剖检发现病猪喉头会厌软骨有点状出血、全身淋巴结肿大且充血或出血,肾脏表面有大小不一的出血点,肺脏出血并伴有局部肺小叶肝变,脾脏边缘有梗死灶;此外,病猪肠道出血,且回盲瓣及空回肠黏膜面有大小不一的纽扣状溃疡。
采集病猪病变明显的脏器组织,如肾脏、脾脏、淋巴结、扁桃体等组织,分别装入洁净的封口袋并标记,低温保存并送至疫病诊断中心进行实验室诊断。用灭菌镊子和眼科剪在生物安全柜内取适量组织样品,将组织样品剪碎后与适量灭菌生理盐水混合,并充分研磨,将研磨液过滤后,取上清样品进行实验室诊断。
用无菌接种针反复穿刺内脏组织样品后在鲜血琼脂培养基表面进行平板划线,其后将培养基平皿倒扣在37 ℃恒温箱中培养24~48 h,并每隔12 h拿出观察培养基表面是否有菌落长出。结果发现,培养基表面未生长出菌落;为进一步确定,笔者将发病组织新鲜切面直接触片后进行革兰氏染色镜检,结果在触片中也未发现细菌,提示本次猪群发病非细菌感染引起。
取200μL上述研磨上清用商业化DNA/RNA提取试剂盒进行核酸提取,采用PCR方法分别检测猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、圆环病毒2型(PCV2)和伪狂犬病病毒(PRV)。结果在病猪内脏组织中仅检测出CSFV和PCV2核酸呈阳性,且进一步测序结果表明,该场获得的CSFV毒株与GenBank收录的HNCS-2011a株(登录号:JX898523)同源性最高,为2.1c亚型;而PCV2毒株则与GenBank中SX1501株(登录号:KJ187306)同源性最高,为PCV 2d亚型。
通过临床及实验室诊断结果,最终判定该场猪群发病由CSFV和PCV2混合感染所引起,且均为野毒感染。由于病猪未出现明显的PCV2感染导致的示病性症状,所以可以认为猪群发病主要由CSFV感染引起。
据了解,该批外购保育仔猪的免疫背景不清楚,而本猪场免疫接种过CSFV和PCV2疫苗的猪群均未发病,故笔者推测该批发病外购保育猪群可能是由于猪瘟疫苗免疫失败(受母源抗体干扰)或未免疫从而导致临床发病。因此,马上对全群外购保育猪紧急免疫接种猪瘟E2亚单位疫苗1头份/猪。
将发病猪群与健康猪群进行隔离饲养,为提高发病猪群存活率或免疫力,在每吨饲料中添加茯苓多糖1 kg,均匀搅拌后给猪群饲喂,连续饲喂2周;在猪群饮水中添加葡萄糖和电解多维。此外,为防止继发感染,在饲料中也添加多环西素(500 g/t),连续用药2周。
紧急防控措施实施1个月后,回访该养殖场,该场原先发病猪群基本康复,新生仔猪未出现疑似感染CSFV相关症状。此外,对采集的20份血清样品(仔猪、母猪和保育猪分别为5、5和10份)进行CSFV抗体检测,发现猪瘟抗体阳性率达95%,平均阻断率达75%以上。
猪瘟在我国流行历史悠久,目前该病在我国流行特点以散发和混合感染为主,虽然该病在我国规模化猪场发生频率较低,但该病仍对我国养猪业的健康发展具有很大的威胁。对于猪瘟的防控主要依赖于疫苗免疫接种,猪瘟兔化弱毒疫苗推广应用是我国防控猪瘟的主要措施之一,但对发病猪群免疫接种弱毒疫苗会导致病毒被体内中和抗体所清除,影响免疫效果,故不适合对发病猪群进行弱毒苗紧急免疫[4]。在本案例中虽然诊断结果表明保育猪群发病主要是CSFV和PCV2混合感染引起,但病猪未表现出PCV2感染的典型症状,因此,推测PCV2感染并非此次案例的主导感染,故而主要对猪瘟进行紧急防控,通过对猪群紧急免疫接种猪瘟E2亚单位疫苗最终使疫情得到控制,E2蛋白可诱导猪群产生针对CSFV的中和抗体,且其中含有的E2蛋白远高于弱毒疫苗,且其产生的免疫应答受母源抗体干扰小,故可取得较好的防控效果。
由于猪群未表现PCV2感染典型症状,通过在饲料中添加多糖、维生素等手段提高猪群免疫力,同时对猪群进行抗生素治疗防止继发感染,使得该场猪群疫情得到有效缓解。值得注意的是,若猪场考虑对猪群CSFV和PCV2进行净化,需要定期对猪群免疫接种相应疫苗,同时结合抗体监测及时补免,对病原阳性猪群进行隔离治疗或淘汰等也十分必要。