香茅草粉替代抗生素对文昌鸡生长性能的影响

石庆珍，宋冠中，郇树乾

（海南大学动物科技学院，海南 海口 570228）

海南文昌鸡因产自文昌而得名，是海南省地方优良肉鸡品种，以其体形方圆、脚胫细短、皮薄骨酥、肉质香甜嫩滑、营养丰富、百吃不厌等特色，驰名中外。 有研究发现，在畜禽饲料中添加少量抗生素能够使畜禽长得更快，因此，抗生素开始大范围应用，并逐渐普及到畜牧生产之中［1］。 在最初几十年中， 抗生素的添加给畜牧生产带来了良好效益，但近些年来，人们发现了越来越多的抗生素带来的不利影响。抗生素被畜禽机体吸收后会蓄积在肝和肾等器官，虽然能杀灭有害菌，抑制有害菌在肠道内的繁殖，但对有益菌也有一定影响。 畜禽持续饲用抗生素后，会导致机体的免疫力降低、肠道微生物和菌群失调、肠道吸收营养物质能力下降，且会导致有害菌的耐药性增强［2-3］；抗生素在畜禽体内残留或随粪便排出还会对消费者以及周边环境造成不良影响。 有研究显示，抗生素在进入畜禽体内后残留方式有2 种， 一种是共价结合代谢物的形式，少量抗生素不会对人体产生影响，但如果摄入大量含有抗生素残留物的畜禽产品会导致残留物在人体内蓄积，造成体内器官病变甚至癌变；另一种是聚积状态或者游离状态下的保药性的代谢物［3］。 根据我国农业农村部发布的第194 号公告，从2020 年7 月1 日起禁止在饲料中添加抗生素类添加剂，无抗饲养成为未来养殖业发展的必然趋势。

目前具有一定功能的植物添加剂不仅不会使细菌产生抗药性、无毒害和副作用，在畜禽体内也不会有残留，近年来被广泛应用于畜禽生产。有研究表明， 在饲料中添加具有药用价值的植物添加剂不仅能让畜禽的生长速度达到添加抗生素的效果，还能改善肉色和风味。风味是评价肉类品质的一个重要标准， 而风味的好坏来源于肉中众多游离氨基酸， 游离氨基酸能够赋予肉类酸甜苦鲜各种滋味。 植物提取物能够影响肉中的游离氨基酸的种类与含量，使肉呈现出更好的风味［4］。 香茅草作为海南传统的经济栽培植物，提取物中有很多单体成分有较好的抑菌作用，包括柠檬醛、香茅醛、香茅醇、乙酸香叶酯、香叶醇、橙花醇、芳樟醇等［5］。笔者研究香茅草粉替代抗生素作为饲料添加剂在文昌鸡养殖上的应用效果， 以期为无抗绿色养殖文昌鸡提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物30 只1 月龄文昌鸡 （15 只公鸡、15 只母鸡） 来自海南龙泉集团有限公司文昌鸡养殖基地。

1.1.2 香茅草及抗生素香茅草采自海南大学实验基地， 阿莫西林产自合肥中龙神力动物药业有限 公 司， 规 格：10%， 批 号： 兽 药 字（2016）120511199。

1.2 试验方法

1.2.1 试验日粮配制将新鲜香茅草剪断后放入恒温烘箱105 ℃杀青15 min， 在75 ℃烘干36 h，烘干后放入粉碎机中研磨成粉，按照3%的比例混入基础日粮， 配制成饲喂用日粮， 抗生素按照0.1%的比例混入基础日粮，配制成饲喂用日粮。基础日粮配方组成见表1。

表1 基础日粮组成及其营养水平

1.2.2 试验分组与处理选取1 月龄的文昌鸡，将基础日粮设为对照组、 基础日粮+3%香茅草粉设为试验组1、基础日粮+0.1%抗生素设为试验组2，每个处理10 只文昌鸡（5 只公鸡、5 只母鸡），公鸡、母鸡分笼饲养，共30 只文昌鸡，试验期28 d。

1.2.3 试验动物管理试验鸡在海南大学实验基地动物房中饲养，饲养前对动物房的环境、鸡笼、食槽和水壶进行全面消毒。 试验鸡采用笼养方式，公母分开饲养，防止同一笼里体型较大的公鸡在进食时影响母鸡进食， 试验期间自由采食颗粒饲料，保证水源充足， 自然光照， 保持适宜的温度以及湿度，适度通风。 每天添加2 次饲料和饮水，在8：00和17：00 称重并记录每次添加的饲料量；每天更换并清洗1 次粪盘，记录有无病鸡以及腹泻情况。

1.2.4 测定指标及方法

1.2.4.1 平均日增重、料肉比及解剖测定在饲养试验的正式试验开始前，进行3 d 的预试验，在预试验结束后对试验鸡进行初始体重测定 （称量前禁水禁食12 h）。 正式试验后，在试验开始的第7 天、第14 天、第21 天及第28 天的7：00 对试验鸡进行空腹称重并记录数据， 计算每只试验鸡的增重情况。于称重前一天17：00 清理料槽，记录剩余饲料量并计算当周各组试验鸡总消耗饲料量（当周总饲喂量-剩余饲料量）。计算每组试验鸡每周的料肉比： 料肉比=总消耗饲料量 （g）/总增重（g）， 平均日增重［g/（只·d）］=（终末重-初始重）/（试验天数·鸡只数），平均日采食量［g/（只·d）］=总消耗饲料量/（试验天数·鸡只数）。

每组挑选2 只文昌鸡（一公一母）分别取十二指肠、空肠及回肠上段2 cm 左右，用生理盐水将所取肠道的内容物冲洗干净，放入装有3 mL 多聚甲醛固定液的10 mL 离心管，4 ℃保存备用。

1.2.4.2 肠道样品包埋及切片观察将固定液中的肠道样品取出， 依次放入80%、90%、100%、100%浓度的无水乙醇脱水2 h， 使组织中的水分全部置换出来，放入二甲苯至组织透明，将石蜡浸入组织取代组织中含有的透明剂， 最后将组织置于融化的固体石蜡中制成蜡块，保存备用，用于后续制作切片。 制成的切片用苏木素—伊红（HE）染色，染色后置于倒置显微镜下观察，并用电脑成像截图，测量各肠道样品的绒毛长度和隐窝深度，计算绒隐比， 通过比较各处理的绒毛长度及隐窝深度得出结论。

1.2.4.3 血清中T-SOD、CAT活性及MDA含量测定试验结束后， 宰杀前对试验鸡禁食12 h，不禁水，宰杀时采用颈静脉放血取血法，每只文昌鸡取2 管各5～8 mL 全血，放入冰中冷藏，防止凝血，在30 只试验鸡全部取完血样后， 于低温离心机中3 000 r/min 离心10 min， 取血清于1.5 mL 离心管中，-20 ℃冰箱保存备用。 根据说明书使用酶标仪或分光光度计测量每只试验鸡血清中总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量，得到数据后进行对比得出结论。

1.3 数据处理及分析

试验数据用Excel 应用软件制表，SPSS 应用软件进行统计分析， 采用One-Way ANOVA 检验方法进行单因素方差分析， 利用LSD 法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 饲料中添加香茅草粉对文昌鸡生长性能的影响

由表2 可知， 试验组1 和试验组2 试验鸡平均日增重显著（P＜0.05）高于基础日粮组，试验组2的平均日增重提高了16.17%， 试验1 组提高了11.77%， 试验组1 和试验组2 平均日增重差异不显著（P＞0.05）。3 组平均日采食量和料肉比无显著差异（P＞0.05），试验组2 料肉比比对照组降低了13.43%，比试验组1 降低了14.10%。

表2 饲料中添加抗生素和添加香茅草粉对文昌鸡生长性能的影响 单位：g

2.2 饲料中添加香茅草粉对文昌鸡肠道黏膜形态的影响

饲料中添加抗生素和香茅草粉对试验鸡肠道黏膜形态的影响见表3。 由表3 可知，与对照组相比，试验组1 和试验组2 显著（P＜0.05）提高试验鸡十二指肠绒毛高度， 试验组2 的十二指肠绒毛高度相比对照组提高了30.49%，比试验组1 提高了31.13%；对照组、试验组1 和试验组2 十二指肠隐窝深度和绒隐比差异不显著（P＞0.05），试验组1 和试验组2 绒隐比明显高于对照组， 分别提高了11.30%和8.40%。 试验组1 和试验组2 与对照组相比显著（P＜0.05）提高空肠绒毛高度和绒隐比，对照组、试验组1 和试验组2 空肠隐窝深度差异不显著（P＞0.05），试验组2 空肠绒毛高度相比对照组提高了18.28%， 绒隐比提高了15.97%；试验组1 相比对照组空肠绒毛高度提高了32.18%，绒隐比提高了29.36%。 对照组、试验组1 和试验组2 回肠绒毛高度、隐窝深度、绒隐比无显著差异（P＞0.05）， 试验组2 的回肠绒毛高度和绒隐比相比对照组分别提高了14.58%和20.33%，比试验组1 提高了13.99%和18.30%。

表3 饲料中添加抗生素和添加香茅草粉对文昌鸡肠道黏膜形态的影响 单位：μm

2.3 饲料中添加香茅草粉对文昌鸡抗氧化能力的影响

饲料中添加抗生素和香茅草粉对文昌鸡血清中过氧化氢酶 （CAT） 和总超氧化物歧化酶 （TSOD）两种酶以及丙二醛（MDA）含量的影响见表4。 由表4 可知，试验组1 文昌鸡血清中CAT 活力提高，显著（P＜0.05）高于对照组和试验组2，试验组2 和对照组CAT 活力差异不显著 （P＞0.05）；3组T-SOD 活力差异不显著（P＞0.05），但试验组2和试验组1 的T-SOD 活力相比对照组都有较明显的提升趋势； 试验组1 和试验组2 的血清中MDA 含量都显著（P＜0.05）低于对照组，试验组1和试验组2 MDA 含量无显著（P＞0.05）差异。

表4 饲料中添加抗生素和香茅草粉对文昌鸡血清抗氧化能力的影响

3 讨论

3.1 不同饲喂处理对文昌鸡生长性能的影响

试验组1 和试验组2 的平均日增重显著（P＜0.05）高于对照组，且两者无显著（P＞0.05）差异，说明添加香茅草粉对文昌鸡日增重的影响近似于添加抗生素。 另外，3 个处理的日采食量和料肉比均无显著（P＞0.05）差异，但试验组1 平均日采食量在均低于对照组和试验组2 的情况下料肉比最低。 由此可知，在饲料中添加香茅草粉能显著（P＜0.05） 提高文昌鸡的平均日增重， 提高饲料转化率，降低料肉比，在促进文昌鸡的生长速度方面能达到抗生素的效果甚至优于抗生素， 原因可能是香茅草粉能保护肠细胞免受破坏以及提高血清抗氧化能力。

3.2 不同饲喂处理对文昌鸡肠道黏膜形态的影响

小肠是机体吸收营养物质的主要部位， 小肠内绒毛的高度和隐窝深度直接决定了小肠对营养物质的吸收能力。 路静等［6］、李可洲等［7］、王海波等［8］研究显示，小肠绒毛高度越高越能增加小肠绒毛与营养物质的接触面积， 越有利于营养物质的吸收。 绒隐比能体现小肠对营养物质的吸收能力，绒隐比越高代表小肠绒毛发育越成熟、结构更完整、吸收营养物质的能力越强，还可以增加肠绒毛上皮细胞的再生与修复能力，这些作用将直接促进文昌鸡的生长发育与提高饲料转化率。该研究结果发现试验组1 和试验组2 的十二指肠、空肠绒毛高度和空肠绒隐比都显著（P＜0.05）高于对照组，甚至试验组1 的绒毛高度和绒隐比都略高于试验组2，因此，可以得出饲料中添加香茅草粉能够促进文昌鸡的生长发育，代替抗生素在饲料添加剂中的作用，与Tiwari 等［9］研究结果相符。

3.3 不同饲喂处理对文昌鸡血清抗氧化能力的影响

畜禽在正常生长过程中， 体内氧自由基的产生和清除基本上处于动态平衡的状态， 维持正常的生理活动，但在畜禽饲养过程中，可能会由于光照、温度、通风、噪音或称重时对畜禽的抓捕使畜禽受到不同程度的刺激， 诱导体内发生氧化应激反应， 使机体受到不同程度的氧化损伤并产生氧自由基， 氧自由基又能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸（PUFA）引发脂质过氧化反应形成脂质过氧化物如丙二醛（MDA），产生脂类分解产物，这些分解产物中大部分能引起细胞代谢以及功能障碍，甚至死亡［10］。需要增强畜禽的抗氧化能力以使畜禽能产生更多酶清除多余的氧自由基， 防止组织遭受破坏，使畜禽继续维持正常的生理活动。TSOD 能清除超氧阴离子自由基（O2-·），保护细胞和组织免受损伤， 对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用［11］；CAT 则能催化畜禽体内的过氧化氢分解，防止脂质过氧化［12］；MDA 的含量通常可以反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映细胞与组织受损伤的程度。 试验结果显示，饲料中添加香茅草粉能显著提高血液中过氧化氢酶与超氧化物歧化酶的活力， 显著降低血液中MDA 含量。

4 结论

由此可见，在文昌鸡饲粮中添加香茅草粉可作为文昌鸡抗生素生长促进剂的替代品， 提高文昌鸡的生长性能与饲料转化率， 提高文昌鸡血清抗氧化能力和抗应激能力， 保护文昌鸡细胞组织免受损伤，代替抗生素在饲料添加剂中的作用，实现无抗绿色养殖。 但试验的不足之处在于试验未研究在饲料中添加不同浓度梯度的香茅草粉对文昌鸡的生长是否有影响， 未找到一个最适合文昌鸡生长的香茅草粉添加比例， 而且未测量血清总抗氧化能力，尚待深入研究。