李延真
摘要:鹅细小病毒病主要侵害20日龄以下雏鹅,20日龄以上少见,大肠杆菌是条件致病菌,在应激反应大、机体抵抗力下降时多发,二者混合感染对养鹅业造成的危害极大。通过临床症状、剖检变化、细菌的培养分离鉴定、病毒的监测确定了二者的混合感染,通过药敏试验筛选出了高敏药物,运用中西药结合取得了很好的疗效。
关键词:小鹅瘟 大肠杆菌 混合感染 细菌 病毒 分离鉴定 药敏试验 精制抗体 硫酸粘菌素
小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的雏鹅急性或亚急性的败血性传染病。主要侵害4~20天的雏鹅。病雏鹅主要以精神萎靡不振、食欲废绝、严重下痢,有的出现神经症状,死亡率高主要为特点,对养鹅业的发展造成了重大的影响。鹅的大肠杆菌病是由致病性的埃希氏大肠杆菌引起的鹅的急性传染病,该细菌是广泛存在于自然界和动物体内的一种条件致病菌。当鹅的机体发生应激反应或有其他的病毒性疾病感染,造成机体抵抗力下降时可使本病发作。本病以2周龄内的雏鹅多发,呈急性败血症。当本病与其他病毒性疾病混合感染时死亡率极高。笔者在2021年6月份曾遇到了这一情况。现将情况报告如下:
一 发病情况
我县某养殖场从本地引进大三花种鹅苗2000羽。进场后按照正常育雏程序进行育雏,用10%阿莫西林100g兑水150KG全天飲用,连用4天,其中雏鹅在出壳24小时内和第3天分别注射小鹅瘟精制卵黄抗体,每只0.5ml,第14天皮下注射新城疫、禽流感(H9)二联油苗,0.4ml/羽。在25日龄发现有拉稀、甩头、肿眼流泪症状,两天后出现零星死亡,本场兽医诊断为感冒与浆膜炎混合感染,用双黄连、复方阿莫西林、卡巴匹林钙混合饮水,连用5天,病情非但没有好转反而死亡增加,每天死亡10多只,并且大群出现病鹅。随来我处就诊。
二 临床症状
养殖场为简易塑料大棚,塑料大棚占地大约有500平方米,运动场是泥土地,由于连续下雨场地泥泞不堪。棚内中间大约有一条2m宽的饲喂通道,两边是鹅的活动区域,显得十分拥挤。鹅群发育极不均匀,大小参差不齐,呈现“祖孙三代”情况。鹅群内有十几只病鹅离开大群、独自站立,病鹅精神沉郁,羽毛松乱,弓背缩头,闭眼呆立,不愿走动或行动缓慢,有的病鹅步履蹒跚不稳、摇摇晃晃、东倒西歪,严重者倒地不起,有的脚掌呈游泳状抽搐。病鹅有的不愿采食或食欲退绝,有的虽然跟随大群采食,但采食时吞咽困难,随吃随掉或丢在一旁。病鹅鼻孔流出无色透明分泌物,鼻孔周围发黑发暗、沾有料渣,病鹅因鼻腔分泌物多并沾有杂物影响呼吸而不停甩头。病鹅严重下痢,排出灰白色或黄绿色稀粪,常呈现小米汤样混浊,带有气泡、未消化的饲料或纤维状碎片,肛门周围绒毛呈黄白色石灰渣样污染。个别病鹅临死前颈部扭转或抽搐,脚掌呈游泳状划动,呼吸困难、衰竭、窒息而死。
三 剖检变化
取病死鹅5只、濒死鹅5只现场解剖。剖检可见心包内有含纤维素性渗出物的积液(3只,占3/10);心包膜增厚、浑浊、呈灰白色(5只,占5/10)。气囊膜增厚表面附着纤维素性或黄白色干酪样渗出物(6只,占6/10)。肝脏肿大,充血出血,胆囊胀大,充满暗绿色胆汁(3只,占3/10),肝脏被膜表面由纤维素性薄膜覆盖,薄膜易分离(7只,占7/10)。脾脏肿大,呈暗红色;胰腺颜色变暗、充血,上有灰白色坏死点(7只,占7/10)。肠道血管怒张,十二直肠粘液增多,黏膜呈现橘黄色,小肠中后段外观膨大,肠黏膜充血、出血、脱落、坏死,肠腔内有大量纤维素性凝块和碎片(3只,占(3/10),有的形成大小不一、灰白色腊肠样栓子(1只,占1/10)。
四 细菌的培养、分离、鉴定
1 取病死鹅的新鲜尸体解剖,用烧过的外科手术刀片烧烙肝背膜后,再用接种环刺入肝实质取样,划线于麦康凯琼脂培养基上做分离培养,至于37°C需氧培养24h,麦康凯琼脂上长出圆形隆起、中间凹陷、边缘整齐、光滑湿润的粉红色小菌落,菌落直径为1—2mm。
2 取红色菌落接种于伊红美蓝琼脂平板,37°C培养24h,可见到紫黑色具有金属光泽的小菌落。
3 取红色菌落接种于普通斜面培养基培养,用该细菌做生化反应。该细菌能够迅速分解葡萄糖和甘露醇,产酸;能够分解阿拉伯糖、木胶糖、麦芽糖、鼠李糖、乳糖,不能分解肌醇;靛基质试验和M.R.实验阳性;不产生尿素酶和硫化氢。确定该细菌为大肠杆菌。
4 取病料在灭菌载玻片上轻轻涂抹一层,让载玻片的标本面向上,然后在酒精灯外焰处快速来回通过3次,同时用手背皮肤感受载玻片背面的温度,以实感不超过60°C,待其自然冷却后,即可进行革兰氏染色。在制备好的涂片薄膜上先后滴加草酸铵结晶紫、碘液进行染色,然后用95%乙醇脱色,最后滴加番红染液染色,冲洗晾干后镜检可见红色、短小杆菌。确定该细菌为大肠杆菌。
5 取病料接种普通营养培养基上,贴上药敏试纸片,置37°C温箱内培养24h,可见硫酸粘菌素、硫酸安普霉素高敏,盐酸环丙沙星、氟本尼考中敏,阿莫西林、青霉素不敏感。
五 病毒的分离鉴定
无菌操作取病死鹅的肝脏、脾脏和肺脏研磨,用灭菌生理盐水制成悬液,离心10min,沉淀后取上清液,每毫升加入青霉素、链霉素各2000单位,接种于12—14日龄鹅胚囊尿囊腔内,每胚2.5ml,置37°C孵化箱内孵化,每天照蛋一次,鹅胚在72—96h内全部死亡,剖检死胚,发现绒尿膜水肿,胚头水肿,胚体皮肤充血、出血、水肿,心肌变性呈瓷白色。用鹅胚尿囊液接种易感雏鹅,并设立空白对照。在感染后5—8天,实验组病死鹅出现小鹅瘟的临床症状和典型病例变化,即肠道严重发炎,小肠黏膜有大片坏死、脱落和凝固,形成栓子,阻塞肠道。对照组则正常。
取5只雏鹅作为实验组,先皮下注射小鹅瘟标准毒株血清2ml,对照组用生理盐水代替血清,然后两组同时注射含毒尿囊液0.1ml/个,结果实验组全部得到保护,而对照组在2—5天内全部死亡。
实验证明该病毒为鹅细小病毒。
综上所述,该雏鹅是由鹅细小病毒和大肠杆菌混合感染引起的大量死亡。
六 防治措施
1 预防 改善饲养环境条件,加强对鹅群的管理,消除不良因素,保持鹅舍内的清洁卫生。良好的通风、适宜的温度、适当的饲养密度、品质优良无霉败变质的饲料、清洁的饮水,这些都能够减少机体的应激反应,避免诱发小鹅瘟和大肠杆菌病的发生和流行。
2 加强消毒工作 认真落实养殖场的卫生防疫措施,全场全方位定 期進行消毒,每周1—2次。对垫料、料槽、水槽、以及周边环境、运动场地用百毒杀和聚维酮碘溶液进行喷雾消毒,二者交替进行。
3 做好日常疾病预防工作 育雏期间,在饲料中适量添加一些抗生素和提高集体免疫力的中草药,可以增强机体的抗病能力、减少大肠杆菌病的发生。
4 治疗 大群立即注射小鹅瘟精制抗体,每只雏鹅皮下注射3ml,同时在水中加入硫酸黏菌素霉素(10%),每升水加入本品0.6g,每天早、晚两次集中饮水,每次饮水2—3h,连用5天。当归、黄芪各240g,白芨、地榆、大青叶各160g,绿豆、甘草各200g,板蓝根320g,水煎服,药汁饮水,药渣拌料,每天一剂,连用3天,每天加药前停水1—2h,2h内将药液饮完。个别严重者人工滴服药液。24h后死亡减少,5天后基本痊愈。
七 小结
1 小鹅瘟多发于20日龄以内的雏鹅,20日龄以上很少发病。本群雏鹅达到30日龄以上,且剖检时特征性病变少、不典型,所以本病被忽视。
2 大肠杆菌是条件致病菌,在饲养环境差、应激反应严重的情况下多发。当时气候条件十分恶劣,高温、高湿、多雨,外部环境条件差,棚内拥挤不堪,造成了本病的大爆发。
3 由于有气囊型大肠杆菌病的存在,个别雏鹅有呼吸道症状,导致本厂兽医 怀疑有温和型禽流感感染而忽略了小鹅瘟的存在。
4 现在养殖业抗生素滥用情况十分严重,这样导致了许多细菌病在治疗时效果很不理想。只有通过药敏实验才能够确立出哪种抗生素对该细菌敏感。
参考文献
1《禽病学》 刁有祥 张万福主编 中国农业科技出版社
2《中草药治疗小鹅瘟》 刘玉玲、魏晓静、陈静 《中兽医医药杂志》 2006年01期
3《鸡大肠杆菌病的实验室诊断和防治》 刘海成 《畜牧与饲养科 学》2015年03期