血清REG4、CA199 水平与胃癌患者化疗预后的相关性

张建立 王彦戈 魏慧娜 辛克北

（郑州市第二人民医院暨南大学附属郑州医院消化内科，河南 郑州 450000）

胃癌作为消化道常见恶性肿瘤，大部分患者就诊时病情已进展至中晚期，多需要接受辅助化疗治疗，化疗的实施主要通过抑制肿瘤细胞DNA复制，诱导肿瘤细胞凋亡，进而产生抗肿瘤之效，但因受多因素影响，部分胃癌患者化疗效果不佳[1]。糖类抗原199（Carbohydrate antigen199，CA199）作为一种含黏液成分的大分子糖蛋白，多表达于肿瘤表面，同时有研究将CA199 用于消化道恶性肿瘤的诊断中获益[2]。

血清再生基因4（Human regenerating gene Ⅳ，REG4）属于依赖性凝聚素超家族之REG 表达产物，其在功能上类似于凝集素、抗凋亡因子或胰腺β 细胞和消化道上皮细胞的生长因子，与胃肠道细胞的增殖分化密切相关[3]。有研究指出，REG4 可选择性表达胃肠道上皮和正常胰腺，在炎症或肿瘤时可见REG4 原位或异位的高表达[4]。结合上述，猜测CA199、REG4 均可能会影响胃癌患者化疗效果，可能与胃癌患者化疗预后有一定关系。基于此，本研究将重点观察血清REG4、CA199 水平与胃癌患者化疗预后的相关性。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

前瞻纳入2018 年6 月至2019 年9 月医院收治的98 例胃癌患者作为研究对象。男66 例，女32 例；平均年龄59.38±6.67 岁；病理分期：Ⅲ期52 例，Ⅳ期46 例。

本研究的实施已获得医院伦理委员会批准，且患者及家属均自愿签署知情同意书。纳入标准：①符合《内科学》[5]中关于胃癌的诊断标准；②无法接受手术治疗或拒绝手术治疗；③预计生存期＞3 个月。排除标准：①合并肝肾功能疾病、肿瘤病史；②有外伤、急性炎症、严重血液系统疾病、溃疡缺血性疾病及其他恶性肿瘤等可能影响REG4、CA199 水平；③既往接受过化疗或距末次化疗时间间隔在6 个月内。

1.2 方法

1.2.1 化疗方案

均采用ECF 化疗方案，第1d：静脉滴注表柔比星（Ebewe Pharma Ges.m.b.H.Nfg.KG，批准文号H20181179，规格25ml:50mg）6.89×10-5g·kg-1，顺铂（Hospira Australia Pty Ltd，批准文号H20140372，规格50ml:50mg）2.22×10-4g·kg-1；第1～21d：静脉滴注5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU ）0.015g·kg-1溶于5%葡萄糖溶液500ml 中，Qd，21 天为1 周期。至少完成3 个周期，并于3个周期后至少观察1 个月。

1.2.2 预后评估方法

于化疗3 个周期，参照《胃癌规范化诊疗指南(试行)》[6]中相关标准，完全缓解（complete response，CR）：肿瘤完全消失超过1 个月；部分缓解（partial response，PR）：肿瘤最大直径及最大垂直直径的乘积缩小50%，其他病变无增大，持续超过1 个月；病变稳定（stable disease，SD）：病变两径乘积缩小不超过50%，增大不超过25%，持续超过1 个月；病变进展（progressive disease，PD）：病变两径乘积增大超过25%。临床控制率=（CR+PR）/总例数×100%，将CR、PR 患者示为预后良好，纳入预后良好组，将SD、PD 患者示为预后不良，纳入预后不良组。

1.2.3 基线资料统计方法

设计基线资料调查表，详细记录患者的一般资料，包括性别（男、女）、年龄、肿瘤部位（胃体、贲门）、病理分期（Ⅲ期、Ⅳ期，参照《美国癌症联合委员会（AJCC）修订的肿瘤TNM 分期标准》[7]）、分化程度（低分化、中分化、高分化，参照《实用肿瘤内科治疗》[8]中相关标准）、肿瘤大小。

1.2.4 血清指标检测方法

治疗前，取患者空腹静脉血3 mL，3000r·min-1离心10min 后，分离上层血清，置于-70℃冰箱中保存，待测，采用酶联免疫法测定CA199、血红蛋白、REG4、CEA 水平，检测试剂盒均购于上海酶联生物科技有限公司。

1.3 统计学方法

采用SPSS 24.0 软件进行数据处理，全部计量资料均经Shapiro-Wilk 正态性检验，符合正态分布以均数+标准差（±SD）表示，组间用t检验；计数资料用n（%）表示，采用χ2检验，等级资料采用秩和检验；采用Logistic 回归分析检验血清REG4、CA199 水平与胃癌化疗预后不良的关系；绘制ROC 曲线检验血清REG4、CA199 预测胃癌患者化疗预后风险的价值，AUC＞0.7 具有预测性能；P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 预后不良情况

经3 个周期化疗且随访1 个月时，98 例胃癌患者中CR 9 例，PR 43 例，SD 24 例，PD 22 例。预后不良46 例，预后不良率为46.93%，预后良好52 例，预后良好率为53.06%。

2.2 预后不良与预后良好胃癌患者的基线资料比较

预后不良组血清REG4、CA199 高于预后良好组，差异有统计学意义（P＜0.05）；组间其他资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 预后不良与预后良好胃癌患者的基线资料比较

2.3 各主要指标与胃癌患者化疗预后关系的Logistic 回归分析

将化疗后预后情况作为因变量（1=预后良好，0=预后不良），将2.2 基线资料中差异有统计学意义的变量作为自变量，逐个纳入作单元Logistics回归分析，后将P条件放宽至＜0.2，纳入符合条件的变量（CEA、REG4、CA199）作为自变量（均为连续变量），结果显示，胃癌患者化疗前血清REG4、CA199、CEA 异常表达与化疗预后有关，三者过表达均可能是胃癌患者化疗预后不良的风险因子（OR＞1，P＜0.05）。见表2。

表2 各主要指标与胃癌患者化疗预后关系的Logistic 回归分析结果

2.4 胃癌患者化疗前血清REG4、CA199 水平预测患者预后不良风险价值分析

将胃癌患者血清REG4、CA199 水平作为检验变量，经化疗预后情况作为状态变量（1=预后不良，0=预后良好），绘制ROC 曲线（见图1）结果显示，胃癌患者化疗前血清REG4、CA199 水平预测患者化疗3 个周期化疗预后风险的AUC均＞0.70，有一定的预测价值，且以联合检测价值最佳。各指标对应最佳阈值、特异度、灵敏度及约登指数见表3。

图1 血清REG4、CA199 水平预测胃癌患者化疗预后不良风险的ROC 曲线图

表3 胃癌患者化疗前血清REG4、CA199 水平预测预后不良风险效能分析结果

3 讨论

既往研究指出，表皮生长因子受体（Epiderma lgrowth factor receptor，EGFR）活化后通过PⅠ3K/AKT 通路和Ras-Raf-EGFR-MAPK 途径将信号传递入核，而异常的EGFR 信号通路与肿瘤细胞的增殖、迁移、抗凋亡、血管生成等密切相关[9]。而REG4 可通过提高B 细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段（B-cell lymphoma/leukemia-x long，Bcl-xL）、B 细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma/leukemia-2，Bcl-2）水平，来激活EGFR/Akt/AP-1 信号通路，继而提高癌细胞存活率[10-11]。由此推测肿瘤患者的REG4 水平与EGFR密切相关二者之间的关系或可解释REG4 表达与胃癌的关系。而CA199 为恶性肿瘤基因表达产物，与多种恶性肿瘤发生密切相关，如大肠癌、卵巢畸胎瘤等，在消化系统出现恶性肿瘤时，癌细胞产生的CA199 经胸导管进入血液循环，可使血清中的CA199 含量明显升高[12-13]。相关报道将CA199 用于胃癌的诊断中获得满意的效果，并指出CA199 表达水平随胃癌转化及病变程度逐渐变化[14]。由此，推测血清REG4、CA199 异常表达不仅参与了胃癌的发生及发展，还可能与胃癌患者化疗预后密切相关。

本研究结果显示，预后不良组血清REG4、CA199 水平高于预后良好组，表明血清REG4、CA199 在胃癌预后不良患者中呈过表达，初步说明胃癌患者化疗前血清REG4、CA199 水平的异常表达可能与患者的预后有关。简单分析可能的原因，REG4 在胃肠道肿瘤中可能通过EGFR 信号通路发挥作用，当REG4 水平升高时，EGFR 被异常激活，并通过作用于细胞信号传导、细胞增殖、细胞调控及血管生成等途径，起到促进肿瘤的发生与发展的作用[15-16]。若化疗药物无法阻断EGFR 信号通路，则难以阻止胃癌患者细胞增殖、血管生成等，因此会影响胃癌化疗效果，这一结果又将反作用促进REG4 水平的升高，进一步增加胃癌患者预后不良风险[17]。而若化疗前血清CA199 水平较高，说明肿瘤的恶性程度较为严重，肿瘤生物学行为较差，多表现为浸润型生长，易侵犯浆膜，这将影响化疗效果，增加化疗预后不良风险[18]。

为进一步证实胃癌患者化疗前血清REG4、CA199 水平与预后的关系，本研究作Logistic 回归分析并绘制ROC 曲线，结果显示，胃癌患者化疗前血清REG4、CA199 水平预测患者化疗3 个周期预后不良的AUC 均＞0.70，预测价值均较理想。上述结果证实，胃癌患者化疗预后不良与治疗前血清REG4、CA199 水平过表达有关，化疗前检测二者水平可用于胃癌患者化疗预后风险评估预测，且若早期检测胃癌患者血清REG4、CA199 水平过表达，建议可及时为患者调整用药方案或增加其他治疗方案，针对血清REG4、CA199 合理进行治疗，或可对改善化疗预后有一定价值。但同时血清REG4 在多种疾病中也呈异常过表达，因此在运用血清REG4 预测胃癌患者化疗预后时，应排除影响血清REG4 水平的相关因素。

此外，本研究经Logistic 回归分析还发现，胃癌患者化疗前CEA 水平过表达与预后密切相关，分析其原因可能是CEA 为胃癌相关肿瘤标志物，CEA 水平过表达可能提示患者出现远处转移，易复发，增加化疗后预后不良风险。

综上所述，胃癌患者化疗前血清REG4、CA199 水平异常表达与化疗预后有一定联系，二者过表达可能提示化疗预后不良高风险，对预测胃癌患者预后不良风险有较高应用价值。