佟盼盼,宋小珍,张敖云图雅,任美灵,张 磊,况 玲,谢金鑫
(新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐 830052)
马病毒性动脉炎(Equine viral arteritis,EVA)是由马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)感染引起的马的一种传染病。EAV属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属[1],是一种球形、基因组为单股线性正链RNA病毒,仅感染马属动物,妊娠母马发病易导致流产,全身小动脉壁肌细胞坏死、内膜上皮损伤造成的特征性出血、水肿、血栓和梗死等[2]。EAV通过呼吸道和生殖道途径在马中间传播[3]。急性感染期间马的尿液、呼吸道分泌物、流产胎儿及其胎膜等均能传播EAV。EAV在感染马体内的带毒时间较长且易于传播,给养马业造成巨大的经济损失[4]。
在我国EVA的相关研究主要集中在致病机理[5],而对EVA流行病学研究相对较少。为掌握现阶段EVA在新疆地区马匹中的流行情况,本研究采用间接ELISA方法调查新疆伊宁、昌吉、哈密和巴音郭楞蒙古自治州(巴州)的伊犁马、哈萨克马、焉耆马、伊吾马和纯血马的EAV感染情况。
1.1.1 血清样品 2019年从新疆伊宁、昌吉、巴州和哈密采集马血清样品388份,包括纯血马100份、伊犁马133份,焉耆马43份,哈萨克马78份,伊吾马34份,详细信息见表1。
表1 不同品种马病毒性动脉炎抗体检测结果
1.1.2 主要试剂 EVA抗体检测试剂盒,西班牙英吉纳(Ingenasa)公司产品。试剂盒组成:96孔板包被阳性抗原、96孔板包被阴性抗原、阳性对照血清、阴性对照血清、结合物、洗涤剂、稀释液、底物溶液和终止液。
1.1.3 主要仪器 酶标仪(M200 Pro),Tecan公司产品;电热恒温培养箱(Bluepard),上海一恒科学仪器有限公司产品。
参照西班牙英吉纳EVA间接ELISA抗体检测试剂盒说明书检测EVA血清抗体,并对不同地域来源、品种及性别马的EVA抗体阳性率进行统计分析。
昌吉、伊宁、巴州和哈密地区马EVA血清抗体阳性率分别为7.50%(18/240)、2.74%(2/73)、41.46%(17/41)和8.82%(3/34),其中巴州与其他地区差异显著(图1)。
图1 不同地区马血清病毒性动脉炎抗体检测结果
纯血马、伊犁马、哈萨克马、焉耆马和伊吾马EVA血清抗体阳性率分别为2.00%(2/100)、4.51%(6/133)、15.00%(12/80)、41.46%(17/41)和8.82%(3/34),差异显著(P<0.05),其中哈萨克马和焉耆马的EVA血清抗体阳性率较高(图3)。本土马(伊犁马、哈萨克马、焉耆马和伊吾马)EVA血清抗体阳性率显著高于纯血马(P<0.05)(图3)。
图2 不同品种马血清病毒性动脉炎抗体检测结果
图3 不同地区来源马血清病毒性动脉炎抗体检测结果
公马和母马EVA血清抗体阳性率分别为12.87%(35/272)、4.31%(5/116),公马显著高于母马(P<0.05)(图4)。
图4 不同性别马血清病毒性动脉炎抗体检测结果
2013年,阿依吐拉等调查发现新疆巴州EVA血清抗体阳性率为1.26%[6]。本研究中,新疆包括巴州等地的EVA血清抗体阳性率为10.31%(40/388),表明EAV感染率呈上升趋势。2016年,Abdelsalam Q等报道日本EVA血清抗体阳性率为2.4%(6/254)[7]。2017年,Lazic S等调查欧洲塞尔维亚EVA血清抗体阳性率为15.88%(54/340)[8],表明EVA在不同国家感染率不同。
Holyoak G R等报道EVA血清抗体阳性率在同一国家不同地区存在差异[9],EVA在我国新疆不同地区马匹中的流行率为2.00%~41.46%,也存在地区差异。美国、加拿大、澳大利亚和欧洲国家调查发现纯血马EVA血清抗体阳性率显著低于其它品种马[10-12],在新疆纯血马EVA血清抗体阳性率显著低于伊犁马、哈萨克马、焉耆马和伊吾马。此外,本研究的结果表明,EVA血清抗体阳性率与马匹性别相关,公马EVA血清抗体阳性率显著高于母马,这与先前报道结果相一致[11,13]。
本研究为我国EVA流行病学研究奠定基础,提示在马匹跨地区转运时,检疫部门应酌情开展EAV的感染检测,规避引种带来的生物安全风险,对促进马产业健康发展具有重要意义。