甘草配方颗粒制备工艺和质量标准研究

张书嘉，程雪丽，高 路，方婷婷

（江苏康缘药业股份有限公司生产部，江苏连云港 222000）

中药甘草为豆科甘草属植物甘草的根和根茎，性平、味甘，具有和中缓急、调和诸药的功效，通常用于调和诸药或治疗脾胃气虚证、挛急疼痛、咳嗽痰多、痈肿疮毒等情况，在临床中有着广泛的应用。中药配方颗粒是在传统中医理论指导基础上，利用现代化科技手段将常规中药饮片按照科学生产工艺制备而成的，可供临床调剂所用的颗粒状成品。中药配方颗粒不仅实现了中药生产自动化，确保了成品的质量，同时还有效避免了传统调剂过程中中成药难以随症加减的情况，也使得药物服用更加便捷，对于提高患者用药依从性有着积极的作用。本文通过建立甘草配方颗粒的制备工艺和质量标准，为有效控制产品质量，提高临床用药安全性提供参考。

1 材料

1.1 试药

甘草对照药材（成都新荷花中药饮片有限公司，批号为200715）购自同仁堂药房；甘草苷（品号为200411，含量为98.62%），甘草酸铵（批号为201005，含量为99.35%）：均购自中国食品药品鉴定研究院；甘草饮片（批号分别为2001009、2003022以及2008002）购自中药饮片厂，经药物研究所专业研究员鉴定；甲醇，乙腈均为色谱纯；其他试剂均为分析纯；实验用水均为去离子水。

1.2 仪器

高效液相色谱（LC-10ATvp，日本岛津公司）；暗箱三用紫外分析仪（ZF-7，上海佳鹏科技有限公司）；分析天平（SB210S型，北京赛多利斯天平公司）；数显式恒温水浴锅（HH-5型，常州翔天实验仪器厂）；薄层层析硅胶板（G型，青岛海洋化工有限公司）；Chemstation工作站（美国Agilent公司）；超纯水系统（Milli-QA10型，美国默克密理博公司）；数控超声波清洗器（KQ-600型，昆山市超声仪器有限公司）。

2 方法及结果

2.1 甘草提取工艺

根据研究需要设计预实验，并根据预实验所得结果，应用L9（3）4正交表开展实验研究。以甘草酸转移率和出膏率作为考察指标，以煎煮次数、提取时间以及加水量作为药物制备的三个影响因素，因素水平见表1。

表1 因素水平

2.2 实验设定及结果

精准称取预备好的每个批次甘草饮片各3份，每份10g，共计9份样本，按照正交设计表的各项实验设计方法进行煎煮加工，将所得的煎煮液进行浓缩，测定制备好的煎煮液中甘草酸的转移率、出膏率，见表2、表3。

表2 甘草颗粒加水煎煮正交实验

续表

表3 方差分析表

通过表2和表3能够看出，三项影响因素对甘草浸成品影响效果分别为A＞C＞B，且A3＞A2＞A1、C3＞C2＞C1、B2＞B3＞B1，即各项因素中以煎煮次数对成品质量影响最大。考虑到生产成本和节约能耗等问题，在确保有效成分提取充分的前提下，综合各个因素的影响效果，最终确定制备工艺为煎煮提取3次，每次1h，加水量为10倍量。

2.3 甘草配方颗粒制备

根据相关理论，按照干膏与辅料配比1∶1的比例加入辅料乳糖等，将浓缩药液泵入制粒机内，采用全自动颗粒制粒机制得甘草配方颗粒。制备时设定参数为进风温度90℃，物料温度为60℃，雾化压力I为0.15MPa，雾化压力II为0.20MPa。

2.4 甘草配方颗粒定性鉴别

精准称取配方颗粒1.0g，加入纯水40mL充分溶解后使用正丁醇振荡提取3次，每次为20mL，将3次提取的正丁醇液混合，使用水洗涤3次，每次为20mL。蒸干正丁醇液后在残渣内加入甲醇5mL，充分溶解后制得供试品溶液。再以同样方法制备同体积的阴性对照和对照药材溶液。使用乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水作为展开剂，展开取出后常温晾干，再以10%的硫酸乙醇作为显色剂，在105℃条件下加入，直至可见清晰的斑点，再在365mm紫外灯下对甘草苷TLC色谱图进行观察，结果可见，供试品与对照药材的色谱图显色情况基本接近。

2.5 含量测定

以上述方法制备好适量的对照品溶液，然后再精准称取甘草配方颗粒1g，置入到具塞锥形瓶内，加入70%的乙醇100mL，密封后称取质量，超声45W 30min，冷却后称重。再以70%的乙醇来补足缺失的质量，摇晃均匀后滤过，提取滤液再次过微孔滤膜。将制备好的供试品溶液和对照品溶液在365mm波长下行色谱分析，结果可见，制备好的供试品溶液内相关成分含量与对照组溶液基本接近。

2.6 精密度实验

精准称取对照品溶液10μL，按照上述色谱条件对对照品样本重复测定6次，结果可见，甘草苷、甘草酸的峰面积RSD值分别为1.29%和2.03%，可见仪器的精密度较好。

2.7 稳定性实验

精准称取同一批次的供试品溶液10μL，在静置0、4、8、12以及24h时，对样品进的甘草酸和甘草酸行色谱鉴定，结果可见，甘草苷、甘草酸的峰面积RSD分别为2.68%和1.60%，可见制备好的甘草配方溶液在24h内稳定性较好。

2.8 重复性实验

分别精准称取同一个批次的样品5份，按照上述甘草配方颗粒制备方法制成供试品溶液，按照设计好的色谱条件对其甘草苷和甘草酸苷含量进行测定，计算所得RSD分别为1.89%和0.91%，可见该制备方案操作重复性较好。

2.9 加样回收实验

精准称取制备好的甘草配方颗粒粉末0.5g，平行6份，置入到50mL量瓶内，按照1∶1的比例加入对照品溶液，然后按照上述方法制备供试品溶液，精准抽取10μL，在365mm紫外灯下行色谱鉴定，并对回收率进行计算。结果可见，甘草苷和甘草酸平均加样回收率为98.42%和97.51%，RSD则分别为1.92%和2.21%。

2.10 样本含有量测定

精准称取不同3个批次制备好的甘草配方颗粒各1g，按照上述方法制备成供试品溶液，精准抽取1μL后，设定好的色谱条件下行进样测定，计算指标的含有量，结果可见甘草苷和甘草酸含有量RSD分别为2.49%和2.72%。

3 讨论

甘草苷以及甘草酸都是甘草的有效活性成分，具有良好的水溶性，能够被热水所提出，因此目前常作为甘草质控观察指标。本次研究采用正交实验对甘草配方颗粒制备工艺进行研究，结果显示，以煎煮提取3次，每次1h，加水量为10倍量组为制备工艺制备所得甘草配方颗粒具有良好的稳定性和可重复性，该参数不仅有效提高了成品质量，还能够最大程度上降低成产成本，有利于大规模生产应用。

4 结论

以煎煮提取3次，每次1h，加水量为10倍量组为制备工艺制备所得甘草配方颗粒具有良好的稳定性和可重复性，该制备工艺设计合理，质量稳定，质控方法简便，适宜工业化批量生产。