瓜蒌的组培快速繁育

张成华

（北京艾比蒂生物科技有限公司 北京 102200）

瓜蒌（Trichosanthes kirilowii Maxim.），多年生攀缘型草本植物。分布在辽宁、华北（北京、天津、河北、内蒙古、山西、山东）、华东、中南、陕西、甘肃、四川、贵州和云南。喜生于深山峻岭、荆棘丛生的山崖石缝之中。其果实、果皮、果仁（籽）、根茎均为上好的中药材。具有很高的药用价值，有抗菌、抗癌、抗溃疡、延缓衰老、祛痰、泻下等作用。瓜蒌在我国种植历史悠久，近几年研发出了瓜蒌延伸食用产品，开创了全新的农业特色产业，市场前景非常好。组培瓜蒌苗需求十分紧张，具有成活率高、抗逆行强的优势。为满足市场对瓜蒌组培苗的需求，我们对此进行了组培探索和试验。

1 试验材料

瓜蒌皖9品种

2 试验方法

选取生长旺盛、无病虫害的瓜蒌的嫩条，首先剪成含有一个单芽的茎段，剪去多余的叶子，再流水冲洗0.5h，转入超净工作台上，75%乙醇浸泡30s，5%的次氯酸钠浸泡消毒2-3min，浸泡过程中要经常摇动瓶子，以使次氯酸钠与材料充分接触，倒掉次氯酸钠溶液，用无菌水漂洗3-4次，滤纸吸干外植体表面的水分，最后剪去次氯酸钠溶液接触过的切口部位，即可用于接种。

3 材料的培养

3.1 诱导培养

将接种的材料放在培养室内培养，培养条件温度20-28℃，光照1500-2000lx，光照时间12h白天，12h黑夜，这样有利于腋芽的分化。茎段培养大约15天左右就可看到小的不定芽开始从外植体上长出（图1图2图3图4表1），此腋芽处营养丰富，细胞分裂能力强，再分化比较容易。在诱导培养阶段我们采用4种培养基进行培养，

图1

图2

图3

图4 外植体诱导的腋芽

表1 瓜蒌外植体诱导生长测定

①MS+BA0.4mg/L+NAA0.04mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

②MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

③MS+BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

④MS+BA0.2mg/L+IAA0.6mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

通过以上4种培养基，试验结果与分析：从图和表中可以看出1号处理长出1-2个腋芽，不定芽粗壮，2号处理不定芽长势缓慢，3号处理比2号处理稍好，4号处理长势旺盛，不定芽长度比其它三个都长，而且还有叶子平展开。那么我们的结果表明细胞分裂素BA为0.2mg/L时，生长素IAA0.6mg/L时，瓜蒌诱导不定芽为最佳生长。在此培养基上培养20多天，不定芽长到2-3cm左右即可剪下进行继代培养。

3.2 继代培养

将不定芽从培养瓶中取出，在超净工作台无菌滤纸上剪下发出的芽，转入MS+BA0.2mg/L+IAA0.6mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖培养基中，新鲜培养上培养15d左右，丛生芽长的粗壮，最长的不定芽有1.5cm，新生芽的生长速度明显加快，幼叶有平展，繁殖系数在3左右，此培养基长势最佳（见图5）。

图5 继代增殖培养

3.3 生根培养

无论是从诱导芽获得的不定芽，还是继代增殖获得的不定芽，都可转入生根培养基中，诱导生根的培养基为以下几种：

①MS+IBA0.3mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

②MS+IBA0.4mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

③MS+IBA0.5mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

④MS+ABT0.3mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

⑤MS+ABT0.5mg/L+6g/L琼脂+30g/L蔗糖

将不定芽转入以上生根培养基上，在培养室培养1周后，就可看见芽的基部有根露出来，再过一段时间后，这些根原基就发育为0.5cn以上的幼根，生长14天后进行生根数和株高调查测量，见表2。

表2 瓜蒌的生根诱导调查

图6 瓜蒌生根苗用ABT和IBA的长势情况

图7 瓜蒌生根苗

从表中和图中可以看出，添加ABT的培养基生根条数为2.87，为最高，从株高上看，株高为5.2cm，也是最高的。此试验充分表明使用ABT0.3mg/L诱导生根效果好，移栽容易成活。

我们通过本次试验充分证实了瓜蒌的组培快速繁育技术，为实现瓜蒌优质种苗组培快繁工厂化生产打下良好的基础。