一种环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片的研制及消毒效果评价

师梦超,周冰，杨绒娟，周德刚，李朋朋

（洛阳惠中兽药有限公司，国家兽用药品工程技术研究中心 河南洛阳 471003）

近年国内外遭受非洲猪瘟和新冠病毒等带来的疫情灾难，不论对畜牧养殖业还是人类健康事业都造成了严重影响，除疫苗外，消毒已成为养殖业和人类健康事业中预防和控制疾病流行的一种重要措施，人们也充分认识到消毒环节在安全防护方面的必要性和重要性。过硫酸氢钾复合盐类消毒剂是一种过氧化物类高效消毒剂，具有杀灭速度快，效率高且分解无残留等优点[1]，一般由过硫酸氢钾复合盐、氯化物、有机酸、无机酸、表面活性剂和软水剂组成，其中过硫酸氢钾复合盐是主要活性成分[2]。市面上过硫酸氢钾复合盐泡腾片多含磷，在消毒应用过程中容易导致环境富营养化，因此本研究采用无磷辅料制备过硫酸氢钾复合盐泡腾片，并对其水溶液的消毒效果进行评价。

1 试验材料

1.1 试剂

营养琼脂，购自青岛高科园海博生物技术有限公司；无水硫代硫酸钠，分析纯，购自天津科密欧化学试剂有限公司；无水磷酸氢二钠、磷酸二氢、碳酸氢钠、十二烷基苯磺酸钠、钠氯化钠、氨基磺酸、无水柠檬酸、EDTA-2Na，分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司；过硫酸氢钾复合盐，购自翱图（开封）环保科技有限公司；聚维酮K30，药用级，购自博爱新开源医疗科技集团股份有限公司；苋菜红85，食品级，购自柔亚食品添加剂贸易有限公司；柠檬香精，食品级，广州荷花香精香料有限公司。

1.2 主要仪器设备

电子天平（型号PL2002），购自梅特勒托利多公司；方锥混合机（型号HSD-5L），购自常州佳发制粒干燥设备有限公司；旋转压片机（型号ZP-5b），购自广州晨雕机械设备有限公司；电子天平（型号JA 2003），购自上海上平仪器有限公司；生物安全柜（型号NU-425-400S），购自美国Nua ire；电热恒温培养箱，购自上海新苗医疗器械制造有限公司；全自动立式电热压力整齐灭菌器，购自上海博迅实业有限公司医疗设备厂；微量移液器，购自德国Epend o rf公司；涡旋混合器，购自德国IKA公司。

1.3 菌株

大肠杆菌8099、金黄色葡萄球菌ATCC 6538，购自中国兽医药品监察所。

2 试验方法

2.1 无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片的制作方法

称取550g过硫酸氢钾复合盐、15g氯化钠、50g氨基磺酸、150g无水柠檬酸和35g乙二胺四乙酸二钠在方锥混合机中预混，混合均匀后，再加入120g碳酸氢钠、50g PVPK30、20g十二烷基苯磺酸钠（LAS-80）、6g PEG 4000、3g柠檬香精和1g苋菜红总混混合30min，得到混合均匀的粉末中间体。将以上所得粉末中间体转移至旋转压片机，按照1.0g/片的片重规格进行压片，筛粉，铝箔袋包装，即得本次试制的无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片。

2.2 稳定性试验

本试验试制样品的稳定性试验根据2002年版《消毒技术规范》进行。将包装后的过硫酸氢钾复合盐泡腾片置于54℃恒温干燥箱中14d，并于放置前后取样，对试制样品的外观性状和有效氯含量进行观察和测定，采取随机取样的方式抽取3组，检测3次并取平均值，计算并分析有效氯的含量变化。

2.2 消毒试验方法

将供试消毒剂分别进行200倍、400倍、800倍和1,600倍稀释，以大肠杆菌8099和金黄色葡萄球菌ATCC 6538为指示菌，采用消毒剂定量试验评价方法评价无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片水溶液的杀菌效果[3]。

2.2.1 菌悬液的制备取出菌种进行复苏，在营养琼脂培养基上划线；接种后的培养基放在恒温培养箱中，37℃培养20h。从复苏的金黄色葡萄球菌ATCC 6538（第2代）及大肠杆菌8099（第3代）平皿上挑取单个典型菌落至PBS中，取部分菌悬液用核酸蛋白测定仪测定OD600值，将剩余菌悬液的OD600值调至0.135～0.145，按此比例调整剩余菌悬液，混合均匀后进行2倍稀释，各菌液浓度约为107c fu/mL，备用。

2.2.2 中和剂的选择[4]选择实验室已有0.5%的硫代硫酸钠溶液作本试验中和剂。

2.2.3 过硫酸氢钾复合盐泡腾片对微生物的定量杀灭试验用无菌纯化水将释过硫酸氢钾复合盐泡腾片作200倍、400倍、800倍和1,600倍稀释，作供试消毒剂。吸取0.5mL各菌液至4.5mL不同稀释浓度的消毒剂中混合均匀后作用5min，计时结束后取菌药作用液0.5mL至含4.5mL中和剂中的EP管混合均匀后作用10min，计时结束后进行菌落计数，同时设置阳性对照组和阴性对照组。当杀菌率达到99.9%以上时，可判定该稀释倍数为消毒剂的有效杀菌浓度。按照下述公式计算杀菌率（Pt）。该试验重复进行3次，以3次试验杀菌率的平均值表示最终杀菌率。

杀菌率（Pt）=（N0-Nt）/N0×100%，其中N0=对照组的活菌数，Nt=实验组的活菌数。

3 结果

3.1 样品制备结果

采用上述制备方法，本试验制得了一种表面光洁，具有柠檬香气味的浅粉红色泡腾片。

3.2 稳定性试验结果

过硫酸氢钾复合盐泡腾片在54℃恒温条件下放置14d后，片子表面光洁平整、无碎片、无吸潮等现象发生，脆碎度和崩解时间均符合2020年版《中国药典》片剂项下相关规定。3组样品的有效氯含量检测结果显示，有效氯含量的下降率分别为1.5%、2.0%和1.6%，含量均未发生显著变化，证明了铝箔袋包装下的无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片是稳定的。

3.3 菌悬液制备条件摸索结果

中和剂工作菌液：大肠杆菌8099调至OD600为0.14，再进行2倍稀释时菌液浓度为107CFU/mL。

3.4 细菌定量试验结果

过硫酸氢钾复合盐泡腾片对大肠杆菌8099及金黄色葡萄球菌ATCC 6538的定量试验结果见表1。由表1可知，过硫酸氢钾复合盐泡腾片对大肠杆菌8099的有效杀菌浓度为800倍稀释，对金黄色葡萄球菌ATCC 6538的有效杀菌浓度为800倍稀释。

表1 过硫酸氢钾复合盐泡腾片对不同菌株的定量灭杀试验结果

4 讨论

目前市售过硫酸氢钾复合盐类消毒剂有两种，粉剂和片剂，二者为同一类消毒剂，处方组成相似，均含磷酸钠盐。研究表明，水溶性正磷酸盐能够被植物和微生物等直接利用，是引起富营养化的主要原因之一[5]。本研究试制了一种无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片，通过测定加速条件下有效氯含量来验证过无磷环保型硫酸氢钾复合盐泡腾片的稳定性。过硫酸氢钾复合盐泡腾片的杀菌原理主要是过硫酸氢钾复合盐的氧化能力，即过硫酸氢钾可以氧化氯离子，产生次氯酸，氢离子和活性氧，氧化能力以有效氯含量表示。因此，在本研究中通过测定有效氯含量的稳定性来证明过硫酸氢钾复合盐泡腾片的稳定性。

本次研制的无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片对常见的大肠杆菌8099和金黄色葡萄球菌ATCC 6538具有非常好的杀灭效果，在800倍稀释浓度下5min可完全灭杀，证明这种无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片具有很好的杀菌效果。

综上所述，本研究研制的无磷环保型过硫酸氢钾复合盐泡腾片具有环保、稳定、高效、广谱的特点，可以广泛应用于各种环境场所的环境消毒。█