血清人附睾蛋白4、糖类抗原724、糖类抗原125和罗马指数在卵巢癌风险评估中的应用分析

吴秋花 蔡云祥

据估计，2018年全球有29万卵巢癌新病例和18.4万卵巢癌相关死亡病例［1］，晚期患者的5年生存率只有20%～40%，卵巢癌的有效筛查与尽早发现可影响疾病预后，高灵敏度及高特异性的诊断工具必不可少［2］。血清CA125检测是卵巢癌筛查中最常用的方法［3］，但CA125水平受各种生理因素及子宫内膜异位症等良性肿瘤的影响［4］。研究发现，HE4在卵巢癌组织中过度表达［5］，CA724水平在各种卵巢黏液性癌中异常升高［6］。近年来，一项国外多中心研究采用CAl25和HE4的检测值建立卵巢癌风险预测模型（ROMA），可用于预测绝经前后的卵巢癌风险。CA724鉴别诊断卵巢癌的敏感性虽低于CA125，但不受月经周期或妊娠的影响［7］。本研究旨在评估CA125、HE4和CA724的临床有用性，以及罗马（ROMA）指数对卵巢癌的鉴别诊断价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集2017年1月至2018年9月于本院住院并拟行手术治疗的盆腔肿物患者血清样本64例，根据术后石蜡切片病理结果分为卵巢癌组（31例）和卵巢良性肿瘤组（33例）。其中，卵巢良性肿瘤组包括子宫肌瘤8例、卵巢囊肿6例、成熟型囊性畸胎瘤4例、未明确分类良性肿瘤15例，患者年龄21～73岁，平均41岁；卵巢癌组患者年龄24～71岁，平均52岁。另收集同期于本院健康体检女性的血清样本40例作为对照，健康女性的年龄为18～80岁，平均48岁，体检时不在月经期，无心、肝、肺、胃等重要脏器的疾患，肝、肾功能正常，无肿瘤家族史及痛经史。绝经标准：年龄≥60岁或年龄<60岁，自然闭经≥12个月且FSH、雌激素水平处于绝经期范围内。

1.2 研究方法 （1）标本采集：采集所有研究对象空腹静脉血5 mL，血液样本置于血清分离管中，送至实验室后30 min离心，-70 ℃下储存备用。（2）血清CA125、HE4和CA724水平检测：使用罗氏电化学发光免疫分析仪（Cobas E602分析仪）及其配套试剂，严格按照仪器和试剂的说明书及项目标准操作规程进行检测。CA125的测量范围为0.6～5000 IU/mL，HE4的测量范围为15～1500 pmoL/L，CA724的测量范围为0.2～300 IU/mL。（3）ROMA指数计算：使用罗氏电化学发光免疫分析仪自带软件，根据CA125和HE4的分析结果，计算绝经前和绝经后患者的ROMA值。ROMA值（%）=exp（PI）/［1+exp（PI）］×100%，其中PI计算如下：①绝经前PI=-12.0+2.38×LN（HE4）+0.0626×LN（CA125）；②绝经后PI=-8.09+1.04×LN（HE4）+0.732×LN（CA125）。

1.3 观察指标 （1）根据说明书建议，CA125的正常参考值为<35 U/mL，HE4的正常参考值为（绝经前）<92.1 pmoL/L、（绝经后）<121 pmoL/L，CA724≤6.9 IU/mL。（2）根据软件说明书ROMA指数（绝经前）参考值<11.4%，ROMA指数（绝经后）值<29.9%。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0统计软件。计量资料不符合正态分布，以［M（P25，P75）］表示，多组比较采用Kruskal-Wallis H检验，两组之间比较采用Dunn-Bonferroni检验；计数资料以［n（%）］表示，采用χ2检验和RXC表χ2检验，灵敏度、特异性、阳性预测值以及阴性预测值采用配对χ2检验；以病理诊断为金标准绘制ROC曲线。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组的血清学指标及ROMA指数比较 三组的各项指标比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；组间两两比较，卵巢癌组的各项指标高于其他两组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1和图1。

表1 三组的血清学指标及ROMA指数比较［M（P25，P75）］

图1 各项血清学指标及ROMA指数组间比较

2.2 血清CA125、HE4、CA724与ROMA指数诊断一致性比较 CA125的检验结果与ROMA指数的一致性比较，差异无统计学意义（P>0.05）；CA724和HE4与ROMA指数在检验结果一致性上比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 血清CA125、HE4、CA724与ROMA指数诊断一致性比较

2.3 血清CA125、HE4、CA724及ROMA指数鉴别诊断卵巢癌的应用价值 CA724和HE4的灵敏度最低，均为41.94%；ROMA指数+CA724+CA125和ROMA指数+CA724+CA125+HE4的灵敏度最高，均为87.10%；两者之间差异有统计学意义（χ2=47.621，P<0.05）。ROMA指数+CA724+CA125和ROMA指数+CA724+CA125+HE4的特异性最低，均为82.19%；HE4的特异性最高（100%）；两者之间差异有统计学意义（χ2=36.582，P<0.05）。各指标的阳性预测值和阴性预测值比较，差异均无统计学意义（χ2=12.546/22.337，P>0.05）。见表3。

表3 血清CA125、HE4、CA724及ROMA指数鉴别诊断卵巢癌的应用分析［n（%）］

2.4 四项指标鉴别诊断卵巢癌的ROC曲线评价 四项指标的最佳截断值分别为：ROMA=11.385%，CA125=23.4 IU/mL，CA724=8.65 IU/mL，HE4=58.065 pmoL/L。曲线下面积最大的指标组合是，ROMA指数+CA125（AUC=0.951，95%CI：0.908～0.995），ROMA指数+CA125+HE4（AUC=0.951，95%CI：0.907～0.994），其所对应的灵敏度和特异性分别为97%、83.1%。曲线下面积最小的是，CA724（AUC=0.719，95%CI：0.611～0.826），灵敏度和特异性分别为36.4%、97.2%。见表4和图2。

表4 基于ROC曲线四项指标最佳截断值鉴别诊断卵巢癌的应用分析

图2 各指标单项及联合检测的ROC曲线

3 讨论

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤的一种，在我国的发病率呈逐年上升的趋势，对女性健康构成了重大威胁，已引起妇科及检验领域专家的广泛关注［8］。由于缺乏有效的筛查手段，70%～75%的患者确诊时已处于晚期［9］。血清肿瘤标志物检测是目前临床上卵巢癌早期筛查、辅助诊断、病情监测和判断预后的主要技术手段［10］。受限于某一种肿瘤可能表达多个血清肿瘤标志物，或一个肿瘤标志物可出现于多种肿瘤疾病中，导致单个血清肿瘤标志物用于肿瘤筛查时的灵敏度和特异性降低，因此需要联合多个指标进行检测以提高筛查的灵敏度和特异性。

本研究对血清CA125、CA724、HE4及ROMA指数四项指标单项及联合检测在卵巢癌鉴别诊断的应用价值进行研究，发现四个指标在卵巢癌中的表达水平高于卵巢良性肿瘤组和健康女性对照组，而卵巢良性肿瘤患者和健康女性中此四项指标的表达水平无明显差异（P>0.05），间接说明血清CA125、CA724、HE4及ROMA指数用于卵巢癌的鉴别诊断存在理论价值。比较分析四项指标鉴别诊断卵巢癌的效能，差异均有统计学意义（P<0.05）。其中，血清CA125诊断卵巢癌的灵敏度最高（77.42%），特异性最低（41.94%），而HE4的特异性最高（100%），灵敏度最低（41.94），与CA724的灵敏度相近，说明采用单一血清肿瘤标志CA125或CA724或HE4诊断卵巢癌均存在不足。另外，可能是由于本研究的阳性例数较少，致使各指标的阳性预测值和阴性预测值比较无明显差异（P>0.05）。而采用联合指标评价可有效提高诊断的灵敏度和特异性，其中ROMA指数+CA724+CA125的诊断灵敏度高达87.10%，CA724+HE4的诊断特异性高达97.26%，充分说明临床鉴别诊断卵巢癌过程中联合检测具有必要性和实用性。

实验室血清学指标的正常参考范围通常依据试剂说明书制定，而临床医生以此范围诊断卵巢癌的发生常存在误区，本研究进一步绘制ROC曲线，研究表明四项指标的最佳截断值分别为：ROMA=11.385%（由于绝经后的样本少，所以在此进行区分），CA125=23.4 IU/mL，CA724=8.65 IU/mL，HE4=58.065 pmoL/L；其中CA125的灵敏度最高（90.9%），CA724的特异性最高（97.2%）。由此可见，选择合适的最佳截断值对于卵巢癌的鉴别诊断同样至关重要。另外，还发现曲线下面积最大的是ROMA指数+CA125，ROMA指数+CA125+HE4；曲线下面积最小的是CA724。说明卵巢癌诊断中ROMA指数联合CA125或CA125联合HE4均具有较高的应用价值，考虑到ROMA指数是根据CA125和HE4的结果计算所得，因此建议临床诊断时三者联合使用。CA724的联合检测效能不如另外三项，但可用于鉴别某些患者肿瘤的良恶性和卵巢子宫内膜异位症［11］，可能是由于本文的病例选择存在局限性，未对卵巢癌的组织来源进行区分，导致CA724的诊断效能下降，有待进一步的研究与论证。