四妙丸对高尿酸血症大鼠肾脏尿酸排泄及肾功能的影响

陈杰伟，戴 号，张永琪

（1.上海中医药大学，上海 201203；2.上海中医药大学附属光华医院，上海 200052)

尿酸来源于人体内外源性及内源性嘌呤的代谢。人体存在嘌呤代谢紊乱的情况，可导致尿酸的生成量过多或排泄量减少，进而可导致高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)的发生。目前，我国HUA的发病率约为8.4%～13.3%，仅低于糖尿病的发病率[1]。HUA是慢性肾病发生及进展的独立危险因素。血尿酸的水平每升高60 μmol/L,肾病的发生风险可增加7%～11%[2]。促进肾脏尿酸的排泄是降低机体血尿酸水平的主要方法。苯溴马隆是一种促进肾脏排泄尿酸的药物，但此药具有肝毒性及骨髓抑制等副作用。应用中药组方治疗HUA的疗效较好，且具有较高的安全性。四妙丸出自清代《成方便读》，由苍术、黄柏、牛膝及薏苡仁组成，是临床上用于降低患者血尿酸水平的重要方剂[3]。在本次研究中，笔者主要探讨四妙丸对高尿酸血症大鼠肾脏尿酸排泄及肾功能的影响。

1 材料与方法

1.1 动物

48只SPF级 雄 性SD大 鼠，6周 龄，140～160 g，由上海中医药大学动物实验中心提供，生产许可证号：SYXK(沪)2020-0009。

1.2 药品和仪器

四妙丸浸膏粉（由苍术、黄柏、薏苡仁及牛膝组成）；苯溴马隆片（生产厂家：宜昌东阳光长江药业，批准文号：国药准字H20040348)；氧嗪酸钾粉及次黄嘌呤粉（由美国Sigma公司提供）。生化分析仪（生产厂家：德国西门子）；离心机（生产厂家：上海安亭仪器厂）。

1.3 动物分组、造模及给药

将48只雄性SD大鼠随机平均分为正常组、模型组、苯溴马隆组、四妙丸高剂量组、四妙丸中剂量组和四妙丸低剂量组。除正常组，用氧嗪酸钾(100 mg/kg)对除正常组以外其余各组大鼠进行腹腔注射，同时用次黄嘌呤(500 mg/kg）对其余各组大鼠进行灌胃，1次/d，共造模21 d。在造模的第8 d，用4.7 mg/kg的苯溴马隆对苯溴马隆组大鼠进行灌胃，用2260.6 mg/kg、1130.3 mg/kg及565.2 mg/kg的四妙丸分别对四妙丸高剂量组大鼠、四妙丸中剂量组大鼠及四妙丸低剂量组大鼠进行灌胃，用与其余各组大鼠所用等量的溶媒对正常组大鼠及模型组大鼠进行灌胃，1次/d，共灌胃14 d。

1.4 检测指标

1）给药2 h后，取大鼠的眼眶血，对其血液进行血尿酸(serum uric acid,SUA)、血 肌 酐（Serum creatinine,Scr）及血尿素氮(Blood Urea Nitrogen，BUN)检测。2）用代谢笼收集大鼠24 h的尿液，对其尿液进行尿尿酸（urine uric acid，UUA）及24 hUUA检测。3）计算大鼠尿酸清除率(Cua)。Cua=尿尿酸×每小时尿量/血尿酸。

1.5 统计学方法

对本次研究中的数据均采用Prism 8.2.1统计软件进行处理，计量资料用均数±标准差（±s）表示，数据采用单因素方差分析，组间两两比较采用Tukey检验。以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平

在造模期，与正常组大鼠相比，其余各组大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平均较高，P＜0.05；其余各组大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平相比，P＞0.05。在给药期，与正常组大鼠相比，模型组大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平均较高，P＜0.01；与模型组大鼠相比，苯溴马隆组大鼠SUA的水平较低，Scr的水平较高，P＜0.01；与模型组大鼠相比，四妙丸各剂量组大鼠SUA的水平均较低，四妙丸低剂量组大鼠BUN的水平较低，P＜0.05。详见表1。

表1 各组大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平（± s）

表1 各组大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平（± s）

注：*表示与正常组相比，P＜0.05；**表示与正常组相比，P＜0.01；△表示与模型组相比，P＜0.05；△△表示与模型组相比，P＜0.01。

组别 SUA(μmol/L) Scr(μmol/L) BUN(mmol/L)造模期 给药期 造模期 给药期 造模期 给药期正常组（n=8） 131±32.0 84±24.0 25±1.4 27±1.8 7±0.6 6±0.4模型组（n=8） 709±227.7** 545±196.3** 31±3.1* 32±3.3** 13±5.8* 14±5.9**苯溴马隆组（n=8） 794±92.8** 261±112.2△△ 35±4.5** 38±2.3△△ 14±3.5** 12±2.0四妙丸高剂量组（n=8） 893±196.3** 291±109.5△△ 39±5.4** 31±3.5 18±3.6** 11±2.1四妙丸中剂量组（n=8） 830±180.9** 291±123.8△△ 36±2.9** 32±3.0 17±3.5** 11±2.0四妙丸低剂量组（n=8） 888±112.3** 211±133.6△△ 37±5.7** 29±3.4 17±4.1** 9±1.0△

2.2 在给药期各组大鼠肾脏尿酸排泄指标的比较

在给药期，与正常组大鼠相比，模型组大鼠UUA的水平及24 hUUA的水平均较高，其Cua的水平较低，P＜0.05；与模型组大鼠相比，苯溴马隆组大鼠24 hUUA的水平及Cua的水平均较高，四妙丸高剂量组大鼠UUA的水平较高，四妙丸中剂量组大鼠UUA的水平及24 hUUA的水平均较高，四妙丸低剂量组大鼠UUA的水平、24 hUUA的水平及Cua的水平均较高，P＜0.05。详见表2。

表2 在给药期各组大鼠肾脏尿酸排泄指标的比较（± s）

表2 在给药期各组大鼠肾脏尿酸排泄指标的比较（± s）

注：*表示与正常组相比，P＜0.05；**表示与正常组相比，P＜0.01；△表示与模型组相比，P＜0.05；△△表示与模型组相比，P＜0.01。

组别 UUA(μmol/L) 24 hUUA(μg) Cua(mL/h)正常组（n=8） 42.8±35.2 185.6±94.7 0.6±0.21模型组（n=8） 109.6±26.6* 509.4±164.3** 0.3±0.12*苯溴马隆组（n=8） 349.9±176 1684±737.7△ 1.7±0.51△△四妙丸高剂量组（n=8）165.6±29.8△ 809.1±217.6 0.9±0.45四妙丸中剂量组（n=8）185.8±45.4△ 1130±435.3△ 1.3±0.80四妙丸低剂量组（n=8）207.8±41.0△△ 1282±490.2△ 2.0±0.92△

3 讨论

人体内超过70%的尿酸经肾脏代谢，最后仅有6%～10%的尿酸随尿液排泄。若出现肾小球滤过减少、肾小管重吸收或分泌异常，可减少肾脏排泄尿酸的量，进而可使人体内血尿酸的水平升高。同样，人体内血尿酸的水平较高，可导致细胞内皮功能异常、炎症反应、肾小球硬化、肾间质性病变、肾损伤等疾病的发生[4]。本次研究的结果显示，在给药期，与模型组大鼠相比，四妙丸各剂量组大鼠及苯溴马隆组大鼠SUA的水平均较低，四妙丸低剂量组大鼠BUN的水平较低，苯溴马隆组大鼠Scr的水平较高，P＜0.05。这一研究结果提示，为大鼠使用低剂量四妙丸进行灌胃，可降低其血尿酸的水平，进而可改善其肾功能。此药改善肾功能的机制可能与其肾脏有机阳离子/肉碱转运体的表达有关[5]。苯溴马隆虽然具有降低血尿酸水平的作用，但可造成大鼠肾功能损伤。这可能是因为苯溴马隆可使肾脏超负荷排泄尿酸，导致肾小管中尿酸的浓度过高，使尿酸结晶堵塞肾小管。本次研究的结果显示，在给药期，与模型组大鼠相比，四妙丸低剂量组大鼠UUA的水平、24 hUUA的水平及Cua的水平均较高，P＜0.05。这一研究结果提示，四妙丸可促进肾脏尿酸的排泄。与用中剂量及高剂量的四妙丸相比，用低剂量的四妙丸对大鼠进行灌胃后其血尿酸的水平更低。该结果的产生可能与四妙丸的主要成份（小檗碱、药根碱、牛膝皂苷等）有关[6-7]。本次研究为高尿酸血症合并肾功能不全患者提供了新的治疗思路。

综上所述，四妙丸可降低高尿酸血症大鼠血尿酸的水平，促进其肾脏尿酸的排泄,改善其肾功能。