福建福鼎地区蜜蜂细菌性病原菌调查与分析

王为城

摘要：为了解福鼎地区蜜蜂细菌性病原菌流行情况。对2019—2021年采集病死的蜜蜂样品423份，采用常规的细菌分离鉴定和PCR方法进行细菌性并进行分离鉴定。结果显示，结果显示分离得到幼虫芽孢杆菌、蜂房蜜蜂球菌、屎肠球菌、蜜蜂螺旋体病、蜜蜂败血杆菌、蜂房哈夫尼菌6种细菌性疾病，分别占采集样品的分别占采集样品的13.5%、13.9%、3.9%、4.5%、14.2%、19.1%，其中以蜜蜂败血杆菌、蜂房哈夫尼菌、幼虫芽孢杆菌蜂房蜜蜂球菌4种病原菌为流行的主要病原菌。6种细菌性疾病呈现混合感染，以二重病原菌感染、三重病原菌感染及四重病原菌感染所占比例较高，分别占采集样品的14.2%、12.3%、13.5%。说明该地区蜜蜂细菌性病较严重，呈现多重感染。

关键词：蜜蜂;细菌性疾病;分离鉴定;调查;分析

中图分类号：S895文献标识码：Bdoi：10.3969/j.issn.2096-3637.2021.23.003

Investigation and Analysis of Bacterial Pathogens of Honey Bees in Fuding，Fujian Province

WANG Weicheng

（Agricultural Comprehensive Law Enforcement Brigade，Fuding City，Fujian Ningde 355200，China）

Abstract：To understand the prevalence of bacterial pathogens in Apis Mellifera in Fuding. 423 Bee samples from 2019——2021 were isolated and identified by routine bacterial isolation and PCR. The results showed that six bacterial diseases were isolated，including Bacillus cereus，bee colony bee coccus，Bee Enterococcus Faecium，Bee spirochete disease，Bee Septicemia Bacillus，and Hafniellacellulosae，13.5%，13.9%，3.9%，4.5%，14.2% and 19.1% of the samples，respectively，among them，Septicemia Bacilli，Hafniellacellulosae and Bacillus cereus were the main pathogens. There were mixed infection in 6 kinds of bacterial diseases，the proportion of double，triple and quadruple pathogens were 14.2%，12.3% and 13.5%，respectively.The results showed that the bacterial venereal disease of honey bees in this area was serious and presented multiple infection.

Keywords：bee，bacterial diseases，isolation and identification，investigation，analysis

0引言

经过统计我国每年蜂蜜产量达50 t以上，占世界总产量的65%以上，其出口量达12万t，养蜂业成为组成生态农业的重要组成部分。近年，随着蜜蜂养殖数量的增加，蜜蜂细菌性疾病发生与流行呈现逐年增高的趋势，且成为危害蜜蜂养殖业的严重的疾病之一，严重影响蜜蜂的经济效益，临床中经过统计蜜蜂的细菌性疾病的的发生率在50%以上，该病成为奶牛养殖过程中常见疾病，且给养蜂业带来巨大的经济损失。试验对2019—2021年采集采集病死的蜜蜂样品423份进行细菌性病原菌分离，为该病的综合防控提供参考依据。

1材料与方法

1.1病料来源

2019—2021年采集采集病死的蜜蜂样品423份进行细菌性病原分离鉴定。

1.2主要试剂

7%绵羊血脱纤培养基，普通营养培养基，均购自青岛日水微生物科技有限公司;细菌鉴定试纸条购自法国梅里埃公司;2ch3TaqMarkerMix，购北京酷来搏科技有限公司;DL2000DNAmarker;購自北京迈瑞达科技有限公司。

1.3细菌分离培养

无菌条件下，对采集的病死蜂样品进行处理，处理的样品接种于7%绵羊血脱纤培养基恒温37 ℃培养12～24 h，挑取单个菌落接种普通营养培养基纯化培养，并染色镜检。

1.4细菌生化试验

对普通营养培养基分离菌株，参照细菌的试纸条说明书对分离菌株进行生化试验鉴定。

1.5分离菌株的细菌PCR鉴定

采用水煮法提取分离菌株的基因组DNA，报道细菌的16SrRAN通用引物，引物由华大基因公司合成，以提取分离菌株的基因组DNA为模板进行PCR鉴定和测序，测序结果根据Genbank登录的参考株进行同源性对比。

2结果

2.1细菌分离鉴定结果

对2019—2021年采集病死的蜜蜂样品423份，采用常规的细菌分离鉴定、生化试验和PCR方法进行细菌的分离鉴定，结果显示分离得到美洲幼虫腐臭病（幼虫芽孢杆菌）、欧洲幼虫腐臭病（蜂房蜜蜂球菌）、屎肠球菌、蜜蜂螺旋体病、蜜蜂败血杆病（蜜蜂败血杆菌）、蜜蜂副伤寒（蜂房哈夫尼菌）6种细菌性疾病，分别占采集样品的13.5%、13.9%、3.9%、4.5%、14.2%、19.1%，其中蜜蜂败血杆菌、蜂房哈夫尼菌、幼虫芽孢杆菌蜂房蜜蜂球菌4种病原菌所占比例较高，见表1。

2.2多重病原菌感染分析结果结果

对2019—2021年采集病死的蜜蜂样品423份，分离得到美洲幼虫腐臭病（幼虫芽孢杆菌）、欧洲幼虫腐臭病（蜂房蜜蜂球菌）、屎肠球菌、蜜蜂螺旋体病、蜜蜂败血杆病（蜜蜂败血杆菌）、蜜蜂副伤寒（蜂房哈夫尼菌）等6细菌性疾病。并对6种细菌性病原进行多重感染分析，结果由表可知，二重病原菌感染、三重病原菌感染、四重病原菌感染、五重病原菌感染、六重病原菌感染分别占采集样品的14.2%、12.3%、13.5%、4.5%、3.8%，其中以二重病原菌感染、三重病原菌感染及四重病原菌感染所占比例较高，见表2。

3讨论与结论

蜜蜂的细菌性疾病具有感染率高、死亡率高、危害程度严重、传播迅速及持续时间长等特点。蜜蜂根据发病特点蜜蜂的细菌性疾病主要包括幼虫的细菌病和成峰的细菌病。蜜蜂的细菌性疾病对养蜂业的危害较大，对其流行病调查具有重要的意义。2019—2021年采集病死的蜜蜂样品423份中分离得到幼虫芽孢杆菌、蜂房蜜蜂球菌、屎肠球菌、蜜蜂螺旋体病、蜜蜂败血杆菌、蜂房哈夫尼菌等6种细菌性疾病，其中以蜜蜂败血杆菌、蜂房哈夫尼菌、幼虫芽孢杆菌蜂房蜜蜂球菌4种病原菌为流行的主要病原菌，6种细菌性疾病呈现混合感染，以二重病原菌感染、三重病原菌感染及四重病原菌感染所占比例较高，分别占采集样品的14.2%、12.3%、13.5%。说明该地区蜜蜂细菌性病较严重，呈现多重感染。应该引起重视，注意蜜蜂细菌病的综合防控。

参考文献

[1]张其安，王娟，杨少波.蜜蜂细菌性疾病及其防治的研究进展[J].中国蜂业，2011，62（Z2）：25-30.

[2]常伟.蜜蜂消化道共生细菌及其多态性研究初探[D].福州：福建农林大学，2010.

[3]戎映君.一种新的蜜蜂细菌性幼虫病的病原鉴定与药物防治[D].杭州：浙江大学，2006.

[4]黄文诚.蜜蜂细菌性幼虫病[J].蜜蜂杂志，2004（4）：21-23.