尿液相关细胞因子在系统性红斑狼疮肾脏病情评估中的意义

吴永卓，曹文婷，邓丹琪

（昆明医科大学第二附属医院皮肤科，云南 昆明 650101）

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种以自身抗体异常产生、补体激活和免疫复合物沉积为特征，导致多组织器官损伤的慢性自身免疫性疾病[1-3]；狼疮性肾炎（lupus nephritis,LN）是SLE常见也是重要的临床表现之一，也是影响SLE预后的主要危险因素之一[4-6]。细胞因子在自身免疫反应中具有重要作用，可由T细胞、B细胞及巨噬细胞等分泌产生，通过调节固有免疫和适应性免疫诱导局部炎性反应及全身急性期炎性反应[7]；IL-6、TNF-α属于前炎症因子，它们主要由T淋巴细胞分泌，在炎症、肿瘤的发生中扮演重要角色[8-10]。本研究通过检测红斑狼疮患者尿液尿细胞因子IL-6、TNFα水平，以探讨其与红斑狼疮肾脏病情的相关性。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 依据美国风湿病学会1997年修订的SLE分类标准，选取2018年2月至2019 年2月在昆明医科大学附属第二医院住院的、诊断明确的SLE患者30例，其中女性24例，男性6例，年龄（17～56）岁，平均年龄（42±6.3）岁，重度活动者2例（SLEDAI评分≥15），中度活动者9例（15＞SLEDAI评分≥10），轻度活动者14例（10＞SLEDAI评分≥5），无病情活动者5例（SLEDAI评分＜5）；排出糖尿病肾病等非狼疮肾病患者。同期纳入性别、年龄相匹配的非狼疮及其他自身免疫性疾病患者30例作为对照，其中男11例，女19例，年龄（19～58）岁，平均（39±5.7）岁；两组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。分别收集实验组和对照组尿液，并对两组的尿TNF-α、IL-6水平进行比较。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 采集系统性红斑狼疮患者和对照组受检者晨尿5ml，于4℃条件下1 200r/min离心5min，提取上清液至1.5mlEP管内，并分装后于-80℃超低温冰箱保存。

1.2.2 指标检测 采用联科生物预包被特异性抗人IL-6、TNFα单克隆抗体ELISA试剂盒测定尿液中IL-6、TNFα表达水平。

1.2.3 SLE患者临床和实验室数据资料收集 收集患者的基本资料，包括年龄、性别和病程及实验室指标尿微量蛋白尿肌酐比及SLEDAI评分等。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件进行统计分析，偏态分布计量资料用M(P25,P75)表示。SLE组与对照组间尿IL-6、TNF-α水平差异比较采用Mann-Whitney U检验。尿IL-6、TNF-α值与尿微量蛋白尿肌酐比的关系及尿IL-6、TNF-α值与SLEDAI评分的相关性评估采用Spearman相关分析，并对相关系数进行假设检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 SLE患者与对照组尿IL-6、TNF-α值比较 结果显示：SLE患者尿IL-6、TNF-α水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 尿中细胞因子TNF-α、IL-6测定结果M(P25,P75)

2.2 SLE组尿IL-6、TNF-α值与尿微量蛋白尿肌酐比的相关分析 结果显示：IL-6表达水平与尿微量蛋白尿肌酐比呈正相关，相关系数为0.90，具有统计学意义（P＜0.05）；TNF-α表达水平与尿微量蛋白尿肌酐比也呈正相关，相关系数为0.84，具有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 SLE患者尿TNF-α、IL-6水平与尿微量蛋白尿肌酐比的相关性

2.3 SLE组尿IL-6、TNF-α值与SLEDAI评分的相关分析 结果显示：尿IL-6和尿TNF-α表达水平与SLEDAI评分均无相关性（P＞0.05）。见表3。

表3 SLE患者尿TNF-α、IL-6水平与SLEDAI评分的相关性

3 讨论

SLE临床表现多样，多系统受累[11-12]；狼疮肾炎（lupus nephritis,LN）是SLE最常见且严重的临床表现之一，进行性肾功能损害仍是SLE患者死亡的主要原因，尤其是活动性狼疮，临床预后差[12-15]。肾活检是评估狼疮性肾炎病情严重程度或狼疮确诊的重要检查手段，但是存在出血、损伤周围组织、穿刺失败等风险，导致部分患者不愿接受该检查，或因病情过重不能行肾活检检查，因此，临床急需无创的检测方法来明确LN的诊断及评估病情活动度或判断预后；如果能通过尿液无创性检测一些生物标志物作为LN患者疾病活动性以及预后判断的指标，将会给患者的病情判断和治疗方案选择提供帮助。

白介素-6（IL-6）是由活化的T细胞和成纤维细胞产生的细胞因子，是一种多效细胞因子，在免疫调节、造血、炎症、肿瘤发生、代谢和控制睡眠的过程中起作用；有研究认为IL-6的基因多样性与SLE易感性相关[16]，并有研究显示SLE患者血清IL-6水平高于对照组，并与SLE病情相关[17-18]。肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor-α,TNF-α）是巨噬细胞分泌的小分子蛋白，作为机体对组织损伤或对病原性刺激的免疫应答，其与两种受体（TNFR1、TNFR2）相互作用，可以诱导炎症、细胞增殖、细胞凋亡等多种信号转导途径[19-21]。在SLE患者中，机体异常免疫复合物可刺激巨噬细胞表达分泌TNF-α，其可进一步致T细胞反应性降低并促进抗凋亡分子表达，从而促进炎性反应，并使新的致病性自身抗体产生[22-23]。有研究发现，SLE患者血浆中TNF-α显著高于对照组[24-26]，说明TNF-α在SLE的发病中具有一定作用；并有学者研究发现，TNF-α相关基因TNF-376G/A、tf-1031T/C的多态性与SLE、LN易感性具有相关性[27-28]。国内外多项研究也发现LN患者尿TNF-α、IL-6水平明显高于SLE不伴肾损害患者的水平[29-33]。本研究结果也显示，与对照组比较，SLE患者尿中细胞因子TNF-α、IL-6表达水平均有明显升高；且SLE患者尿TNF-α、IL-6表达水平与尿微量蛋白尿肌酐比呈正相关；上述结果均表明尿TNF-α、IL-6水平可能是评估SLE肾脏病情的潜在指标。本研究中SLE患者尿TNF-α、IL-6表达水平与SLEDAI评分均无相关性，考虑可能因为SLEDAI评分是根据SLE患者整体病情评估，肾脏病情只占评分中的一部分，也不排外是本研究样本量较少的原因。样本量较小是本研究存在一定的局限性，且其中大部分患者并未进行肾组织活检以明确病理分型，因此本研究只发现尿TNF-α、IL-6水平可能有望用于评价SLE肾脏病情，而对于是否可区分LN的病理分型则未进行相应研究，仍需要进一步临床探究。另外，本研究为横断面研究，未进行随访分析，对患者预后的估测未能进行相应的研究。综上所述，尿TNF-α、IL-6水平在本研究的SLE患者中均显著升高，是有望成为评估SLE肾脏病情的良好生物学指标，有望为SLE临床治疗方案的制定提供参考，将早期肾损伤患者的相关指标控制在理想范围内，以改善肾脏功能。尿TNF-α、IL-6的检测具有无创性及可普及性高等的优点，值得我们进一步针对此指标进行大样本且深入的研究。