罗山县2020年高致病性禽流感血清学调查与分析

陈 俊

（罗山县动物疫病预防控制中心，河南 信阳 464200）

高致病性禽流感是由A型流感病毒引起的禽类的一种急性、烈性、高度致死性传染病。对于养禽业来说几乎是毁灭性的，危害巨大。目前，由H5、H7亚型毒株引起的禽流感称为高致病性禽流感，主要特征是突然死亡，头部和面部水肿，流泪，呼吸困难，经常甩头，常发出“咯咯”声，脚鳞出血，鸡冠和肉髯发绀，有的病鸡惊厥、打滚或转圈，发病率和死亡率可达100%。高致病性禽流感已被我国纳入强制免疫计划，并要求采用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗（H5N1Re—11株和Re—12株，H7N9H7—Re3株）春秋两季集中强制免疫。为了解罗山县高致病性禽流感免疫效果，开展疫苗免疫效果评估工作，及时掌握罗山县高致病性禽流感防控动态，2020年10月，罗山县动物疫病预防控制中心组织开展免疫抗体检测，以便为罗山县高致病性禽流感监测预警提供参考。

1 抽样检测地点

选取高店、楠杆、周党、子路、莽张、朱堂、彭新、东卜、庙仙、灵山等10个家禽养殖大乡作为检测调查地点。

2 材料与方法

2.1 采样材料

采样箱、5ml采血器、酒精棉球、干棉球、记号笔、采样单、试管架、密封袋等。

2.2 检测材料

离心机、离心管、移液槽、移液器、滴头、1%红细胞、一次性微孔板、高致病性禽流感血凝抑制试验抗原、PBS液等。

2.3 采样方法

结合罗山县春秋两季强制免疫实际情况，对10个乡镇在集中免疫21d后进行了抽样抗体检测，每个乡镇随机抽取3个养殖场、1个散养户和1个活禽交易市场。采取简单随机抽样方式，每个养殖场和交易市场各抽取30份血样，散养户每户抽取10份血样。此次监测共采集样品分布如下：30个家禽养殖场900份，10个散养户100份，10个活禽交易市场300份，在50个场群中共采集样品1300份。所有样品严格按照操作规程采取翅静脉采集血液，每只1.5～2ml，以3000rpm离心5min，析出血清，完善编号与登记，置于-20℃保存备检。

2.4 检测方法及依据标准

严格按照《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T18936-2003）血凝抑制试验（HI）检测H5、H7亚型禽流感免疫抗体。判断标准按照个体HI抗体效价≥24免疫合格个体，群体免疫抗体合格率≥70%为免疫合格群体，H5、H7群体免疫抗体合格率≥70%为免疫合格场群。检测试剂禽流感H5亚型病毒（Re-11株）、（Re-12株）血凝抑制试验抗原，批号均为：2019005，H7N9（H7-Re3株）抗原批号：20200901，以上三种抗原试剂均为哈尔滨维科生物技术有限公司产品。

3 结果与分析

在50个家禽场群中，使用了重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的有38个场群，占场群数量的76%，使用其他禽流感类型疫苗或未免疫的有12个场群。在50个场群的1300份检测样品中，H5亚型病毒（Re-11株）个体抗体合格率为84.1%（1093/1300）；H5亚型病毒（Re-12株）个体抗体免疫合格率为83.8%（1090/1300）；H7N9（H7-Re3株）个体抗体免疫合格率为82.5%（1072/1300）。在采用（H5+H7）三价灭活疫苗免疫的38个场群中（包括30个家禽养殖场、7个活禽交易市场、1个散养户共1120份血样），H5亚型病毒（Re-11株）个体抗体合格率为90.3%（1011/1120）；H5亚型病毒（Re-12株）个体抗体免疫合格率为89.6%（1004/1120）；H7N9（H7-Re3株）个体抗体免疫合格率为89.5%（1002/1120）。通过检测结果显示，对于使用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的养殖场群体合格率和个体合格率均高于使用其他疫苗和未免疫的场群，且差异较大（具体比率详见表1至表3）。

表1 免疫场群比例

表2 50个场群样品抗体合格率

表3 38个免疫场群样品抗体合格率

在50个场群的1300份样品中，鸡样品为1117份，鸭样品为155份，鹅样品为28份。其中鸡、鸭、鹅H5亚型病毒（Re-11株）个体抗体合格率分别为85.6%（956/1117）、78.7%（122/155）、53.6%（15/28）；H5亚型病毒（Re-12株）个体抗体免疫合格率分别为84.9%（948/1117）、83.2%（129/155）、46.4%（13/28）；H7N9（H7-Re3株）个体抗体免疫合格率为83.2%（929/1117）、84.5%（131/155）、42.9%（12/28）。结果显示，鸡、鸭、鹅个体抗体合格率依次降低，鸡、鸭抗体合格率明显高于鹅。（个体免疫合格率见下表4）

表4 鸡、鸭、鹅个体免疫合格率

4 小结与讨论

此次共抽查罗山县10个乡镇50个家禽养殖场，通过血清学检测结果表明，家禽养殖场使用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗完全可以达到免疫保护水平，而且效果显著。罗山县大多数乡镇普遍免疫较好，H5、H7亚型场群合格率和个体合格率均高于70%，仅个别场、户未检测到H7亚型禽流感免疫抗体。

从此次检测数据和调查情况来看，罗山县秋防场群免疫密度未达到100%。究其原因是个别家禽养殖户对该病重视程度不够，防控力度不强，有一些养殖场、户没有替换使用（H5+H7）三价灭活疫苗，甚至个别散养户根本就未免疫。建议畜牧部门加大宣传力度，普及家禽养殖场、户严格按照免疫程序，使用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗进行春秋两季集中强制免疫，同时做好抽样检测工作，对免疫不合格的场群及时进行补免，确保罗山县家禽养殖业健康稳定发展。