顶空气相色谱法测定鱼肝油酸钠注射液中有机溶剂残留量

吕广义

＜荣昌生物制药（烟台）股份有限公司 山东烟台 264000>

一、引言

目前，顶空气相色谱法已经在很多研究领域得到了应用。其主要应用原理是，在特定条件下的各相态组分之间维持着动态的分配平衡，因此只需对组分的组成进行分析即可对目标成分的含量进行测定[1-2]。这项技术不同于传统的萃取技术，有效规避了传统萃取技术的缺陷[3]。由此，本次实验将这种方法用于鱼肝油酸钠注射液的有机溶剂残留检测中，以建立一个良好的注射液残留溶剂检测方法。

二、实验药品和仪器

本次实验所使用的药品为：无水乙醇、N，N－二甲基甲酰胺（下简称DMF）、乙醚、鱼肝油酸钠注射液。本次实验所使用的仪器如表1所示。

表1 本次实验所使用的仪器

三、实验方法

（一）色谱条件

本次实验的色谱条件如表2所示。

表2 色谱条件设置

在设置好全部参数后，开始进样，色谱柱内样品先在40℃下恒温8min，再以7℃每分钟的升温速率，升至70℃并保持4min，最后再以50℃每分钟的升温速率升至230℃，并恒温5min。

（二）溶液配制

溶液共配制两组，实验组溶液使用一定量的鱼肝油酸钠注射液和DMF均匀混合制成，并精密量取一定量溶液置于顶空进样瓶中待用；对照组选用乙醇和乙醚液体，同样采用DMF溶液均匀混合，精密量取后，置于顶空进样瓶中待用。

（三）线性关系考察

取对照组所制得的溶液，分别制备乙醇和乙醚比例不同的数组溶液，量取后再进行分析，对于分析所得到的数据，以峰面积（A）为纵坐标，以浓度（C，单位为μg/mL）为横坐标，对数据进行线性拟合。经计算，拟合结果如下：

乙醇：A=0.2901C-0.7576，r=0.9998

乙醚：A=6.0392C-15.2775，r=0.9997

（四）加样回收率实验

精密量取一定量的实验组溶液，并再次使用DMF溶液定容和摇匀，用于后续的回收率检测，并采用同样方式对对照组的回收率进行检测，检测完成后，进行回收率的计算。计算结果为：乙醇平均回收率为100.0%，RSD值为0.7。乙醚的平均回收率为100.0%，RSD值为0.8。

（五）检测限的测定

取对照组的溶液适当进行稀释后进行进样测定，当信噪比为3时即可得到测定结果，经检测，乙醇的检测限为71ng/mL，乙醚的检测限为3ng/mL。

（六）重复性实验

分别精密量取实验组样品各3份放置于容量瓶中，使用DMF溶液定容并摇匀，作为测试液。后取测试组和对照组液体共9组，密封，分别测定，使用外标法测定有机溶剂的残留量。经分析，所有样品中均未检出乙醇，但全部样品均检测出乙醚，平均含量为0.021%，RSD值为1.3%，这表明本次实验选用的方法具有较好的重复性。

（七）样品的最终测定

采用本实验所建立的方法，对各组样品溶液进行测试，其测定结果如表3。

表3 全部样品测定结果

四、结束语

在本次实验中，由于乙醇和乙醚的极性相差较大（乙醇极性大，乙醇极性小），因此，本次实验选用中等极性的色谱柱，型号为DB-624，同时在测定有机溶剂时参考了《中华人民共和国药典》（2015年版）中的测定方法，选用了较为合理的升温程序设置，有效分离了乙醇和乙醚。由于本实验需要测定的鱼肝油酸钠浓度较高，且分子链较长，容易粘连在色谱柱上，因此并不适用常规的直接进样法。对于这种情况，本实验采用顶空进样法，在这种方法下，进入色谱柱的物质仅仅是样品中残留的有机溶剂气化后的组分，主成分则不会进入到色谱柱中，有效确保了检测结果的准确度。

除此之外，考虑到乙醚在鱼肝油酸钠注射液（水溶液）中溶解度较低的情况，因此本次实验采用DMF溶液为溶剂，确保乙醇和乙醚均能在样品溶液中有效溶解，由此，保证了对照品溶液的浓度准确。不仅如此，所选用的DMF溶液对于待测的乙醇和乙醚成分无明显干扰，使得本次所建立的实验方法具有较高的准确性和重复性，可用于后续的类似实验。