2019年新疆兵团兽医系统实验室检测能力比对试验的浅析

张 旭，殷 涛，李 岩，张 力

(新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站，乌鲁木齐830052)

为进一步提高新疆兵团各师兽医实验室检测能力，强化动物疫病监测预警，更好地为动物疫病防控工作提供技术支持，促进实验室生物安全措施落实落地，特组织了2019年兵团师级兽医实验室检测能力比对工作。

1 材料与方法

1.1 检测样品及试剂

比对试验检测样品由新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站准备，所有比对检测样品均已分别进行猪瘟抗体、高致病性禽流感病毒、非洲猪瘟病毒的标定。

采用双随机分组的原则，每组比对检测样品共计6份，其中随机分配阴性与阳性样品个数，同时进行样品的随机编号，检测样品体积均能够完成3次重复试验所需。(见表1)。

表1 比对样品清单

猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒(批号：CSFV20181120E)、高致病性禽流感H5H7亚型双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒(批号：20190710P)、非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒(批号：ASF20190323P)购于哈尔滨元亨生物药业有限公司。

1.2 比对范围

兵团12个师畜牧兽医站兽医实验室。

1.3 比对项目与试验方法

猪瘟病毒抗体检测，采用阻断ELISA方法，按《猪瘟诊断技术》(GB/T16551-2008)[1]进行；高致病性禽流感病毒型鉴别检测，采用荧光RT-PCR方法，按《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.2-2004)[2]、《H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.3-2004)[3]进行；非洲猪瘟病毒检测，采用荧光PCR方法，按试剂说明书进行。

1.4 结果评价标准

各师兽医实验室根据检测方法判定标准，对比对检测样品进行定性，判定阴阳性。如果整组检测样品出现一个错误结果，则视为该比对项目不通过。

2 比对结果

2.1 猪瘟病毒抗体比对检测结果

参加本比对项目的有12个师级兽医实验室，每个实验室检测6份样品，共计72份，其中71份样品结果正确，1份样品存在较大偏差，符合率为98.61%，合格率为91.67%(见表2)。

2.2 高致病性禽流感病毒型比对鉴别结果

参加本比对项目的有9个师级兽医实验室，每个实验室检测6份样品，共计54份，检测结果全部正确，符合率为100%，合格率为100%(见表2)。

2.3 非洲猪瘟病毒比对检测结果

参加本比对项目的有9个师级兽医实验室，每个实验室检测6份样品，共计54份，其中53份样品结果正确，1份样品存在较大偏差，符合率为98.15%，合格率为88.89%(见表2)。

表2 兵团师级兽医实验室比对结果情况表

3 讨论与分析

比对试验是实验室质量控制和质量保证的重要措施，对各师实验室能力建设进行验证，确认实验室的管理能力，确保实验室能够维持较高的检测水平，有效的实施兽医实验室的监督和管理手段，通过外部质量控制手段来测试一个实验室准确度的途径和对实验室工作能力进行评估验证的客观方法，而能力验证是评价一个实验室检测和分析能力的有效手段，各师实验室在比对实验活动中的表现是兽医系统实验室和客户评价实验室能力的重要依据。

比对试验成绩作为各师兽医实验室现场考核检测操作的评分依据，比对结果显示，12个实验室中有10实验室的比对项目全部符合，2个实验室有1个比对项目存在较大偏差。比对试验共检测样品180份，总体符合率为98.89%。结果表明，绝大多数实验室检测能力总体较好，实验室检测质量体系稳定可靠，维持了较高检测水准。但同时也发现个别实验室存在检测样品分包编号不规范的问题，在实验室质量控制和管理方面有待改进。

根据国家“非洲猪瘟实验室检测”等有关文件[4]，测评非洲猪瘟达标的实验室，也将作为非洲猪瘟授权实验室授权依据。

4 建 议

为提高实验室检测水平，更好的应对突发疫情诊断，做好动物疫病防控流行病学调查及检测，配备相应的设备，培训熟练操作的专业技术人员，积极提高检测能力[5]，加强兵团兽医系统实验室荧光PCR检测能力建设，适应目前先进的检测技术，为动物疫病防控提供坚实的技术保障。此次比对试验中具备荧光PCR检测条件的9个师实验室，有8个师实验室在非洲猪瘟病毒检测方面，具备开展检测非洲猪瘟的能力，结果准确、操作熟练。不具备荧光PCR检测条件的实验室应加快实验室能力建设，购置相应的设备[6]，培训熟练的技术人员，提高生物安全防范意识，做好兽医实验室动物疫病的检测诊断工作。

实验室质量管理体系的构建、运作、维持是实验室确保检测数据的准确性以及检测报告质量的根本要求。在实验室质量行程过程和过程的各个阶段可能影响检测报告质量的各个因素进行有效的管控，并对这些因素采取相应的管理和控制，才能确保检测报告的质量，是整个过程处于受控状态。结合本次能力比对情况，认真对照实验室质量体系文件，梳理分析目前实验室管理方面存在的问题和不足，对没有严格按照质量体系文件操作的过程，及时制定整改措施并开展纠正活动，强化实验室的日常监管[7]，不断提高实验室管理水平[8]。

针对相关检测原始记录填写不规范等问题，如：填写错误的地方只能杠改纠正，不能涂改纠正等，应按照实验室质量体系文件要求制定预防纠正措施，通过监督实施，逐渐减少相关问题的发生。

移液器、生物安全柜等重点仪器设备应定期经过专业机构检验、维护，提高实验的准确性、科学性和安全性[9，10]。本次比对试验中出现2个实验室有1个比对项目存在较大偏差，其中移液器的准确性对检测结果的准确度有很大的影响，建议开展实验仪器的校准工作。

严格执行实验室体系文件，强化管理，确保监测工作科学规范，避免实验室事故发生。以实验室系统管理为抓手[11]，加强学习及转化，不断提升动物疫病监测能力，拓展监测范围，充分发挥预测预报作用。利用实验室优势，开展监测技术培训、课题研究推广，提高师市监测水平，为畜牧业发展提供服务。如本次比对试验中个别检测报告缺少流转记录，体现出个别实验室未严格按照体系文件进行操作管理，实验室质量行程过程出现了不受控的现象，是实验室检测报告质量的潜在影响因素，应加强管理，确保实验室质量管理各个环节均在受控状态。