HPV分型检查配合TCT检测在宫颈病变早期筛查效果

李 帆 郝崔培

陕西省人民医院(西安，710000)

宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一[1]。既往研究表明[2]，宫颈癌的病变是漫长而复杂的生理过程，几乎所有宫颈癌患者均感染人乳头瘤病毒(HPV)，因此普遍认为宫颈癌与HPV感染，尤其是高危型HPV感染密切相关。目前对宫颈病变早期筛查普遍采取细胞学检测或HPV筛查、阴道镜检查及宫颈组织活检三阶段诊断流程[3]。其中应用较多是HPV分型检测、液基薄层细胞学检测(TCT)等。大量研究表明[4-5]，单一HPV或TCT用于宫颈病变筛查无法同时保证特异性和灵敏性。有国外学者报道[6]，HPV联合TCT检测可作为女性早期宫颈病变筛查的最佳方案，美国阴道镜与宫颈病理学会亦推荐HPV联合TCT作为30～65岁女性宫颈病变早期筛查首选方案[7]。本研究分析HPV分型检查联合TCT检测用于宫颈病变早期筛查价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集本院妇科门诊于2018年1月-2020年1月诊治的可疑宫颈病变患者418例临床资料，其中接受HPV分型检查200例为对照组，接受HPV分型检查联合TCT检测218例为观察组。入选标准：①年龄>20岁且已婚或有性生活史；②患者知情本研究并自愿接受宫颈病变早期筛查。排除标准：①接受过宫颈手术、全子宫切除术者；②已妊娠或处于经期者；③宫颈接触性出血，且出血量较大者；④宫颈急性炎症者；⑤已确诊宫颈上皮内瘤变II级或以上者。本研究经本院伦理委员会审批。

1.2 方法

1.2.1标本采集检查前48h禁性生活、阴道用药及阴道冲洗。采样前用棉签擦拭宫颈分泌物，用专用HPV检测采样棉签伸入患者宫颈口内逆时针扇形旋转5～6圈，停留约10s，取出采样棉放入试管中，-20℃保存。采样专用TCT采集刷在患者宫颈管内逆时针旋转5～6圈，取出细胞采集刷放入专用小瓶中送检。两种样本采集后均24～48h内完成检测。

1.2.2HPV分型检查采用Cobas4800 HPV检测系统(美国Newjersey公司)对高危型HPV进行检测。将待测样本行细胞及HPV DNA提取，采用HPV及球蛋白特异性引物设计DNA扩增PCR序列；利用HPV及球蛋白特异性引物对HPV及球蛋白所标记寡聚核苷酸探针监测，从而确定样本中HPV种类及阳性情况。

1.2.3TCT检测采集样本经处理后利用ThinPrep 2000全自动细胞检测制备仪制成薄层细胞涂片，使用95%乙醇固定涂片，常规巴氏染色法染色，利用光学显微镜进行检测。依据TBS分类系统对镜检分类[8]：①无上皮内病变或恶性癌变(NILM)；②不典型鳞状细胞(ASC)：包括性质未定的ASC(ASCUS)及不排除高度病变的ASC(ASC-H)；③低度鳞状上皮内病变(LSIL)；④高度鳞状上皮内病变(HSIL)；⑤鳞状细胞癌(SCC)。患者检测结果分级ASCUS及以上为阳性，ASCUS以下为阴性。

1.2.4阴道镜组织病理检查所有患者均行常规阴道镜检查及宫颈组织病理活检。采用相关病理学检测分类标准[9]：正常或宫颈炎症改变、宫颈上皮内瘤病变I级(CIN I)、II级(CIN II)、III级(CIN III)及宫颈癌。CIN I级或以上组织病理学病变则为阳性，CIN II级、CIN III级、宫颈癌为宫颈高度病变；正常或炎性改变为阴性。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0数据处理。计数资料以(%)表示，组间比较采用χ2检验；绘制受试者工作特征曲线(ROC)评价HPV及HPV联合TCT两种不同检测方法对宫颈病变早期筛查的临床应用价值，并计算ROC曲线下面积(AUC)。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组检测情况比较

对照组年龄(45.3±6.7)岁(22～67)岁，观察组年龄(45.8±6.8)岁(24～9)岁。HPV阳性率对照组(54.0%)与观察组(53.7%)无差异，观察组总筛查阳性率(72.5%)高于对照组(54.0%)(χ2=15.389，P<0.01)。见表1。

表1 两组检测情况比较[例(%)]

2.2 不同检测方法与阴道镜组织病理学结果比较

检测阳性符合率对照组低于观察组(χ2=6.626，P=0.010)，阴性预测值两组无差异(χ2=0.003，P=0.954)。见表2。

表2 两种方法与组织病理学检查结果比较(例)

2.3 两种方法对宫颈变病早期筛查应用价值ROC曲线分析

联合检测灵敏度及特异度均高于HPV单一检测。见表3。

表3 两种方法筛查宫颈病变早期价值ROC分析

3 讨论

HPV是目前已知的宫颈上皮增生、宫颈病变及宫颈癌的重要致病因素。研究表明[10]，与宫颈病变相关的HPV病毒主要为高危型HPV病毒。早发现、早治疗可有效预防和控制宫颈病变至宫颈癌的恶性发展。Kehinde等[11]报道早期HPV及宫颈病变筛查可大幅降低宫颈癌发病率。Emily等[12]提出发达国家建立的女性宫颈癌筛查体系对降低宫颈癌发病率发挥重要作用。目前我国主要采用HPV或TCT进行早期宫颈病变筛查，若检测结果异常再行常规阴道镜检查或宫颈组织病理活检。但是单一HPV或TCT检测仍存在一定假阳性、假阴性可能，影响早期宫颈病变筛查结果。如文献[13-14]报道了HPV、TCT不同检测方法与阴道镜病理检查对比情况，提示单一检测方法难以保证宫颈病变筛查的准确性。Taejong等[15]学者提出联合≥2种检测方法可有效降低宫颈病变假阳性率。鉴于此，本研究分析了HPV及HPV联合TCT两种检测模式的临床应用价值。

本研究宫颈病变阳性检出率对照组低于观察组，初步揭示HPV联合TCT对宫颈病变患者早期筛查价值更高；进一步与组织病理检查数据分析显示，检测阳性符合率对照组低于观察组，与文献[16]报道结果较一致。此外，对照组阴性预测值为95.7%，观察组阴性预测值为96.7%，说明即使两种方法联合检测也无法彻底避免假阴性可能。分析认为，由于单一HPV及联合TCT检测存在无法兼顾特异性、准确性的不足，因此难以通过HPV或联合TCT检测方法彻底规避此问题，这也是阴道镜组织活检作为金标准的原因之一。

本研究结果提示HPV联合TCT检测在宫颈病变早期筛查中具有比单一HPV筛查更好的优势，能显著提高宫颈病变早期筛查的灵敏度和特异度。因此建议临床医生采用HPV联合TCT检测方法作为女性宫颈病变早期筛查的重要手段。但本研究由于为回顾性分析，研究对象的纳入和排除可能存在一定偏差；另外样本相对较少，仍需要加大样本量来验证结论。

综上所述，相比于单一HPV分型检测，HPV联合TCT检测能够提高宫颈病变早期筛查灵敏性和特异性，对提升宫颈病变临床筛查效能具有重要意义。因此建议临床上可采用HPV联合TCT检测方法用于宫颈病变早期筛查，对降低宫颈癌发病率具有重要应用价值。