1例达雷妥尤单抗治疗致交叉配血困难的处理体会

王加勇，陆紫敏，李雪晨，方 琦，郑 浩，徐 华，丁 懿

同济大学附属同济医院输血科，上海 20065

多发性骨髓瘤是一种骨髓内恶性浆细胞异常增生的血液系统肿瘤，患者多因有不同程度的贫血而要输注红细胞[1]。目前，治疗多发性骨髓瘤的相关药物有免疫调节剂、蛋白酶体抑制剂、CD38单抗等，达雷妥尤单抗注射液作为靶向作用于CD38药物，已在我国上市，现报道1例达雷妥尤单抗致交叉配血困难的处理及体会。

1 资料与方法

1.1一般资料 患者，女，71岁，汉族，确诊多发性骨髓瘤2年半，发热伴乏力4 d入院。患者2017年6月29日起行MP方案治疗(美法仑6 mg，第1天至第7天；泼尼松45 mg，第1天至第2天，25 mg，第3天至第7天)，2019年9月5日起行RD方案治疗(地塞米松7.5 mg，第1天至第4天；来那度胺25 mg，第5天至第21天)。本次入院自2020年3月5日起行达雷妥尤单抗治疗(640 mg，每周1次)，查血常规：血红蛋白(Hb)59 g/L，血小板计数9×109/L，胸部CT检查提示双肺散在慢性炎症并少量胸腔积液，两侧肋骨、肩胛骨、锁骨、胸腰椎、胸骨局部显示骨密度不均匀减低，符合骨髓瘤改变。治疗期间患者贫血症状未缓解，临床申请输血治疗，因患者抗体筛查阳性，微柱凝胶法交叉配血主侧凝集，既往该患者又未出现交叉配血困难，需进一步处理。

1.2仪器与试剂 ABO/Rh(D)血型定型检测卡(西班牙基立福公司，批号19012.02)；不规则抗体筛检卡(美国伯乐公司，批号50531.38.18)；凝聚胺试剂(珠海贝索公司，批号119051)；抗A/抗B血型定型试剂，RhD(IgM)血型定型试剂，抗人球蛋白(抗IgG、C3d)检测试剂，抗体鉴定谱细胞，Rh分型试剂(上海血液生物医药有限责任公司，批号分别是20190712、20191809、20195001、20191205、20193201)；ABO血型反定型试剂(人红细胞)，不规则抗体检测试剂(人红细胞，长春博得生物技术有限责任公司，批号分别是20191219、20200103)；戴安娜全自动配血及血型分析仪(西班牙基立福公司)；KA-2200细胞洗涤离心机，2420型离心机(日本久保田公司)；三用电热恒温水箱(常州翔天实验仪器厂)。

1.3方法

1.3.1吸收放散试验 用生理盐水将患者红细胞洗涤3次，取1 mL压积红细胞，加入等量生理盐水，置56 ℃水浴不断摇动5 min，立即离心分离细胞和上清液。取离心后的细胞和等量患者血清混匀，置37 ℃水浴30 min，每隔10 min摇动1次，离心分离获得血清吸收液和吸收红细胞。用患者血清吸收液与抗体鉴定谱细胞分别做直接反应(盐水立即离心)和间接抗球蛋白试验(IAT)，用患者吸收红细胞进行直接抗人球蛋白试验(DAT)。

1.3.2ABO/Rh血型鉴定、不规则抗体筛查 采用微柱凝胶法，抗体鉴定谱细胞检测采用试管法，交叉配血联合采用盐水法、聚凝胺法和微柱凝胶法，Rh分型、DAT采用试管法。实验操作按照《全国临床检验操作规程》执行[2]。

2 结 果

2.1患者血型鉴定与抗体筛查 患者ABO血型是O型，Rh血型是DccEE；抗体筛查结果见表1，患者血清与抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号细胞在抗人球蛋白介质中均凝集；患者红细胞和吸收红细胞分别做DAT，结果均为阴性。

表1 实验结果

2.2抗体鉴定 患者血清与抗体鉴定谱细胞在盐水介质中无凝集，IAT反应均凝集；患者血清吸收液与抗体鉴定谱细胞在盐水介质中无凝集，IAT反应均凝集。见表2。

表2 患者血清及血清吸收液与抗体鉴定谱细胞的实验结果

2.3交叉配血 与2单位O型Rh分型为DEEcc的红细胞做交叉配血试验，结果主侧在盐水及凝聚胺介质中无聚集、无溶血，在抗球蛋白介质中有凝集、无溶血；次侧和自身对照在盐水、凝聚胺及抗球蛋白介质中均无聚集，无溶血。患者输注上述2 U去白红细胞悬液，输血过程无不良反应，输血后患者Hb由59 g/L增加为74 g/L。

3 讨 论

该患者血清与3个抗体筛查细胞反应均凝集，考虑一般有3种情况：(1)有自身抗体存在；(2)有自身抗体和同种抗体存在；(3)有针对3个抗体筛查细胞共同抗原的同种抗体存在[3]。因体内自身抗体会吸附在红细胞膜上，自身抗体DAT大多数表现为强阳性，IAT则为弱阳性或阴性，较DAT弱。吸收放散试验中患者血清中的自身抗体可以被自身红细胞去除，而同种抗体不被自身红细胞吸收留在血清中，可证实有同种抗体的存在。该患者可排除自身抗体的干扰，表1中DAT阴性，说明患者红细胞表面没有吸附自身抗体，表2中IAT为阳性，且患者血清吸收液IAT为阳性，效价没有减低，说明患者血清有游离抗体，且抗体不被自身红细胞吸收[4-5]。考虑该患者可能为同种抗体，用抗体鉴定谱细胞鉴定特异性。

患者血清及血清吸收液与所有抗体鉴定谱细胞IAT起凝集反应，也不与某种表型抗原的谱细胞凝集强度更强，且患者血清及血清吸收液与所有抗体鉴定谱细胞直接反应为阴性，不支持患者存在同种抗体。考虑到红细胞Kidd血型系统抗体的影响，使用抗人球蛋白法，患者血清分别于与Jka/Jka型的红细胞和Jka/Jkb型的红细胞反应，患者血清与Jka/Jka型和 Jka/Jkb型的红细胞凝集强度一致，可排除患者存在抗-k抗体。患者入院，行1周1次，每次640 mg达雷妥尤单抗治疗，此次疑难配血与患者使用该药有关。

达雷妥尤单抗是靶向作用于CD38的人源单克隆抗体，可直接与CD38结合，诱导骨髓瘤细胞死亡，用于治疗复发或难治性多发性骨髓瘤成年患者[6]。本研究结果提示，达雷妥尤单抗可能与红细胞表面低水平表达的CD38结合，使抗体筛查和交叉配血微柱凝胶法出现阳性结果。而盐水法检测的是IgM抗体，聚凝胺法对抗CD38和CD38无作用，所以交叉配血结果都是相合的。本研究认为在达雷妥尤单抗治疗前，应鉴定患者ABO、Rh血型并进行抗体筛查试验，临床可输注ABO和Rh血型同型，在盐水及凝聚胺介质中交叉配血相合的去白红细胞悬液。