洋金花叶中黄酮类和生物碱类化学成分研究

刘 艳，荣晓惠，谭金燕，潘 娟，管 伟，匡海学，杨炳友*

1.黑龙江中医药大学，教育部北药基础与应用研究重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150040

2.山西中医药大学，山西 晋中 030619

洋金花Datura metelL.为茄科曼陀罗属植物，《中国药典》2020年版记载其入药部位为花，具有平喘止咳、镇痛解痉、麻醉的功效[1]。洋金花的主要化学成分为醉茄内酯类、黄酮类和生物碱类，具有抗炎、抗瘙痒和细胞保护等广泛的生物活性，尤其在临床上对于治疗银屑病具有显著的疗效[2-3]。然而，近年来，通过对洋金花叶的化学成分研究发现，洋金花叶中也存在具有抗炎、抗菌、抗氧化、免疫抑制等多种生物活性的醉茄内酯类、黄酮类和生物碱类成分[4-5]。为进一步丰富洋金花叶的化学成分和生物活性，本研究继续对洋金花叶的黄酮类和生物碱类成分进行研究，共分离鉴定出39个单体化合物。包括20个黄酮类成分：紫杉叶素（taxifolin，1）、(＋)-儿茶素 [(＋)-catechin，2]、kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranoside（3）、紫云英苷（astragalin，4）、异槲皮苷（isoquercitrin 5）、紫杉叶素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷（taxifolin-3-O-α-L-arabinofurano- side，6）、(2R,3R)-(＋)-glucodistylin（7）、(2S,3S)-(-)-glucodistylin （8）、quercetin-3-O-β-xylopyranosyl-(1→2)-β-glucopyranoside（9）、异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（isorhamnetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside，10）、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside，11）、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷（diosmetin-7-O-β-D-glucoside，12）、木犀草素-7-O-β-D-(6′′-乙酰基)-吡喃葡萄糖苷[luteolin-7-O-β-D-(6′′-acetyl)-glucopyranoside，13]、plantaginin（14）、木犀草素-7-O-β-D-龙胆二糖苷（luteolin-7-O-β-D-gentiobioside，15）、7-Oprimverosylformononetin（16）、isoetin-7-O-β-Dglucopyranosyl-2′-O-α-D-glucopyranoside（17）、银锻苷（tiliroside，18）、2,3,6,7-tetrahydroxyxanthone（19）、1,2,6,7-tetrahydroxyxanthone（20）；19个生物碱类：N-反式-对-香豆酰基酪胺（N-trans-pcoumaroyltyramine，21）、N-反式-对-香豆酰基章鱼胺（N-trans-p-coumaroyloctopamine，22）、eleutherazine B（23）、1,2,3,4-tetrahydro-1-methylβ-carboline-3-carboxylic acid（24）、naphthisoxazol A（25）、1-甲氧甲酰-β-咔巴啉（1-carbomethoxy-βcarboline，26）、1-benzyl-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indole-3-carboxylic acid（27）、(±)-1-phenyl-2-imido-1-propanol（28）、(1S,2R)-N-acetylephedrine（29）、(1R,2S)-N-acetylephedrine （30）、(1S,2R)-Nformylephedrine （31）、(1R,2S)-N-formylephedrine（32）、胸腺嘧啶（thymine，33）、脱氧胸腺嘧啶核苷（thymidine，34）、2-氨基腺苷（2-amino adenosine，35）、3-吲哚甲醛（1H-indole-3-carboxaldehyde，36）、L-苯丙氨酸（L-phenylalanine，37）、bacilsubteramide A（38）、金色酰胺醇酯（aurantiamide acetate，39）。其中12个黄酮类化合物（6～10、13～17、19、20）和11个生物碱类化合物（23～24、27～32、35、36、38）为首次从茄科中分离得到，7个黄酮类化合物（1～3、5、11、12、18），3个生物碱类化合物（26、33、37）等首次从曼陀罗属中分离得到。且化合物3、5、8～11、13～15、17、18、21～27、35、36、39具有一定程度的抗炎活性。本研究充分利用了洋金花叶资源，进一步阐明了洋金花叶的药效物质基础，为洋金花叶的深入研究提供了理论依据。

1 仪器与材料

Bruker-400/600超导核磁共振光谱仪（瑞士Bruker公司）；UHPLC-Orbitrap-MS质谱系统（Thermo Fisher Scientific公司）；SunFire分析型色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）、SunFire半制备型色谱柱（250 mm×10 mm，5 μm）、2695-2998-2414分析高效液相色谱仪（美国Waters公司）；Shimadzu CBM-20A型半制备HPLC（日本岛津公司）；旋转蒸发仪（日本东京理化器械株式会社）；Sepacore型中压液相色谱仪（瑞士Buchi公司）；Epoch 2型酶标仪（美国伯腾仪器公司）；恒温CO2培养箱（美国Thermo Fisher公司）；高压蒸汽灭菌锅（上海博讯实业有限公司）；倒置相差显微镜（日本Olympus公司）。

GF254型薄层硅胶（烟台江友公司）；柱色谱用硅胶（80～100、200～300目，青岛海洋化工厂）；柱色谱用ODS（12 nm，s-50 μm，日本YMC公司）；色谱层析用分析纯化学试剂（天津试剂一厂）；色谱用甲醇（德国Merck公司）；RAW264.7细胞系（武汉大学细胞保藏中心）；FBS胎牛血清（以色列BI公司）；DMEM培养基、96孔板（美国Corning公司）；青霉素-链霉素（双抗，上海碧云天公司）；DMSO、LPS、MTT（美国Sigma公司）；无水对氨基苯磺酸（天津市光复精细化工研究所）；N-α-萘乙二胺（天津市傲然精细化工研究所）。

洋金花叶于2017年9月采收于黑龙江省哈尔滨市双城区，置于通风处阴干。经黑龙江中医药大学药学院药用植物教研室樊锐锋教授鉴定为茄科曼陀罗属植物白花曼陀罗D.metelL.的叶。原植物标本（20170901）保存于黑龙江中医药大学中药化学教研室。

2 提取与分离

将干燥的洋金花叶20 kg，以8倍量的70% 乙醇回流提取3次，每次2 h，滤过，合并乙醇液，减压回收，得洋金花叶70%乙醇总提物4.82 kg（出膏率24.1%）。将洋金花叶70%乙醇总提物经HP-20大孔吸附树脂，分别用水（2 BV）、30%乙醇（2 BV）、95%乙醇（4 BV）以1 BV/h体积流量进行柱色谱洗脱，收集相应的洗脱液并减压浓缩，得到水洗脱组分930 g（19.3%）、30%乙醇洗脱组分1.195 kg（24.8%）和95%乙醇洗脱组分1.894 kg（39.3%）。

称取30%乙醇洗脱组分（400 g），经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇（1∶0→0∶1）进行梯度洗脱，得到的洗脱液浓缩后经过反复薄层色谱分析鉴别后合并，最终得到Fr.A～I共9个流分。其中Fr.B经正相硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇（1∶0→0∶1）进行梯度洗脱，TLC反复鉴别并合并后，共得到5个流分Fr.B1～B5，Fr.B3经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物33（2.4 mg，tR＝5.4 min）、38（0.8 mg，tR＝9.7 min）、37（6.3 mg，tR＝14.5 min）。Fr.C经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，得到Fr.C1～C4共4个流分，Fr.C2经半制备型HPLC [甲醇-水（60∶40），5 mL/min]分离得到化合物34（1.3 mg，tR＝9.1 min），28（2.3 mg，tR＝18.0 min），Fr.C3经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物39（1.4 mg，tR＝10.2 min）。Fr.D经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，得到共7个流分Fr.D1～D7，Fr.D3经半制备型HPLC[甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物17（4.8 mg，tR＝13.2 min），15（4.9 mg，tR＝15.6 min），18（6.3 mg，tR＝21.2 min），Fr.D4经ODS柱色谱分离，以甲醇-水（1∶9→1∶0）进行梯度洗脱，TLC反复鉴别并合并后，得到共5个流分Fr.D4-1～D4-5，其中Fr.D4-2经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物29（15.7 mg，tR＝15.6 min）、30（15.7 mg，tR＝15.6 min）、26（4.7 mg，tR＝25.1 min），Fr.D4-3经半制备型HPLC [甲醇-水（60∶40），5 mL/min]分离得到化合物31（3.3 mg，tR＝17.0 min）、32（3.3 mg，tR＝17.0 min）。Fr.E经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，共得到5个流分Fr.E1～E5，Fr.E3经半制备型HPLC [甲醇-水（50∶50），5 mL/min]分离得到化合物19（1.7 mg，tR＝16.8 min），Fr.E4经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物20（1.1 mg，tR＝15.8 min）、14（2.1 mg，tR＝17.6 min）、27（2.4 mg，tR＝20.8 min）。Fr.F经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，得到共4个流分Fr.F1～F4，Fr.F2经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物12（2.7 mg，tR＝17.4 min）、16（3.5 mg，tR＝18.5 min）。Fr.G经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，得到共4个流分Fr.G1～G4，Fr.G2经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物5（1.8 mg，tR＝19.9 min），Fr.G3经ODS柱色谱分离，以甲醇-水（1∶9→1∶0）进行梯度洗脱，TLC反复鉴别并合并后，共得到4个流分Fr.G3-1～G3-4，其中，Fr.G3-3经半制备型HPLC [甲醇-水（58∶42），5 mL/min]分离得到化合物10（1.4 mg，tR＝9.8 min）、4（3.6 mg，tR＝18.9 min）、13（3.3 mg，tR＝21.2 min）。Fr.H经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，得到共5个流分Fr.H1～H5，Fr.H2经ODS柱色谱分离，以甲醇-水（1∶9→1∶0）进行梯度洗脱，TLC反复鉴别并合并后，共得到6个流分Fr.H2-1～H2-6，其中Fr.H2-3经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物1（3.9 mg，tR＝15.5 min）、2（8.1 mg，tR＝20.4 min）、3（14.4 mg，tR＝22.7 min），Fr.H2-4经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物7（4.3 mg，tR＝14.1 min）、6（2.5 mg，tR＝17.2 min）、8（7.2 mg，tR＝20.8 min），Fr.H2-5经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物9（3.4 mg，tR＝16.5 min）、11（1.4 mg，tR＝18.4 min）。

称取95%乙醇洗脱组分（400 g），经硅胶柱色谱、用二氯甲烷-甲醇（100∶1→0∶1）进行梯度洗脱，得到的洗脱液浓缩后经过反复薄层色谱分析鉴别后合并，最终得到6个流分Fr.A～F。Fr.C经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，得到4个流分Fr.C1～C4，Fr.C3经半制备型HPLC[甲醇-水（60∶40），5 mL/min]分离得到化合物23（1.6 mg，tR＝14.0 min）、22（14.1 mg，tR＝16.0 min），Fr.C4经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物35（3.7 mg，tR＝6.4 min）、36（1.4 mg，tR＝17.1 min）。Fr.D经正相硅胶柱色谱分离，TLC反复鉴别并合并后，得到Fr.D1～D3共3个流分，Fr.D2经ODS柱色谱分离，以甲醇-水（1∶9→1∶0）进行梯度洗脱，并经TLC反复鉴别并合并后，共得到7个流分Fr.D2-1～D2-7，其中Fr.D2-4经半制备型HPLC [甲醇-水（55∶45），5 mL/min]分离得到化合物25（4.3 mg，tR＝11.0 min）、24（1.0 mg，tR＝13.6 min）、21（8.7 mg，tR＝20.4 min）。

3 结构鉴定

化合物1：黄色无定形粉末（甲醇），分子式C15H12O7；HR-ESI-MSm/z: 327.047 2 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 6.98 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 6.87 (1H, dd,J= 8.1, 2.0 Hz, H-6′), 6.82(1H, d,J= 8.1 Hz, H-5′), 5.94 (1H, d,J= 2.1 Hz,H-8), 5.90 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-6), 4.93 (1H, d,J=11.5 Hz, H-2), 4.52 (1H, d,J= 11.5 Hz, H-3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 198.4 (C-4), 168.7(C-7), 165.3 (C-5), 164.5 (C-9), 147.2 (C-4′), 146.3(C-3′), 129.9 (C-1′), 120.9 (C-6′), 116.1 (C-2′), 115.9(C-5′), 101.8 (C-10), 97.3 (C-6), 96.3 (C-8), 85.1(C-2), 73.7 (C-3)。以上数据与文献报道基本一致[6]，故鉴定化合物1为紫杉叶素。

化合物2：黄色无定形粉末（甲醇），分子式C15H14O6；HR-ESI-MSm/z: 313.068 2 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 6.84 (1H, d,J= 1.9 Hz, H-2′), 6.76 (1H, d,J= 8.1 Hz, H-5′), 6.72 (1H, dd,J= 8.1, 1.9 Hz, H-6′), 5.93 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-8),5.86 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-6), 4.57 (1H, d,J= 7.5 Hz,H-2), 3.98 (1H, m, H-3), 2.85 (1H, dd,J= 16.1, 5.4 Hz, H-4a), 2.51 (1H, dd,J= 16.1, 8.2 Hz, H-4b)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 157.8 (C-5), 157.6(C-7), 156.9 (C-9), 146.2 (C-3′, 4′), 132.2 (C-1′),120.0 (C-6′), 116.1 (C-2′), 115.3 (C-5′), 100.8 (C-10),96.3 (C-6), 95.5 (C-8), 82.8 (C-2), 68.8 (C-3), 28.5(C-4)。以上数据与文献报道基本一致[7]，故鉴定化合物2为(＋)-儿茶素。

化合物3：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C21H20O10；HR-ESI-MSm/z:455.094 8 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ:7.76 (2H, d,J= 8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.93 (2H, d,J= 8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.37 (1H, brs, H-8), 6.20 (1H, d,J= 1.6 Hz, H-6), 5.37 (1H, d,J= 1.4 Hz, H-1′′), 4.21 (1H,brs, H-2′′), 3.70 (1H, dd,J= 9.0, 3.4 Hz, H-3′′), 3.32(2H, m, H-4′′, 5′′), 0.91 (3H, d,J= 5.6 Hz, H-6′′)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 179.6 (C-4), 166.2(C-7), 163.2 (C-5), 161.6 (C-4′), 159.3 (C-9), 158.6(C-2), 136.2 (C-3), 131.9 (C-2′, 6′), 122.6 (C-1′),116.5 (C-3′, 5′), 105.8 (C-10), 103.5 (C-1′′), 99.9(C-6), 94.8 (C-8), 73.2 (C-4′′), 72.1 (C-3′′), 72.0(C-5′′), 71.9 (C-2′′), 17.6 (C-6′′)。以上数据与文献报道基本一致[8]，故鉴定化合物3为kaempferol-3-Oα-L-rhamnopyranoside。

化合物4：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C21H20O11；HR-ESI-MSm/z:471.089 6 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ:8.04 (2H, d,J= 8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.88 (2H, d,J= 8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.39 (1H, brs, H-8), 6.19 (1H, brs, H-6),5.25 (1H, d,J= 7.2 Hz, H-1′′), 3.68 (1H, dd,J= 11.8,2.0 Hz, H-6′′a), 3.52 (1H, dd,J= 11.8, 5.4 Hz, H-6′′b),3.43 (2H, m, H-3′′, 4′′), 3.27 (1H, m, H-2′′), 3.20 (1H,m, H-5′′)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 179.5(C-4), 166.0 (C-7), 163.1 (C-5), 161.6 (C-4′), 159.1(C-9), 158.5 (C-2), 135.5 (C-3), 132.3 (C-2′, 6′), 122.8(C-1′), 116.1 (C-3′, 5′), 105.8 (C-10), 104.1 (C-1′′),99.9 (C-6), 94.8 (C-8), 78.4 (C-5′′), 78.1 (C-3′′), 75.8(C-2′′), 71.4 (C-4′′), 62.7 (C-6′′)。以上数据与文献报道基本一致[9]，故鉴定化合物4为紫云英苷。

化合物5：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C21H20O12；HR-ESI-MSm/z:487.084 7 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ:7.70 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-2′), 7.58 (1H, d,J= 8.6, 2.2 Hz, H-6′), 6.87 (1H, d,J= 8.6 Hz, H-5′), 6.39 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-6), 5.25(1H, d,J= 7.5 Hz, H-1′′), 3.71 (1H, dd,J= 11.9, 2.3 Hz, H-6′′a), 3.57 (1H, dd,J= 11.9, 5.3 Hz, H-6′′b),3.47 (1H, m, H-2′′), 3.42 (1H, m, H-3′′), 3.34 (1H, m,H-4′′), 3.21 (1H, m, H-5′′)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ: 179.5 (C-4), 166.1 (C-7), 163.1 (C-5),159.0 (C-2), 158.5 (C-9), 149.9 (C-4′), 145.9 (C-3′),135.6 (C-3), 123.2 (C-1′), 123.1 (C-6′), 117.6 (C-5′),116.1 (C-2′), 105.7 (C-10), 104.3 (C-1′′), 99.9 (C-6),94.7 (C-8), 78.4 (C-5′′), 78.1 (C-3′′), 75.7 (C-2′′), 71.2(C-4′′), 62.6 (C-6′)。以上数据与文献报道基本一致[9]，故鉴定化合物5为异槲皮苷。

化合物6：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C20H20O11；HR-ESI-MSm/z459.089 5 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ:7.01 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 6.89 (1H, dd,J= 8.1,2.0 Hz, H-6′), 6.83 (1H, d,J= 8.1 Hz, H-5′), 5.93 (1H,d,J= 2.1 Hz, H-6), 5.91 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-8), 5.04(1H, d,J= 11.7 Hz, H-2), 4.89 (1H, d,J= 11.7 Hz,H-3), 4.24 (1H, m, H-4′′), 4.20 (1H, s, H-1′′), 3.88(1H, brs, H-2′′), 3.78 (1H, brs, H-3′′), 3.62 (2H, m,H-5′′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 197.6 (C-4),169.2 (C-7), 165.4 (C-5), 164.6 (C-9), 147.6 (C-4′),146.6 (C-3′), 129.2 (C-1′), 120.8 (C-6′), 116.3 (C-5′),115.7 (C-2′), 107.8 (C-1′′), 102.2 (C-10), 97.4 (C-6),96.5 (C-8), 88.9 (C-4′′), 83.9 (C-2), 81.1 (C-2′′), 79.2(C-3′′), 74.8 (C-3), 63.3 (C-5′′)。以上数据与文献报道基本一致[6]，故鉴定化合物6为紫杉叶素-3-O-α-L-阿拉伯呋喃糖苷。

化合物7：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C21H22O12；HR-ESI-MSm/z489.100 2 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ:6.97 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 6.84 (1H, dd,J= 8.2,2.0 Hz, H-6′), 6.78 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-5′), 5.92 (1H,d,J= 2.1 Hz, H-6), 5.90 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-8), 5.24(1H, d,J= 9.7 Hz, H-2), 4.94 (1H, d,J= 9.7 Hz, H-3),3.87 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1′′), 3.78 (1H, dd,J= 12.0,2.2 Hz, H-6′′b), 3.61 (1H, dd,J= 12.0, 5.9 Hz, H-6′′a),3.25 (2H, overlapped, H-2′′, 4′′), 3.13 (1H, t,J= 9.1 Hz, H-5′′) 3.00 (1H, m, H-3′′)；13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ: 195.9 (C-4), 169.0 (C-7), 165.5 (C-5),164.2 (C-9), 147.3 (C-3′), 146.4 (C-4′), 129.0 (C-1′),121.1 (C-6′), 116.2 (C-5′), 115.9 (C-2′), 102.6 (C-1′′),102.5 (C-10), 97.3 (C-8), 96.3 (C-6), 83.6 (C-2), 78.2(C-3′′), 77.6 (C-5′), 77.2 (C-3), 74.6 (C-2′′), 71.3 (C-4′′),62.6 (C-6′)。以上数据与文献报道基本一致[10]，故鉴定化合物7为 (2R,3R)-(＋)-glucodistylin。

化合物8：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C21H22O12；HR-ESI-MSm/z:489.100 5 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ:6.96 (1H, d,J= 1.8 Hz, H-2′), 6.80 (1H, dd,J= 8.2,1.8 Hz, H-6′), 6.76 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-5′), 5.90 (2H,m, H-6, 8), 5.26 (1H, d,J= 8.8 Hz, H-2), 4.86 (1H,overlapped, H-3), 4.68 (1H, d,J= 7.8 Hz, H-1′′), 3.81(1H, m, H-6′′a), 3.58 (1H, m, H-6′′b), 3.20 (2H, m,H-4′′, 5′′), 3.14 (1H, t,J= 8.1 Hz, H-3′′) 3.10 (1H , m,H-2′′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 196.1 (C-4),169.1 (C-7), 165.6 (C-5), 164.1 (C-9), 147.0 (C-3′),146.0 (C-4′), 128.9 (C-1′), 121.1 (C-6′), 116.2 (C-5′),116.0 (C-2′), 104.6 (C-1′′), 102.3 (C-10), 97.3 (C-8),96.3 (C-6), 83.4 (C-2), 78.0 (C-3′′), 77.9 (C-5′′), 77.7(C-3), 75.4 (C-2′′), 71.5 (C-4′′), 62.8 (C-6′′)。以上数据与文献报道基本一致[10]，故鉴定化合物8为(2S,3S)-(-)-glucodistylin。

化合物9：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C26H28O16；HR-ESI-MSm/z:619.127 0 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ:7.63 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-2′), 7.10 (1H, m, H-6′),6.87 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-5′), 6.39 (1H, d,J= 2.0 Hz,H-8), 6.20 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 5.51 (1H, d,J=7.5 Hz, H-1′′), 4.76 (1H, d,J= 6.9 Hz, H-1′′′), 3.93(1H, dd,J= 11.6, 5.0 Hz, H-5′′′a), 3.72 (2H, m, H-2′′,6′′a), 3.60 (1H, t,J= 8.9 Hz, H-3′′), 3.56 (1H, dd,J=12.1, 5.4 Hz, H-6′′b), 3.42 (4H, m, H-2′′′, 3′′′, 4′′, 4′′′),3.23 (2H, m, H-5′′, 5′′′b)；13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ: 179.6 (C-4), 165.8 (C-7), 163.2 (C-5),158.4 (C-9), 158.3 (C-2), 149.7 (C-4′), 146.0 (C-3′),135.1 (C-3), 123.4 (C-6′), 123.2 (C-1′), 117.3 (C-2′),116.0 (C-5′), 105.8 (C-10), 105.4 (C-1′′′), 100.8(C-1′′), 99.7 (C-6), 94.5 (C-8), 82.3 (C-2′′), 78.4(C-3′′), 78.2 (C-5′′), 77.0 (C-3′′′), 74.9 (C-2′′′), 71.1(C-4′′), 71.0 (C-4′′′), 66.6 (C-5′′′), 62.4 (C-6′′)。以上数据与文献报道基本一致[11]，故鉴定化合物9为quercetin 3-O-β-D-xylopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside。

化合物10：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C28H32O16；HR-ESI-MSm/z:647.158 1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.96 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-2′), 7.57 (1H, dd,J= 8.3,2.0 Hz, H-6′), 6.95 (1H, d,J= 8.3 Hz, H-5′), 6.85 (1H,d,J= 2.1 Hz, H-8), 6.46 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-6), 5.58(1H, d,J= 7.5 Hz, H-1′′), 5.57 (1H, s, H-1′′′), 3.85(3H, s, H-3′-OCH3), 3.85 (1H, overlapped, H-2′′′),3.64 (1H, m, H-3′′′), 3.55 (1H, m, H-6′′a), 3.18～3.45(8H, m, H-2′′, 2′′′, 3′′, 4′′, 4′′′, 5′′, 5′′′, 6′′b), 1.12 (3H,d,J= 6.2 Hz, H-6′′′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 178.1 (C-4), 162.1 (C-7), 161.4 (C-5), 157.3 (C-2),156.4 (C-9), 150.1 (C-3′), 147.4 (C-4′), 133.8 (C-3),122.8 (C-6′), 121.4 (C-1′), 115.7 (C-5′), 113.9 (C-2′),106.1 (C-10), 101.2 (C-1′′), 99.8 (C-6), 98.8 (C-1′′′),95.0 (C-8), 78.0 (C-5′′), 76.9 (C-3′′), 74.8 (C-2′′), 72.1(C-4′′′), 70.7 (C-3′′′), 70.5 (C-2′′′), 70.3 (C-4′′, 5′′′),61.1 (C-6′′), 56.2 (3′-OCH3), 18.4 (C-6′′′)。以上数据与文献报道的基本一致[12]，故鉴定化合物10为异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷。

化合物11：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C21H20O10；HR-ESI-MSm/z:455.094 3 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ:7.89 (2H, d,J= 8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.93 (2H, d,J= 8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.82 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-8), 6.66 (1H,s, H-3), 6.50 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-6), 5.06 (1H, d,J=7.2 Hz, H-1′′), 3.93 (1H, dd,J= 12.1, 2.1 Hz, H-6′′a),3.71 (1H, dd,J= 12.1, 5.8 Hz, H-6′′b), 3.54 (1H , m,H-5′′), 3.48 (2H, m, H-2′′, 3′′), 3.40 (1H, m, H-4′′)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 184.1 (C-4), 166.8(C-2), 164.8 (C-7), 162.9 (C-4′, 5), 159.0 (C-9), 129.7(C-2′, 6′), 123.0 (C-1′), 117.1 (C-3′, 5′), 107.0 (C-10),104.1 (C-3), 101.6 (C-1′′), 101.2 (C-6), 96.0 (C-8),78.4 (C-5′′), 77.8 (C-3′′), 74.7 (C-2′′), 71.2 (C-4′′),62.4 (C-6′′)。以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物11为芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物12：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C22H22O11；HR-ESI-MSm/z:485.105 2 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.45 (1H, d,J= 1.7 Hz, H-2′), 7.44 (1H, dd,J= 8.4,1.7 Hz, H-6′), 6.89 (1H, d,J= 8.4 Hz, H-5′), 6.78 (1H,d,J= 1.9 Hz, H-6), 6.74 (1H, s, H-3), 6.43 (1H, d,J=1.9 Hz, H-8), 5.07 (1H, d,J= 7.5 Hz, H-1′′), 3.19～3.71 (6H, m, H-2′′～6′′), 3.38 (3H, overlapped,4′-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 182.4(C-4), 165.0 (C-7), 163.4 (C-5), 161.6 (C-2), 157.4(C-9), 150.5 (C-4′), 146.3 (C-3′), 121.8 (C-1′), 119.6(C-6′), 116.4 (C-5′), 114.0 (C-2′), 105.8 (C-10), 103.6(C-3), 100.3 (C-1′′), 100.0 (C-6), 95.2 (C-8), 77.6(C-5′′), 76.9 (C-3′′), 73.6 (C-2′′), 70.0 (C-4′′), 61.1(C-6′′), 49.1 (4′-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[14]，故鉴定化合物12为香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物13：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C23H22O12；HR-ESI-MSm/z:513.100 2 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.45 (1H, d,J= 8.3 Hz, H-6′), 7.43 (1H, brs, H-2′),6.91 (1H, d,J= 8.3 Hz, H-5′), 6.77 (1H, d,J= 1.9 Hz,H-8), 6.75 (1H, brs, H-3), 6.44 (1H, d,J= 1.9 Hz,H-6), 5.12 (1H, d,J= 7.4 Hz, H-1′′), 4.35 (1H, d,J=11.2 Hz, H-6′′b), 4.05 (1H, dd,J= 11.2, 7.4 Hz,H-6′′a), 3.29～3.76 (4H, m, H-2′′～5′′), 2.01 (3H, s,6′′-COOCH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ:182.4 (C-4), 170.7 (6′′-CO), 164.9 (C-7), 163.1 (C-2),161.6 (C-5), 157.4 (C-9), 150.5 (C-4′), 146.3 (C-3′),121.8 (C-1′), 119.6 (C-6′), 116.4 (C-5′), 114.0 (C-2′),105.9 (C-10), 103.6 (C-3), 100.0 (C-1′′, 6), 95.2 (C-8),76.6 (C-3′′), 74.3 (C-2′′), 73.5 (C-5′′), 70.3 (C-4′′),63.8 (C-6′′), 21.1 (6′′-COOCH3)。以上数据与文献报道的基本一致[15]，故鉴定化合物13为木犀草素7-O-β-D-(6′′-乙酰基)-吡喃葡萄糖苷。

化合物14：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C21H20O11；HR-ESI-MSm/z:471.089 7 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ:7.88 (2H, d,J= 8.2 Hz, H-2′, 6′), 7.01 (1H, s, H-8),6.92 (2H, d,J= 8.2 Hz, H-3′, 5′), 6.63 (1H, s, H-3),5.06 (1H, d,J= 7.4 Hz, H-1′′), 3.98 (1H, overlapped,H-6′′a), 3.71 (1H, dd,J= 12.0, 6.0 Hz, H-6′′b), 3.41～3.60 (4H, m, H-2′′～5′′)；13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ: 184.4 (C-4), 166.8 (C-2), 162.8 (C-4′),152.8 (C-7), 151.3 (C-9), 147.9 (C-5), 131.8 (C-6),129.6 (C-2′, 6′), 123.3 (C-1′), 117.0 (C-3′, 5′), 107.4(C-10), 103.5 (C-3), 102.6 (C-1′′), 95.8 (C-8), 78.6(C-5′′), 77.5 (C-3′′), 74.7 (C-2′′), 71.4 (C-4′′), 62.5(C-6′′)。以上数据与文献报道基本一致[16]，故鉴定化合物14为plantaginin。

化合物15：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C27H32O17；HR-ESI-MSm/z:651.153 0 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.45 (1H, dd,J=8.4, 1.8 Hz, H-6′), 7.43 (1H, brs,H-2′), 6.91 (1H, d, J = 8.3 Hz, H-5′), 6.80 (1H, d,J=1.8 Hz, H-8), 6.72 (1H, s, H-3), 6.50 (1H, d,J= 1.8 Hz, H-6), 5.09 (1H, d,J= 7.3 Hz, H-1′′), 4.18 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1′′′), 3.98 (1H, d,J= 10.6 Hz, H-6′′′a),3.12～3.71 (11H, m, H-2′′, 2′′′, 3′′, 3′′′, 4′′, 4′′′, 5′′, 5′′′,6′′, 6′′′b)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 182.4(C-4), 165.0 (C-2), 163.4 (C-7), 161.6 (C-5), 157.4(C-9), 150.5 (C-4′), 146.2 (C-3′), 121.8 (C-1′), 119.7(C-6′), 116.5 (C-5′), 114.1 (C-2′), 105.8 (C-10), 104.0(C-1′′′), 103.6 (C-3), 100.3 (C-1′′), 100.1 (C-6), 95.2(C-8), 77.5 (C-3′′), 77.2 (C-3′′′), 76.7 (C-5′′′), 75.9(C-5′′), 74.0 (C-2′′′), 73.6 (C-2′′), 70.6 (C-4′′′), 69.8(C-4′′), 69.0 (C-6′′), 61.5 (C-6′′′)。以上数据与文献报道基本一致[17]，故鉴定化合物15为木犀草素-7-O-β-D-龙胆二糖苷。

化合物16：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C27H30O13；HR-ESI-MSm/z:585.157 7 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ:8.29 (1H, s, H-2), 8.18 (1H, d,J= 8.9 Hz, H-5), 7.52(2H, d,J= 8.7 Hz, H-2′, 6′), 7.39 (1H, d,J= 2.2 Hz,H-8), 7.26 (1H, dd,J= 8.9, 2.2 Hz, H-6), 7.01 (2H, d,J= 8.7 Hz, H-3′, 5′), 5.07 (1H, d,J= 7.3 Hz, H-1′′),4.36 (1H, d,J= 7.3 Hz, H-1′′′), 4.15 (1H, d,J= 9.4 Hz, H-5′′′a), 3.91 (1H, dd,J= 11.5, 5.3 Hz, H-6′′a),3.84 (3H, s, 4′-OCH3), 3.80 (2H, m, H-5′′, 5′′′b), 3.54(3H, m, H-2′′～4′′), 3.36 (3H, m, H-2′′′～4′′′), 3.15(1H, m, H-6′′b)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ:178.0 (C-4), 163.4 (C-7), 161.2 (C-4′), 159.3 (C-9),155.3 (C-2), 131.4 (C-2′, 6′), 128.3 (C-5), 125.9 (C-3),125.4 (C-1′), 120.2 (C-10), 117.2 (C-6), 114.9 (C-3′,5′), 105.8 (C-1′′′), 105.1 (C-8), 101.8 (C-1′′), 77.8(C-3′′′), 77.7 (C-3′′), 77.4 (C-5′′), 75.1 (C-2′′), 74.7(C-2′′′), 71.7 (C-4′′′), 71.1 (C-4′′), 70.6 (C-5′′′), 66.9(C-6′′), 55.7 (4′-OCH3)。以上数据与文献报道的基本一致[18]，故鉴定化合物 16为 7-Oprimverosylformononetin。

化合物17：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C27H30O17；HR-ESI-MSm/z:649.138 8 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.29 (1H, s, H-6′), 7.09 (1H, s, H-3), 6.77 (1H, s,H-3′), 6.71 (1H, d,J= 1.8 Hz, H-8), 6.42 (1H, d,J=1.8 Hz, H-6), 5.08 (1H, d,J= 7.6 Hz, H-1′′), 4.89 (1H,brs, H-1′′′), 3.15～3.70 (12H, m, H-2′′, 2′′′, 3′′, 3′′′, 4′′,4′′′, 5′′, 5′′′, 6′′, 6′′′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 182.6 (C-4), 163.3 (C-7), 162.1 (C-2), 161.6 (C-5),157.5 (C-9), 150.8 (C-2′, 4′), 140.8 (C-5′), 115.0(C-6′), 110.6 (C-1′), 109.3 (C-3), 105.7 (C-10), 104.4(C-3′), 101.6 (C-1′′′), 100.3 (C-1′′), 99.7 (C-6), 94.9(C-8), 77.6 (C-5′′, 5′′′), 77.2 (C-3′′′), 76.8 (C-3′′), 73.8(C-2′′′), 73.6 (C-2′′), 70.0 (C-4′′), 69.9 (C-4′′′), 61.1(C-6′′′), 61.0 (C-6′′)。以上数据与文献报道的基本一致[19]，故鉴定化合物 17 为 isoetin-7-O-β-Dglucopyranosyl-2′-O-α-D-glucopyranoside。

化合物18：黄色无定形粉末（甲醇），Molish反应呈阳性，分子式C30H26O13；HR-ESI-MSm/z:617.126 5 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ:7.98 (2H, d,J= 9.0 Hz, H-2′, 6′), 7.39 (1H, d,J= 15.9 Hz, H-7′′′), 7.30 (2H, d,J= 8.9 Hz, H-2′′′, 6′′′), 6.81(2H, d,J= 9.0 Hz, H-3′, 5′), 6.79 (2H, d,J= 8.9 Hz,H-3′′′, 5′′′), 6.30 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-8), 6.13 (1H, d,J= 2.0 Hz, H-6), 6.06 (1H, d,J= 15.9 Hz, H-8′′′),5.23 (1H, d,J= 7.4 Hz, H-1′′), 4.29 (1H, d,J= 11.8,2.1 Hz, H-6′′b), 4.18 (1H, dd,J= 11.8, 6.6 Hz, H-6′′a),3.31～3.50 (4H, m, H-2′′～5′′)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ: 179.4 (C-4), 168.8 (C-9′′′), 166.0 (C-7),163.0 (C-5), 161.5 (C-4′), 161.2 (C-4′′′), 159.4 (C-2),158.4 (C-9), 146.6 (C-7′′′), 135.2 (C-3), 132.2 (C-2′,6′), 131.2 (C-2′′′, 6′′′), 127.1 (C-1′′′), 122.7 (C-1′),116.8 (C-3′, 5′), 116.0 (C-3′′′, 5′′′), 114.8 (C-8′′′),105.6 (C-10), 104.0 (C-1′′), 100.0 (C-6), 94.8 (C-8),78.0 (C-3′′), 75.8 (C-2′′), 75.7 (C-5′′), 71.7 (C-4′′),64.3 (C-6′′)。以上数据与文献报道基本一致[9]，故鉴定化合物18为银锻苷。

化合物19：黄色无定形粉末（甲醇），分子式C13H8O6；HR-ESI-MSm/z: 283.021 3 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.37 (2H, s, H-4,5), 6.80 (2H, s, H-1, 8)；13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ: 174.1 (C-9), 153.2 (C-2, 7), 151.2 (C-1a,8a), 143.7 (C-3, 6), 113.6 (C-4a, 5a), 109.1 (C-4, 5),103.0 (C-1, 8)。以上数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物19为2,3,6,7-tetrahydroxyxanthone。

化合物20：黄色无定形粉末（甲醇），分子式C13H8O6；HR-ESI-MSm/z: 283.021 1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.48 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-4), 7.40 (1H, s, H-5), 6.91 (1H, s, H-8), 6.87(1H, d,J= 8.5 Hz, H-3)；13C-NMR (150 MHz DMSO-d6)δ: 174.8 (C-9), 153.4 (C-7), 151.2 (C-8a),150.8 (C-2), 146.8 (C-1a), 143.8 (C-6), 132.8 (C-1),116.5 (C-4), 114.9 (C-4a), 113.7 (C-5a), 113.0 (C-3),109.4 (C-5), 103.2 (C-8)。以上数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物20为1,2,6,7-tetrahydroxyxanthone。

化合物21：白色无定形粉末（甲醇），分子式C17H17NO3；HR-ESI-MSm/z: 306.110 1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.44 (1H, d,J= 15.6 Hz, H-8), 7.39 (2H, d,J= 8.4 Hz, H-2, 6), 7.04 (2H, d,J= 8.4 Hz, H-2′, 6′), 6.78 (2H, d,J= 8.4 Hz, H-3, 5),6.71 (2H, d,J= 8.4 Hz, H-3′, 5′), 6.38 (1H, d,J= 15.6 Hz, H-7), 3.45 (2H, t,J= 7.2 Hz, H-8′), 2.75 (2H, t,J= 7.2 Hz, H-7′)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:169.2 (C-9), 160.5 (C-4), 157.0 (C-4′), 141.8 (C-7),131.3 (C-1′), 130.7 (C-2, 6), 130.6 (C-2′, 6′), 127.7(C-1), 118.4 (C-8), 116.7 (C-3, 5), 116.3 (C-3′, 5′),42.6 (C-8′), 35.8 (C-7′)。以上数据与文献报道基本一致[21]，故鉴定化合物21为N-反式-对-香豆酰基酪胺。

化合物22：白色无定形粉末（甲醇），分子式C17H17NO4；HR-ESI-MSm/z: 322.106 8 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.46 (1H, d,J= 15.7 Hz, H-3), 7.40 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-5, 9), 7.23 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-4′, 8′), 6.79 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-6, 8),6.78 (2H, d,J= 8.5 Hz, H-5′, 7′), 6.44 (1H, d,J= 15.7 Hz, H-2), 4.73 (1H, dd,J= 8.0, 4.9 Hz, H-2′), 3.53(1H, dd,J= 13.6, 4.9 Hz, H-1′a), 3.44 (1H, dd,J=13.6, 8.0 Hz, H-1′b)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ:169.6 (C-1), 160.5 (C-6′), 158.1 (C-7), 142.0 (C-3),134.7 (C-3′), 130.6 (C-5, 9), 128.5 (C-4′, 8′), 127.7(C-4), 118.3 (C-2), 116.7 (C-6, 8), 116.1 (C-5′, 7′),73.5 (C-2′), 48.4 (C-1′)。以上数据与文献报道基本一致[21]，故鉴定化合物22为N-反式-对-香豆酰基章鱼胺。

化合物23：白色无定形粉末（甲醇），分子式C22H36N4O6；HR-ESI-MSm/z: 475.252 5 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 5.71 (2H, d,J= 1.0 Hz, H-8, 8′), 3.98 (2H, t,J= 5.5 Hz, H-2, 2′), 3.68(4H, t,J= 6.6 Hz, H-11, 11′), 3.22 (4H, m, H-5, 5′),2.31 (4H, t,J= 6.6 Hz, H-10, 10′), 2.11 (6H, brs,H-13, 13′), 1.84 (4H, m, H-3, 3′), 1.60 (4H, m, H-4,4′)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 170.4 (C-1, 1′),169.7 (C-7, 7′), 151.6 (C-9, 9′), 120.9 (C-8, 8′), 60.8(C-11, 11′), 55.7 (C-2, 2′), 44.6 (C-10, 10′), 39.5 (C-5,5′), 32.7 (C-3, 3′), 26.0 (C-4, 4′), 18.5 (C-13, 13′)。以上数据与文献报道基本一致[22]，故鉴定化合物23为eleutherazine B。

化合物24：白色无定形粉末（甲醇），分子式C13H14N2O2；HR-ESI-MSm/z: 253.094 6 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.48 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-9), 7.34 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-12), 7.13 (1H, m,H-11), 7.04 (1H, m, H-10), 4.71 (1H, m, H-3), 3.97(1H, dd,J= 12.1, 5.0 Hz, H-5), 3.44 (1H, dd,J= 16.3,4.0 Hz, H-6a), 3.02 (1H, m, H-6b), 1.75 (3H, d,J=6.8 Hz, 3-CH3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:173.6 (5-COOH), 138.6 (C-13), 131.3 (C-2), 127.5(C-8), 123.3 (C-11), 120.6 (C-10), 119.2 (C-9), 112.3(C-12), 107.8 (C-7), 59.8 (C-5), 51.2 (C-3), 24.3 (C-6),17.1 (3-CH3)。以上数据与文献报道基本一致[23]，故鉴定化合物 24为 1,2,3,4-tetrahydro-1-methyl-βcarboline-3-carboxylic acid。

化合物25：白色无定形粉末（甲醇），分子式C11H9NO2；HR-ESI-MSm/z: 210.052 5 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.69 (1H, d,J= 7.8 Hz, H-5), 7.36 (1H, d,J= 7.8 Hz, H-8), 7.19 (1H, s,H-4), 7.11 (1H, m, H-7), 7.04 (1H, m, H-6), 3.86 (1H,dd,J= 9.4, 3.8 Hz, H-9a), 3.52 (1H, dd,J= 15.2, 3.8 Hz, H-9b), 3.15 (1H, dd,J= 15.2, 9.4 Hz, H-9a)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 174.4 (C-3), 138.4(C-8a), 128.5 (C-4a), 125.2 (C-8), 122.8 (C-7), 120.1(C-6), 119.4 (C-5), 112.4 (C-4), 109.6 (C-3a), 56.7(C-9a), 28.5 (C-9)。以上数据与文献报道基本一致[24]，故鉴定化合物25为naphthisoxazol A。

化合物26：白色无定形粉末（甲醇），分子式C13H10N2O2；HR-ESI-MSm/z: 249.063 3 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 8.40 (1H, d,J= 5.0 Hz, H-3), 8.29 (1H, d,J= 5.0 Hz, H-4), 8.20 (1H, d,J= 7.9 Hz, H-5), 7.70 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-6), 7.60(1H, t,J= 7.4 Hz, H-8), 7.30 (1H, t,J= 7.4 Hz, H-7),4.10 (3H, s, 1-COOCH3)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ: 167.3 (1-CO), 143.3 (C-1), 138.8 (C-3),137.8 (C-13), 133.6 (C-10), 130.7 (C-12), 130.5 (C-6),122.8 (C-5), 121.7 (C-7), 121.6 (C-11), 119.9 (C-4),113.4 (C-8), 53.0 (1-COOCH3)。以上数据与文献报道基本一致[25]，故鉴定化合物26为1-甲氧甲酰-β-咔巴啉。

化合物27：白色无定形粉末（甲醇），分子式C19H18N2O2；HR-ESI-MSm/z: 329.125 8 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.49 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5), 7.33 (4H, m, H-3′, 4′, 5′, 8), 7.22 (2H, m,H-2′, 6′), 7.15 (1H, m, H-7), 7.06 (1H, m, H-6), 5.15(1H, t,J= 6.4 Hz, H-1), 3.88 (1H, dd,J= 8.6, 5.9 Hz,H-3), 3.55 (1H, dd,J= 14.4, 5.6 Hz, H-7′a), 3.34 (1H,m, H-7′b), 3.28 (1H, m, H-4a), 3.16 (1H, dd,J= 16.0,8.0 Hz, H-4b)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 173.0(3-COOH), 138.4 (C-10), 136.2 (C-1′), 130.6 (C-2′,6′), 130.2 (C-3′, 5′), 129.5 (C-13), 128.8 (C-4′), 127.5(C-11), 123.5 (C-7), 120.5 (C-6), 119.2 (C-5), 112.3(C-8), 107.9 (C-12), 55.7 (C-3), 54.1 (C-1), 39.6(C-7′), 23.4 (C-4)。以上数据与文献报道基本一致[26]，故鉴定化合物27为1-benzyl-2,3,4,9-tetrahydro-1Hpyrido[3,4-b]indole-3-carboxylic acid。

化合物28：白色无定形粉末（甲醇），分子式C9H11NO，HR-ESI-MSm/z: 172.073 1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.23～7.39 (5H, m,H-2′, 3′, 4′, 5′, 6′), 5.25 (1H, s, H-1), 1.66 (3H, s,H-3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 159.9 (C-2),142.3 (C-1′), 129.3 (C-3′, 5′), 128.5 (C-4′), 127.0(C-2′, 6′), 75.7 (C-1), 9.2 (C-3)。以上数据与文献报道基本一致[27]，故鉴定化合物28为 (±)-1-phenyl-2-imido-1-propanol。

化合物29：白色无定形粉末（甲醇），分子式C12H17NO2；HR-ESI-MSm/z: 230.115 0 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.30～7.39 (5H, m,H-2～6), 4.62 (1H, d,J= 8.4 Hz, H-7), 3.99 (1H, m,H-8), 2.82 (3H, s, H-12), 1.72 (3H, s, H-10), 1.42 (3H,d,J= 6.7 Hz, H-11)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:173.3 (C-9), 144.1 (C-1), 129.1 (C-3, 5), 128.5 (C-4),127.5 (C-2, 6), 76.4 (C-7), 61.1 (C-8), 28.7 (C-12),21.2 (C-10), 15.4 (C-11)。以上数据与文献报道基本一致[28]，故鉴定化合物 29为(1S,2R)-Nacetylephedrine。

化合物30：白色无定形粉末（甲醇），分子式C12H17NO2；HR-ESI-MSm/z: 230.115 0 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.30～7.39 (5H, m,H-2～6), 4.72 (1H, d,J= 6.8 Hz, H-7), 4.68 (1H, m,H-8), 2.90 (3H, s, H-12), 1.91 (3H, s, H-10), 1.25 (3H,d,J= 6.8 Hz, H-11)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:173.2 (C-9), 144.0 (C-1), 129.3 (C-3, 5), 128.9 (C-4),127.4 (C-2, 6), 77.0 (C-7), 56.5 (C-8), 32.7 (C-12),22.1 (C-10), 15.4 (C-11)。以上数据与文献报道的基本一致[28]，故鉴定化合物 30为(1R,2S)-Nacetylephedrine。

化合物31：白色无定形粉末（甲醇），分子式C11H15NO2；HR-ESI-MSm/z: 216.099 1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 8.00 (1H, s, H-9),7.33～7.40 (5H, m, H-2～6), 4.59 (1H, d,J= 8.1 Hz,H-7), 3.77 (1H, m, H-8), 2.86 (3H, s, H-10), 1.07 (3H,d,J= 6.9 Hz, H-11)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:166.0 (C-9), 143.5 (C-1), 129.5 (C-3, 5), 129.0 (C-4),127.9 (C-2, 6), 75.6 (C-7), 61.5 (C-8), 26.3 (C-10),15.8 (C-11)。以上数据与文献报道基本一致[29]，故鉴定化合物31为(1S,2R)-N-formylephedrine。

化合物32：白色无定形粉末（甲醇），分子式C11H15NO2；HR-ESI-MSm/z: 216.099 1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 8.04 (1H, s, H-9),7.27～7.29 (5H, m, H-2, 3, 4, 5, 6), 4.68 (1H, d,J=8.8 Hz, H-7), 4.53 (1H, m, H-8), 2.97 (3H, s, H-10),0.96 (3H, d,J= 6.9 Hz, H-11)；13C-NMR (CD3OD,100 MHz)δ:165.9 (C-9), 143.5 (C-1), 129.4 (C-3, 5),129.0 (C-4), 128.2 (C-2, 6), 75.4 (C-7), 54.7 (C-8),31.3 (C-10), 14.3 (C-11)。以上数据与文献报道的基本一致[29]，故鉴定化合物 32为 (1R,2S)-Nformylephedrine。

化合物33：白色无定形粉末（甲醇），分子式C5H6N2O2；HR-ESI-MSm/z: 149.032 7 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.24 (1H, d,J= 1.0 Hz, H-6), 1.87 (3H, d,J= 1.0 Hz, 5-CH3)；13C-NMR(150 MHz, CD3OD)δ: 167.4 (C-4), 153.7 (C-2), 139.1(C-6), 110.4 (C-5), 12.1 (5-CH3)。以上数据与文献报道基本一致[30]，故鉴定化合物33为胸腺嘧啶。

化合物34：白色无定形粉末（甲醇），分子式C10H14N2O5；HR-ESI-MSm/z: 265.080 0 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.81 (1H, d,J= 1.2 Hz, H-4), 6.28 (1H, t,J= 7.0 Hz, H-1′), 4.39 (1H, m,H-3′), 3.90 (1H, dt,J= 3.4, 3.4 Hz, H-4′), 3.79 (1H,dd,J= 12.0, 3.2 Hz, H-5′b), 3.72 (1H, dd,J= 12.0,3.7 Hz, H-5′a), 2.23 (2H, m, H-2′), 1.88 (3H, brs,3-CH3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 166.4 (C-2),152.4 (C-6), 138.2 (C-4), 111.5 (C-3), 88.8 (C-4′),86.3 (C-1′), 72.2 (C-3′), 62.8 (C-5′), 41.2 (C-2′), 12.4(3-CH3)。以上数据与文献报道基本一致[31]，故鉴定化合物34为脱氧胸腺嘧啶核苷。

化合物35：白色无定形粉末（甲醇），分子式C10H14N6O4；HR-ESI-MSm/z: 305.096 8 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.96 (1H, s, H-5),5.83 (1H, d,J= 5.6 Hz, H-1′), 4.60 (1H, t,J= 5.6 Hz,H-2′), 4.30 (1H, dd,J= 5.0, 3.4 Hz, H-3′), 4.10 (1H,dt,J= 3.0, 3.0 Hz, H-4′), 3.85 (1H, dd,J= 12.2, 3.0 Hz, H-5′b), 3.74 (1H, dd,J= 12.2, 3.2 Hz, H-5′a)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 159.4 (C-1), 155.2(C-2), 152.5 (C-3), 138.6 (C-5), 118.6 (C-4), 90.2(C-1′), 87.3 (C-4′), 75.5 (C-2′), 72.3 (C-3′), 63.2(C-5′)。以上数据与文献报道的基本一致[32]，故鉴定化合物35为2-氨基腺苷。

化合物36：白色无定形粉末（甲醇），分子式C9H7NO；HR-ESI-MSm/z: 168.041 8 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 9.89 (1H, s, H-8),8.16 (1H, d,J= 7.6 Hz, H-4), 8.10 (1H, s, H-2), 7.48(1H, d,J= 8.0 Hz, H-7), 7.28 (1H, t,J= 8.0 Hz, H-6),7.24 (1H, t,J= 7.6 Hz, H-5)；13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ: 187.4 (C-8), 139.7 (C-2), 138.9 (C-7a),125.7 (C-3a), 125.0 (C-4), 123.6 (C-6), 122.4 (C-5),120.1 (C-3), 113.1 (C-7)。以上数据与文献报道的基本一致[33]，故鉴定化合物36为3-吲哚甲醛。

化合物37：白色无定形粉末（甲醇），分子式C9H11NO2；HR-ESI-MSm/z: 188.068 2 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.31～7.36 (4H, m,H-1, 2, 4, 5), 7.28 (1H, t,J= 7.1 Hz, H-3), 3.78 (1H,dd,J= 8.9, 4.3 Hz, H-8), 3.34 (1H, overlapped, H-7a),3.00 (1H, dd,J= 14.5, 8.9 Hz, H-7b)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 173.7 (C-9), 137.3 (C-6), 130.4(C-1, 5), 130.0 (C-2, 4), 128.4 (C-3), 57.6 (C-8), 38.2(C-7)。以上数据与文献报道的基本一致[34]，故鉴定化合物37为L-苯丙氨酸。

化合物38：白色无定形粉末（甲醇），分子式C12H14N2O3；HR-ESI-MSm/z: 257.089 5 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.33 (1H, m, H-5),7.26 (1H, td,J= 7.7, 1.0 Hz, H-7), 7.07 (1H, td,J=7.7, 1.0 Hz, H-6), 6.89 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-8),3.15 (2H, m, H-11), 2.11 (2H, m, H-10), 1.83 (3H, s,H-2′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 181.7 (C-2),173.0 (C-1′), 142.7 (C-9), 132.5 (C-4), 130.6 (C-7),125.2 (C-5), 123.7 (C-6), 111.4 (C-8), 76.5 (C-3),37.9 (C-10), 35.6 (C-11), 22.4 (C-2′)。以上数据与文献报道基本一致[35]，故鉴定化合物38为bacilsubteramide A。

化合物39：白色无定形粉末（甲醇），分子式C27H28N2O4；HR-ESI-MSm/z: 467.194 0 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.71 (2H, m, H-2′,6′), 7.52 (1H, m, H-4′), 7.43 (2H, m, H-3′, 5′), 7.22～7.26 (4H, m, H-2′′′, 3′′′, 5′′′, 6′′′), 7.07～7.19 (6H, m,H-2′′～6′′, 4′′′), 4.78 (1H, dd,J= 8.4, 6.8 Hz, H-7),4.30 (1H, m, H-4), 3.97 (1H, dd,J= 11.2, 4.4 Hz,H-3a), 3.90 (1H, dd,J= 11.2, 6.0 Hz, H-3b), 3.12 (1H,dd,J= 13.6, 6.8 Hz, H-10a), 2.98 (1H, dd,J= 13.6,8.4 Hz, H-10b), 2.81 (2H, dd,J= 7.9, 6.8 Hz, H-11),2.00 (3H, s, H-1)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:173.3 (C-2), 172.6 (C-6), 169.9 (C-9), 138.9 (C-1′′),138.5 (C-1′′′), 135.3 (C-1′), 132.8 (C-4′), 130.4 (C-3′′′,5′′′), 130.3 (C-3′′, 5′′), 129.5 (C-2′′, 4′′, 6′′), 128.5(C-2′, 2′′, 6′, 6′′), 127.8 (C-3′, 5′), 127.5 (C-4′′′), 66.1(C-3), 56.6 (C-5), 51.2 (C-4), 39.0 (C-10), 38.0 (C-11),20.8 (C-1)。以上数据与文献报道基本一致[36]，故鉴定化合物39为金色酰胺醇酯。

4 体外抗炎活性

首先，通过采用MTT法，检测所得化合物对RAW264.7细胞的细胞毒活性，发现在浓度为1～50 μmol/L时，各化合物吸光度（A）值与空白组相比并无统计学意义（P＞0.05），所测化合物对RAW264.7细胞均无细胞毒性作用。

根据细胞毒性结果，采用Griess法[5]，检测所得化合物对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞的NO生成的影响，取对数生长期的RAW264.7细胞，制备成密度为1×105个/mL的单细胞悬液，以每孔100 μL接种于96孔板中，每组3个复孔，于培养箱中培养过夜（37 ℃、5% CO2）。待细胞完全贴壁后，弃去培养基，分别给予各实验组以LPS及药物处理，实验分为对照组（不含药物细胞培养基）、给药组（含有终浓度为5、10、20、30、40、50 μmol/L化合物的细胞培养基）、阳性药N-monomethyl-Larginine（L-NMMA）组（含有阳性L-NMMA的细胞培养基）、LPS组（含有LPS的细胞培养基）。培养24 h后，取上清100 μL转至另一干净96孔板中，分别加入50 μL Griess试剂A液和B液（A液：称取0.5 g对氨基苯磺酸，溶于150 mL 10%稀醋酸中；B液：称取0.1 gN-α-萘乙二胺，溶于20 mL纯净水中，再用10%稀醋酸稀释至150 mL），避光显色30 min，于酶标仪570 nm下检测各孔A值。计算其抑制率。

抑制率＝(ALPS－A药物)/(ALPS－A对照)

结果（表1）显示，化合物3、5、8～11、13～15、17、18、21～27、35、36、39对LPS诱导的RAW264.7细胞的NO分泌展现出了较为显著的抑制作用。

表1 化合物1～39对LPS刺激RAW264.7细胞NO生成的抑制率 (±s , n=3)Table 1 NO inhibition of compounds 1—39 on LPS-induced RAW264.7 (±s , n=3)

表1 化合物1～39对LPS刺激RAW264.7细胞NO生成的抑制率 (±s , n=3)Table 1 NO inhibition of compounds 1—39 on LPS-induced RAW264.7 (±s , n=3)

化合物 IC50/(μmol·L-1) 化合物 IC50/(μmol·L-1) 化合物 IC50/(μmol·L-1)L-NMMA 14.77±1.50 14 21.38±0.71 28 ＞50 1 ＞50 15 21.19±0.64 29 ＞50 2 ＞50 16 ＞100 30 ＞50 3 42.89±2.35 17 25.57±1.95 31 ＞50 4 ＞50 18 28.33±1.29 32 ＞50 5 39.11±3.58 19 ＞50 33 ＞50 6 ＞50 20 ＞50 34 ＞50 7 ＞50 21 41.08±0.59 35 23.39±2.45 8 32.31±4.23 22 37.07±1.76 36 41.47±2.96 9 39.68±2.86 23 24.68±1.90 37 ＞50 10 42.08±3.98 24 41.00±1.47 38 ＞100 11 38.67±1.59 25 42.38±2.89 39 23.79±1.72 12 ＞100 26 42.60±1.88 13 42.89±1.52 27 37.15±1.61

5 讨论

洋金花叶中含有丰富的黄酮类和生物碱类成分，且其中有23个化合物首次从茄科中分离得到，10个化合物首次从曼陀罗属中分离得到。通过对黄酮类和生物碱类成分的生物活性进行测定后，发现黄酮类和生物碱类都具有一定的抗炎活性，且黄酮类化合物（1～20）的抗炎活性强于生物碱类（21～39），其中黄酮类化合物的黄酮醇苷类化合物（3～18）较其苷元类（1、2、19、20）的抗炎活性强；连接2个糖的黄酮苷（9、10、15、17）较连接1个糖的黄酮苷（3～8、11～13）活性强，可推测黄酮类化合物的抗炎活性与糖的个数相关。当然，由于样本量较少，该结论还需进一步证实。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突