圈养条件下古巴火烈鸟血液生理生化指标的测定

邓丽玲，陈 莎，李雨芮，汪波瀚，程先武，熊恒庆，吴 磊，郭玉琦

（武汉市动物园管理处，湖北 武汉 43000）

古巴火烈鸟（Phoenicopterus rubber）属于鸟纲（Aves）、红鹳科（Phoenicopteridae），红鹳属（Phoenicopterus），分布于地中海沿岸，栖息于温热带盐湖水滨，浅滩，以小鱼、小虾、昆虫、藻类等为食，性格温和，机警，善游泳，是动物园中最受欢迎的野生鸟类之一，也是动物园兽医护理的重要组成部分。

生理生化活动是生命体的基本过程，动物血液学和临床生物化学参数是动物的基本资料，在疾病诊断和治疗过程中具有相当大的潜在价值，特别是鸟类。目前，国内学者对古巴火烈鸟的研究主要在人工育雏、人工饲养管理、临床病例分析，但对古巴火烈鸟的血液生理生化的研究暂未见报道。国外学者V.I.Peinado等对不同品种的火烈鸟部分生理生化值进行了研究，HAWKEY等对不同年龄段的火烈鸟的部分生理生化值进行了分析，PUERTA,M.L等报道了智利火烈鸟部分血液生理生化值。本研究以武汉动物园圈养的42只古巴火烈鸟为研究对象，测定了26项生理生化指标并进行了分析，为古巴火烈鸟的饲养管理、疾病防治等研究提供基础性数据。

1 材料与方法

1.1 研究对象

所有研究对象均为成年古巴火烈鸟，年龄在15岁左右，无疾病临床症状。体重1.47～3.1kg。

1.2 饲养条件

饲养古巴火烈鸟的小岛为开放系统，笼舍由内室和室外运动场构成，自然光照，自由饮水，定时定量饲喂。动物饲料为特定的古巴火烈鸟饲料，由玉米、黄豆、麸皮、胡萝卜，番茄，洋葱，虾皮，鸡蛋，肉鸡商品料，小黄鱼构成。

1.3 试验器材及试剂

莱卡光学显微镜、watson 177-112C细胞计数板、diff-quick染液，0.01%甲苯胺蓝，瑞氏染色液，病理级载玻片、目镜测微尺、毛细管离心机，xk-2型血红蛋白仪、天津微纳芯PointcareV全自动生化仪及配套生化试剂盘。

1.4 样品采集

2019年4月、2019年10月、2020年10月，动物进食前，人工保定，在同一时间（9～11时）从跖骨中静脉采血2～3mL，分别用EDTA管和肝素管保存血样。EDTA管血样用于血常规检测，肝素管血样用于生化指标检测。血涂片必须在采血现场制作，自然风干。

1.5 试验方法

1.5.1 红细胞总数

（RBC,个×1012/L）、白细胞总数 血样稀释后，采用watson 177-112C细胞计数板计数。

1.5.2 血细胞大小测量

血涂片染色后随机选取50个细胞，用显微测微尺进行测量。

1.5.3 血红蛋白值（HB，G/L）测定 用xk-2型血红蛋白仪进行测定。

1.5.4 红细胞压积（PCV）测定

75mm毛细管，注入40μL血液，以口腔红蜡封口，放入毛细离心机，封口的一头朝外，1500R/min，离心2min。红细胞比容=血细胞高度/（红细胞+血浆高度）×100%。

1.5.5 白细胞分类计数

血涂片染色后高倍镜下连续随机观察100个白细胞，进行分类计数。

1.5.6 生化指标的测定

样品采集后2h内进行生化指标（TP、ALB、GLO、A/G、GLU、UA、AST、CK、K+、Na+、Na+/K+、Cl-、CA、P）检测，该检测由天津微纳芯PointcareV全自动生化仪及配套生化试剂盘完成。

2 数据统计及分析方法

测定的指标均按种属、性别进行分组分析。试验数据用EXCEL和SASS统计学软件进行生物学统计，内容包括样本平均值X、样本标准差SD以及独立样本T检验。样本均值X，反映了样本的整体情况；样本标准差SD，反映样本偏离平均值X的情况；X+/-SD反映样本的取值范围。分析比较两个独立样本的差异时，利用统计学独立样本均值方程的T检验，测出P=sig（双侧）值，当P

3 实验结果

3.1 古巴火烈鸟血液形态学

3.1.1 红细胞（red blood cell）

9～15μm，具有明显的特异性，卵圆细胞，细胞核椭圆形，胞浆染色均匀。

3.1.2 多染性红细胞

6～10μm椭圆形，胞浆蓝色，核常成块状，染色不均，紫蓝色。

3.1.3 嗜异性粒细胞（heterophilic granulocyte）

9～15μm不规则圆形及类圆形，胞质淡染，充满杆状或纺锤状结晶颗粒，杆状核染色不均，轮廓不清，分叶核染色较细腻，紫红色，常分2叶。

3.1.4 淋巴细胞

5～9μm圆形或类圆形，胞质淡蓝色，细胞核圆形，与红细胞紧密接触后常被观察到变形。

3.1.5 嗜酸性粒细胞（eosinophil）7～11μm圆形，胞质蓝灰色，内含圆形嗜酸性颗粒，颗粒有折光性，胞核常分2叶，颜色紫红带蓝。

3.1.6 单核细胞（monocyte）10～15μm，圆形细胞，胞质丰富，稍不透明有流动感，淡灰蓝色，胞核呈肾形、卵圆形、马蹄形或不规则形。

3.1.7 嗜碱性粒细胞（basophil）7～11μm，不规则形，胞浆丰富，胞核不规则，染色较粗糙，内有染色深的嗜碱性颗粒。

3.1.8 凝血细胞（thrombocyte）

4～7μm，椭圆形，胞浆淡蓝灰色，胞核紫红色。

3.2 古巴火烈鸟血液生理指标测定结果

42只成年古巴火烈鸟17项血液生理指标测定结果（见表1），可以看出，成年古巴火烈鸟的雌雄生理指标数值比较接近，经统计检验，差异均不显著（P>0.05）。

表1 圈养条件下古巴火烈鸟血液生理指标测定结果（X±SD）

3.3 圈养成年古巴火烈鸟血液生化指标测定结果

42只圈养成年古巴火烈鸟项血液生化指标测定结果（见表2），可以看出，成年古巴火烈鸟的雌雄生化指标数值存在一定差异，但差异不显著，均未通过统计学P值检验（P>0.05）。

表2 成年火烈鸟血液生化指标测定结果（X±SD）

4 讨论与分析

4.1 古巴火烈鸟生理指标分析

本次实验所获得的圈养条件下古巴火烈鸟的生理指标雌雄之间存在差异，但无显著差异。红细胞总数及血红蛋白值雌性指标略高于雄性，白细胞总数雄性略高于雌性。与国外学者V.I.Peinado等火烈鸟的研究报道情况相比，血红蛋白值、红细胞压积、红细胞总数、异嗜性粒细胞总数、嗜酸性粒细胞偏低，白细胞总数、淋巴细胞总数、单核细胞总数及嗜碱性粒细胞总数则略高，但都在鸟类血液生理指标正常参考范围之内。

4.2 古巴火烈鸟生化指标分析

本次实验所获得的圈养条件下古巴火烈鸟的生化指标雌雄之间存在差异，但无显著差异。尿酸、谷草转氨酶雌性指标高于雄性，总蛋白、白蛋白、球蛋白雄性指标高于雌性，其余指标基本一致。

5 小结与讨论

鸟类的红细胞属有核红细胞，大部分的血液分析仪都无法进行分析，流式细胞仪虽然可以分析出来，但机器过于昂贵。所以尽管这项研究的大部分血液生理指标数据都是作者根据人工计数方法计算出来，但在临床上也有一定的参考意义。本实验所测得关于圈养条件下古巴火烈鸟的部分血液生理生化数值与野生古巴火烈鸟测定的情况是否一致，以及在不同时期、不同地域、不同变化规律下表现如何等等，均有待进一步研究。理想情况下，每个实验室都应该根据自己的临床需要建立一套参考范围，尤其是当参考数据是通过不同的实验室技术获得的，这样有助于解释动物由于环境、温度和其他因素所造成的区别。此次实验结果仅供参考。