Nupr1、HE4及AFP表达与卵巢癌病理参数、预后生存的关系

陈燕萍 陈婧 洪丽玲 陈慧

作者单位：中国人民解放军联勤保障部队第九○九医院妇产科，福建，漳州363000

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，近年来随着研究的深入，卵巢恶性肿瘤的基础研究和临床诊治方面均取得很大的进展，但其5年生存率仍未见明显提高［1］。肿瘤的转移和复发在卵巢癌发展中起着至关重要的作用。核蛋白1（nuclear protein 1，Nupr1）是一种高碱性、多功能的小分子蛋白质，参与促进细胞生长和再生的应激反应，多项研究均检测出其在恶性肿瘤患者中存在高表达现象［2］。人附睾蛋白4（human epidiymis protein 4，HE4）和胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）作为常见的肿瘤相关标志物，在卵巢癌的诊治和预后生存评估中的作用引发热议［3］。本研究就Nupr1、HE4 及AFP 表达与卵巢癌病理参数、预后生存生存的关系进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月至2018年12月本院收治的90例卵巢癌和80 例卵巢良性病变患者，分别作为卵巢癌组和良性病变组。纳入标准：①卵巢癌组满足卵巢癌诊疗标准［4］；②良性病变组满足卵巢良性病变诊疗标准［5］；③临床及随访资料完整者。排除标准：①伴有严重的免疫系统疾患、血液循环系统障碍以及结缔组织疾病者；②既往存在生殖系统手术史者；③入组前存在子宫放化疗史者。两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），见表1。本研究经医院伦理委员会批准，所有研究对象均知情同意。

表1 两组一般资料比较（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

表1 两组一般资料比较（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

组别卵巢癌组良性病变组t 值P 值n 90 80--平均年龄（岁）54.16±4.25 54.30±4.33 0.212 0.832体质指数（kg/㎡）22.10±2.54 22.16±2.55 0.153 0.878孕次（次）2.25±1.03 2.28±1.01 0.191 0.849产次（次）1.57±0.49 1.59±0.41 0.287 0.775

1.2 检测方法

1.2.1 Nupr1 蛋白检测

Nupr1 蛋白检测试剂盒购自北京中杉生物技术公司，操作严格按照试剂盒说明书进行。Nupr1 蛋白在乳腺癌中显示胞浆、胞核着棕黄色颗粒；采用Volm 双评分法进行判定，在染色均匀的肿瘤区，选取5 个高倍镜视野（×400）：按阳性细胞百分率（A 值）评分：1 分，2 分，3 分；按染色强度（B 值）评分：不着色为0 分，浅棕黄色为1 分，棕黄色为2 分，棕褐色为3分。综合染色阳性细胞数与染色强度判断结果：阴性（-）：0 分，弱阳性（+）：1～2 分，中度阳性（++）：3～4分，强阳性（+++）：5～6 分；两种计分的乘积为每例的加权分数，加权分数为0为阴性，其余均为阳性［5］。

1.2.2 HE4 及AFP 检测

采用电化学发光法检测，仪器选择Elec⁃sys2010 罗氏自动电化学发光分析仪，试剂盒购自上海罗氏诊断产品有限公司，严格按照说明书进行操作。血清HE4 阳性标准为>140 pmol/mL，AFP阳性标准为>55 U/L［6⁃7］。

1.3 随访方法

所有卵巢癌病例主要是住院或门诊复查，小部分采用电话方式随访观察。随访时间为2年，随访截止于死亡或到2020年12月31日。

1.4 统计学分析

采用SPSS 18.0 软件进行统计分析，计量资料以（）表示，采用t检验；计数资料以n（%）表示，采用χ2检验，影响卵巢癌患者预后生存的相关因素采用非条件单因素和多因素Logistic 回归模型分析，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组Nupr1、HE4 及AFP 表达比较

卵巢癌组Nupr1、HE4及AFP阳性表达率均高于良性病变组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 2 组Nupr1、HE4 及AFP 表达比较［n（%）］Table 2 Comparison of expression of nupr1，HE4 and AFP in two groups［n（%）］

2.2 不同临床病理特征患者Nupr1、HE4 及AFP表达情况

FIGO 分期：Ⅲ+Ⅳ期、分化程度：低分化者Nupr1、HE4 及AFP 阳性表达率均高于FIGO 分期：Ⅰ+Ⅱ期、分化程度：中高分化者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

表3 不同临床病理特征患者Nupr1、HE4 及AFP 表达情况［n（%）］Table 3 expression of nupr1，HE4 and AFP in patients with different clinicopathological characteristics［n（%）］

2.3 96 例卵巢癌患者预后生存情况

截至随访2年结束，90 例卵巢癌患者死亡51例，存活39 例，存活率为43.33%。

2.4 影响卵巢癌患者预后生存单因素分析

经非条件单因素Logistic 回归模型分析，生存组与死亡组年龄、病理类型、有无腹水者比较差异无统计学意义（P>0.05），两组FIGO 分期、组织分化程度、淋巴转移情况及Nupr1、HE4 和AFP 阳性表达比较差具有统计学意义（P<0.05）。见表4。

表4 影响卵巢癌患者预后生存单因素分析［n（%）］Table 4 single factor analysis on prognosis of patients with ovarian cancer［n（%）］

2.5 影响卵巢癌患者预后生存多因素分析

经非条件多因素Logistic 回归模型分析，存在淋巴转移、Nupr1、HE4 和AFP 阳性为影响卵巢患者预后的独立危险因素（P<0.05）。见表5。

表5 影响卵巢癌患者预后生存多因素分析Table 5 multivariate analysis of prognostic factors in patients with ovarian cancer

3 讨论

中国最新卵巢癌发病与死亡数据分析显示，卵巢癌发病率约为6.47/10 万，死亡率约为2.74/10万［8］。本研究中90 例卵巢癌患者截止随访2年结束，生存率仅为43.33%，如何提高卵巢癌患者生存时间已成为临床关注焦点。流行病学研究表明，妇科炎症、多囊卵巢综合征和子宫内膜异位症是卵巢癌发生的危险因素［9］。

Nupr1 为一种广泛分布于体内的应激诱导蛋白，具有转录活性，可通过参与不同的胞内信号途径发挥不同的功能，并且已有大量研究证实其在多种肿瘤的发生、发展和转移过程起重要作用［10］。不同类型的恶性肿瘤细胞，Nupr1 调控细胞增殖能力有所不同。Patricia 等［11］研究发现，Nupr1 可以在人类乳腺癌发展的早期发挥促进肿瘤生长的作用，且与乳腺癌转移及预后生存不良相关，这提示Nupr1可能是促进肿瘤细胞向远处转移生长的关键蛋白。本研究结果提示Nupr1 在卵巢癌中具有促肿瘤作用，其可能是肿瘤治疗的潜在靶点。

HE4 是B7 家族成员，是一种与附睾和生殖特异度相关的蛋白，也是近年发现的新型卵巢癌标志物［12］。一般情况下，血清HE4 在正常成人中的表达水平较低，恶性肿瘤由于基因转录调控发生异常，沉默基因异常活跃，导致早期沉默的HE4基因开始转录和翻译，表现为其表达状态的异常［13］。AFP 是胚胎时期由卵黄囊产生的一种特殊糖蛋白，是胎儿血清最常见的组成成分。当卵巢癌发生时，AFP基因被肿瘤细胞激活，血清内AFP 浓度升高，其体内水平含量的高低与肿瘤生物学特性、分化程度及病情的发展程度均具有一定的相关性。有关学者认为，AFP 可作为诊断卵巢癌主要的特异性生化指标。本研究结果Logistic 回归模型分析提示Nupr1、HE4 和AFP 在卵巢癌中过表达可能参与癌细胞转移和侵袭，促进卵巢癌进展。

综上所述，Nupr1、HE4 及AFP 在卵巢癌患者中呈高表达状态，三者异常表达与患者临床病理特征及预后生存有密切关系，可作为预测患者预后生存的有效指标。