血清miR-181b在儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征中的作用及意义

宣妙燕 郁峰 黄秋玲 蔡尧梁

[摘要] 目的 探討血清miR-181b在儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）中的作用及意义。 方法 选取2018年1—12月湖州市中心医院收治的OSAHS患儿60例，经多导睡眠监测仪监测，按照病情分为轻度OSAHS组与中重度OSAHS组，每组各30例。选取同一时期来湖州市中心医院进行健康体检的无OSAHS症状患儿30例为对照组。对受试者进行Achenbach儿童行为量表（CBCL）检测、韦氏儿童智力量表（WWISC）检测，以及血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、S100β、miR-181b水平检测。 结果 轻度、中重度OSAHS组CBCL评分，NSE、S100β、miR-181b水平显著高于对照组;中重度OSAHS组CBCL评分、NSE、S100β、miR-181b水平显著高于轻度OSAHS组，WISC显著低于轻度OSAHS组（P<0.05）。OSAHS患者血清miR-181b水平与NSE、S100β水平、CBCL评分均呈显著正相关（P<0.05），与WISC呈显著负相关（P<0.05）。 结论 通过对血清中的miR-181b水平进行检测，能够对OSAHS患儿认知行为障碍的程度、脑损伤的程度进行早期的筛查，提高诊断水平。

[关键词] 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征;认知行为障碍;脑损伤;miR-181b

[中图分类号] R563.9          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2021）09-0005-05

The role and significance of serum miR-181b in children with obstructive sleep apnea- hypopnea syndrome

XUAN Miaoyan   YU Feng   HUANG Qiuling   CAI Yaoliang

Department of Pediatrics， Huzhou Central Hospital in Zhejiang Province， Affiliated Hospital of Huzhou University， Huzhou   313000， China

[Abstract] Objective To explore the role and significance of serum miR-181b in children with obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome（OSAHS）. Methods Sixty children with OSAHS admitted to Huzhou Central Hospital from January to December 2018 were selected as the subjects. They were monitored by polysomnography and divided into mild OSAHS group and moderate-severe OSAHS group according to their condition， with 30 cases in each group. Thirty children with no OSAHS symptoms who came to Huzhou Central Hospital for physical examination during the same period were selected as the control group. All subjects were tested with achenbach child behavior checklist（CBCL）， wechsler intelligence scale for children （WISC）， serum neuron-specific enolase（NSE）， S100β， and miR-181b level. Results The CBCL scores， NSE， S100β， and miR-181b levels of the mild and moderate-severe OSAHS groups were significantly higher than those of the control group. The CBCL scores， NSE， S100β， and miR-181b levels of the moderate-to-severe OSAHS group were significantly higher than those of the mild OSAHS group. WISC of the moderate-to-severe OSAHS group was significantly lower than that of the mild OSAHS group（P<0.05）. Serum miR-181b levels in OSAHS patients were significantly positively correlated with NSE， S100β levels， and CBCL scores（P<0.05）， and significantly negatively correlated with WISC（P<0.05）. Conclusion By detecting the level of miR-181b in the serum， early screening of the degree of cognitive behavioral impairment and the degree of brain damage in children with OSAHS can be carried out to improve the level of diagnosis.

[Key words] Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome; Cognitive behavior disorder; Brain injury; miR-181b

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome，OSAHS）是由于各种原因导致的上呼吸道部分或全部阻塞，从而扰乱睡眠过程中正常通气过程和睡眠结构的疾病[1]。OSAHS的发生不仅影响睡眠质量，还与高血压、心血管疾病等疾病的发生发展密切相关，影响患者的健康與生活质量，据统计，OSAHS在儿童中的患病率达1.2%～5.7%[2]。儿童的身体结构与机能与成人存在较大差异，OSAHS可影响患儿身体及智力发育[3]。目前，对OSAHS患儿进行早期筛查，并制定个体化的治疗和管理方案已成为该领域研究的热点。近年来相关血清生物标志物的表达与OSAHS关系成为研究热点。微小核糖核酸（microRNA，miRNA）表达异常参与多种脑疾病的发病过程[4]，本研究分析血清miR-181b与OSAHS儿童脑损伤、认知行为障碍的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018年1—12月所有因打鼾、张口呼吸和呼吸困难等来本院儿科及耳鼻喉科门诊就诊的OSAHS患儿60例为研究对象。OSAHS诊断标准：符合中华医学会耳鼻咽喉科分会2007年发表的儿童OSAHS诊疗指南草案中OSAHS的诊断标准[5]。

经多导睡眠监测仪监测，根据呼吸暂停低通气指数（Apnea hypopnea index，AHI）和最低血氧饱和度将60例患儿按照病情分为轻度OSAHS组与中重度OSAHS组，每组各30例。轻度OSAHS组，男16例，女14例;年龄5～12岁，平均（7.25±2.13）岁。中重度OSAHS组男17例，女13例;年龄5～12岁，平均（7.75±2.29）岁。选取同一时期来本院进行健康体检的无OSAHS症状患儿30例为对照组，男15例，女15例;年龄5～12岁，平均（7.15±2.04）岁。三组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 纳入标准及排除标准

纳入标准：①因打鼾、张口呼吸、呼吸困难等来本院科就诊的睡眠呼吸障碍（Sleep-disordered breathing，SDB）患儿;②完成整夜睡眠监测;③符合中华医学会儿童OSAHS诊疗指南草案诊断标准;④经患儿及家长知情同意。排除标准：①伴有神经系统疾病或心理疾病;②患有影响生理及智力发育的疾病;③不能配合调查。

对照组纳入标准：①被家人证实无鼾声，发育正常;②无慢性呼吸道疾病如支气管哮喘，无上气道肿物或压迫气道的疾病，鼻腔通畅;③无影响呼吸中枢的疾病，如脑干肿瘤或梗死等;④无颅内病变或任何解剖畸形;⑤经患儿和家长知情同意。排除标准：①精神、神经、代谢性脑病疾患患儿;②颅面部畸形;③中枢性呼吸暂停低通气综合征。

1.3 方法

1.3.1 儿童行为测试  采用Achenbach儿童行为量表（Child behavior checklist，CBCL）对受试者进行社会能力及行为问题测试。该量表能够评价儿童的行为及情绪问题，对活动能力、社交能力、学习能力等进行综合评估。评分越高表明各项目的行为特征越明显。

1.3.2 儿童智力测试  采用韦氏儿童智力量表（Wechsler intelligence scale for children，WISC）进行受试者的儿童智力水平测试，根据各项测试指标核算言语智商、操作智商、总智商得分。得分越高表明受试者的智力水平越高。

1.3.3 血清NSE、S100β、miR-181b水平检测  清晨空腹采集静脉血，采用酶链免疫吸附实验检测血清中神经元特异性烯醇化酶（Neuron-specific enolase，NSE）、S100β蛋白水平。采用荧光实时定量PCR法检测血清中miR-181b水平。

1.4 统计学处理

应用SPSS 22.0统计学软件分析数据，正态计量资料用（x±s）表示，两样本比较采用独立样本t检验，多个样本比较采用单因素方差分析;两两比较采用LSD法。两变量相关分析采用Pearson直线相关分析法，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组CBCL量表测试结果比较

单因素方差分析结果显示，对照组、轻度OSAHS组、中重度OSAHS组间的CBCL量表总分比较，差异有统计学意义（P<0.001）。轻度OSAHS组、中重度OSAHS组的CBCL量表总分均显著高于对照组（P<0.05）;中重度OSAHS组CBCL量表总分显著高于轻度OSAHS组（P<0.05）。进一步比较发现，对照组、轻度OSAHS组、中重度OSAHS组间的分裂样、抑郁、交往不良、社交退缩、多动、攻击性、违纪评分比较，差异有统计学意义（P<0.05）。轻度、中重度OSAHS组的分裂样、抑郁、交往不良、社交退缩、多动、攻击性、违纪评分显著高于对照组（P<0.05）。中重度OSAHS组的分裂样、抑郁、交往不良、社交退缩、多动、攻击性、违纪评分显著高于轻度OSAHS组（P<0.05）。

2.2 三组WISC测试结果比较

单因素方差分析结果显示，对照组、轻度OSAHS组、中重度OSAHS组间的言语智商、操作智商、总智商评分比较，差异有统计学意义（P<0.001）。中重度OSAHS组的言语智商、操作智商、总智商评分均显著低于对照组、轻度OSAHS组（P<0.05）。

2.3 三組血清NSE、S100β、miR-181b水平比较

单因素方差分析结果显示，对照组、轻度OSAHS组、中重度OSAHS组间的血清NSE、S100β、miR-181b水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）。轻度OSAHS组、中重度OSAHS组的血清NSE、S100β、miR-181b水平均显著高于对照组（P<0.05）。中重度OSAHS组的血清NSE、S100β、miR-181b水平显著高于轻度OSAHS组（P<0.05）。

2.4 OSAHS患者血清miR-181b水平与NSE、S100β水平相关性分析

相关性分析结果显示，OSAHS患者血清miR-181b水平与NSE、S100β水平均呈显著正相关（P<0.05）。

2.5 OSAHS患者血清miR-181b水平与CBCL、WISC测试结果相关性分析

相关性分析结果显示，OSAHS患者血清miR-181b水平与CBCL评分呈显著正相关（P<0.05），与WISC呈显著负相关（P<0.05）。

3 讨论

由于儿童的身体结构与成人存在较大差异，因此在生长发育阶段，OSAHS对机体的影响是多方面的，不仅身体发育将受到明显的影响，智力、行为也将受到不同程度的影响。研究发现，20%左右的OSAHS儿童存在学习能力受限的情况，部分儿童还伴有注意力下降、攻击等方面的问题[6]。但关于OSAHS对儿童行为及心理影响的确切机制尚无定论。行为是反映人对外部环境适应能力的重要指标，OSAHS患儿在行为上可表现为多动、攻击性、注意力不集中等[7]。有研究发现，OSAHS导致的睡眠过程中间断性缺氧，可影响人的情绪波动，甚至导致暴力倾向的发生[8]。刘雅璇[9]在研究中分析存在睡眠频繁中断症状儿童的注意力情况及多动情况，统计结果显示，存在此类症状的儿童在日常的学习生活中，注意力不集中及多动的现象明显高于其他儿童。本研究结果也显示，在CBCL量表的各个评价项目中，OSAHS患儿与正常对照组儿童之间的CBCL量表总分存在显著差异。进一步分析发现，OSAHS组儿童主要在活动能力、社交能力、学习能力等项目的评分中与正常儿童存在显著差异，且OSAHS病情越严重，相应的指标评分越高，提示OSAHS对儿童的行为发育存在较大影响。在智力水平的评价方面，本研究结果提示，轻度OSAHS组患儿在WISC测试中的言语智商、操作智商、总智商评分均与正常对照组比较，差异无统计学意义，提示轻度OSAHS发病对患儿的智力水平影响不大。中重度OSAHS组患儿在WISC测试中，其言语智商、操作智商、总智商评分均显著低于对照组和轻度OSAHS组患儿，提示中重度OSAHS发病对于儿童的智力水平存在显著影响。

NSE、S100β蛋白是公认的脑损伤外周血标志物[10]。NSE是一种特异性蛋白质，存在于神经元和神经内分泌细胞中，当脑损伤发生时，NSE可从神经元、神经内分泌细胞中溢出，释放进入外周血液和脑脊液中[11]。S100β蛋白为存在于神经组织中的一种钙结合蛋白，当脑损伤发生时，血中S100β蛋白水平显著升高[12]。研究发现[13]，OSAHS患者存在记忆力下降以及血中NSE、S100β蛋白水平升高的现象，这可能与夜间低氧血症的发生有关，而NSE、S100β蛋白水平升高可能是导致脑损害和记忆力下降的主要机制之一。本研究结果也显示，OSAHS患儿的血清NSE、S100β蛋白水平均显著高于对照组，说明OSAHS患儿可能存在一定程度的脑损害情况。进一步比较显示，中重度OSAHS组的血清NSE、S100β水平显著高于轻度OSAHS组，说明OSAHS病情越严重，脑损伤的程度越重。

目前，对OSAHS病理机制的研究结果表明，其发病过程是一种慢性炎症过程，经证实多种miRNA在炎症反应的过程中发挥重要作用[14-16]。miRNA是一类由20～24个核苷酸组成的内源性非编码单链RNA，在大脑发育、神经元分化等过程中发挥重要的生物学作用。miRNA的异常表达与多种神经系统疾病的发生发展密切相关，在缺血缺氧性脑损伤的发生机制中，也存在特定的miRNA表达异常的现象，这使miRNA作为标记物评估OSAHS的脑损伤程度成为可能[17]。经证实，miR-181b的过表达能够对血管壁损伤的信号通路发挥明显的调节作用，从而降低炎症反应发生的程度[18-20]。本研究中，OSAHS的病情越重，血清中miR-181b水平越高，分析可能是由于miR-181b与OSAHS的炎症反应调控机制密切相关。相关性分析结果也显示，OSAHS患者血清miR-181b水平与NSE、S100β水平均呈显著正相关（P<0.05），与CBCL评分呈显著正相关（P<0.05），与WISC呈显著负相关（P<0.05）。说明通过对血清中的miR-181b水平进行检测，能够对OSAHS患儿认知行为障碍的程度、脑损伤的程度进行早期的筛查，提高诊断水平。

在未来的研究中，将进一步收集儿童OSAHS病例资料，对患儿进行长期随访，定期监测认知行为改变，适时进行脑损伤标志物相关检测，以期发现更多助于OSAHS患儿脑损伤改变的筛查指标。

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（收稿日期：2020-08-15）