血清血小板反应蛋白2在结直肠癌早期诊断中的应用价值研究*

邹瑟音，杨志勇，曹东林，徐金洪

1.广东省第二人民医院检验医学部，广东广州 510000；2.广东医科大学，广东东莞 523000

结肠直肠癌是全球诊断的第三大癌症，也是癌症相关致死的重要原因之一，在我国的发病率和致死率分别居第四位和第五位，且发病率出现逐年升高和年轻化的趋势［1-2］。如果能被早期发现早期治疗，很多患者是可以治愈的，遗憾的是大部分的患者直到晚期出现恶性增值、广泛浸润、淋巴结和远处转移才能被准确诊断，因此结直肠癌的早期诊断对提高患者的生存率和治愈率具有重要的价值。癌胚抗原（CEA）是消化道恶性肿瘤应用较为广泛的标志物，无显著脏器特异性，部分直肠恶性肿瘤患者未能被检出，但某些非癌性因素如糖尿病、结肠炎、肝炎等因素也会导致CEA轻度升高，会存在一定的假阳性率，因此敏感度和特异度都远不能满足临床的需求。血小板反应蛋白2（Thrombospondins，THBS-2）是一种具有多种生物学功能的糖蛋白，在肿瘤早期诊断及预后监测中受到越来越多的关注［3-6］，本研究对健康对照组及结直肠癌患者进行血清THBS-2水平检测，并与常用标志物CEA进行对比分析，评价血清THBS-2检测诊断结直肠恶性肿瘤的临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

研究对象来源于2019年1月—2019年12月在广东省第二人民医院肛肠科就诊及住院的患者。所有患者均行肛门指诊及结直肠镜检查，发现异常者行组织病理学及影像学检查，按照中华医学会消化病学分会《中国结直肠癌预防共识意见》［7］及《中国结直肠癌诊疗规范（2017版）》［8］制定诊断依据，共筛选出23例患者。另外以同一时间段的34例健康体检人群作为对照组。

1.2 血清标志物检测

采集健康对照组及患者治疗前的静脉血3 ml，3 000 rpm离心5分钟，2 h内进行血清THBS-2和CEA检测，其中THBS-2采用ELISA法检测，严格按照试剂盒说明书进行操作，CEA采用罗氏E601电化学发光法进行检测，正常参考范围为0～6.5 ng/ml。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差表示，两组间比较采用t检验;通过ROC曲线来确定血清THBS-2检测诊断结直肠癌的灵敏度和特异度，并通过计算约登指数（Youden index）来确定THBS-2的cutoff值；两种检验方法的差别采用卡方检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 THBS-2检测结果

正常对照组和患者组血清THBS-2检测结果见图1，健康对照组血清中THBS-2的平均水平为（37.66±12.91）ng/ml，结直肠癌患者组的平均水平为（6.59±18.58）ng/ml，（P＜0.001），说明与健康对照组相比，绝大多数的结直肠癌患者血清中的THBS-2水平明显降低。血清THBS-2的ROC曲线如图2所示，曲线下面积AUC为0.934，通过计算约登指数来确定鉴别正常与患者的最佳cutoff值为17.495 ng/ml，此时血清THBS-2水平诊断结直肠癌的灵敏度为87%，特异度为100%。

图1 结肠癌患者和正常对照组血清THBS-2水平.

图2 血清THBS-2的ROC曲线

2.2 CEA和THBS-2检测结果比较

血清CEA和THBS-2检测23例结直肠癌患者的结果比较如表1所示，血清THBS-2检测出的阳性患者明显高于血清CEA的检测（P＜0.001），说明血清THBS-2水平检测在早期结直肠癌患者的鉴别诊断上更优于CEA。

表1 23例结直肠癌患者THBS-2检测与CEA检测结果比较

3 讨论

THBS-2是血小板反应蛋白家族的一员，因为在结构上拥有4个蛋白结合区，如促血管生成、细胞转移、增殖、促凋亡等，也有研究成果发现THBS2是一种恶性肿瘤相关血管生成和肿瘤侵袭性的负调节因子［9，10］，在各种肿瘤中的表达水平也不尽相同，如在宫颈癌、胃癌、卵巢癌等呈低水平表达，而在肝癌、胰腺导管癌、前列腺癌、口腔鳞癌等则呈高水平表达［11］，但不管是呈低水平表达还是高水平表达，都与对照组有显著性差异，因而使THBS-2成为一个新的、在肿瘤早期诊断及预后监测中非常具有应用前景的标志物。

在本研究中，结肠癌患者的血清THBS-2水平远远低于健康对照组，具有统计学意义，说明该类患者与卵巢癌等肿瘤患者一样血清中THBS-2呈低水平表达，而Wang等研究显示与相邻的正常组织相比，结直肠癌组织中THBS-2的表达水平明显升高，并与肿瘤分级、晚期浸润深度及淋巴结转移呈正相关，而与患者预后呈负相关［6］。与Wang等的研究结果不太一致，其可能原因是检测THBS-2水平的标本类型不一样，Wang等检测的是肿瘤组织，而本研究检测的是肿瘤患者的血清标本，此外Wang等以肿瘤相邻的正常组织作为对照，而本研究以健康人群作为对照，血清标本比组织标本更容易获取，对患者的创伤性相对较小，也更易于进行批量标本的获取和检测，因此血清标本比组织标本更具有临床实用性。

Hsuan-Yu Peng等研究结果证明血清THBS-2是胰腺导管癌的独立预测标志物，可用于高度特异诊断胰腺导管癌，在鉴别患者组和高风险对照组时，保证100%特异度的条件下，诊断灵敏度达仍达到55.9%［5］。本研究结果显示血清THBS-2诊断结直肠癌的ROC曲线下面积为0.934，说明通过检测血清中THBS-2的水平来鉴别诊断正常对照人群与结直肠癌患者的准确性较高，在保证特异度为100%的情况下，灵敏度仍能高达87%，而临床广泛使用的CEA在同样保证100%特异度的条件下，灵敏度不到50%，两者相比，血清THBS-2检测比CEA具有更明显的优势。

本研究结果显示血清THBS-2水平检测对于结直肠癌的早期诊断具有非常重要的临床应用价值，若能建立实验室正常参考范围，并对结直肠癌诊断设立cutoff值，结合临床症状，将有助于临床对结直肠癌患者进行早期诊断及鉴别诊断。