益肾止血颗粒对Dextran 诱发大鼠肠系膜急性微循环障碍的影响

丁云录，刘艳华，邹 迪，张洪宝，崔成姬，张守琳

（长春中医药大学附属医院，长春 130021）

益肾止血颗粒功效为滋阴补肾、健脾利湿、活血化瘀，是长春中医药大学附属医院肾病科张守琳教授的经验方，自1996 年应用其治疗IgA 肾病二十余年，可有效减轻患者临床症状。本研究观察益肾止血颗粒对微循环障碍模型大鼠的疗效，以期为临床用药提供药理学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料 动物，Wistar 大鼠，SPF 级，雌雄各半，体质量180～220 g，分笼饲养，室温（21±2）℃，相对湿度50%～60%，通风良好，室内12 h 明暗自动切换，自由摄食、饮水。动物合格证号：SCXK-（吉）2018-0007，购于长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。药品，益肾止血颗粒（黄芪、枸杞子、女贞子、生地黄、旱莲草、大蓟、小蓟、大黄、栀子、白茅根、槐花、益母草、牡丹皮、赤芍、当归等），长春中医药大学附属医院中医药研究中心提供。肾炎康复片，国药准字Z10940034，规格：每片0.48 g，每瓶45 片，批号：1P17419，天津同仁堂集团股份有限公司。戊巴比妥钠，规格：每瓶500 mg，批号：WXBB6772V，美国Sigma公司产品。试剂，高分子右旋糖酐（Dextran，MW,500,000），批号：17-0320-01，瑞典Pharmacia Fine Chemicals AB Uppsala。仪器，BI-2000 医学图像分析仪，成都泰盟科技有限公司产品。

1.2 方法 动物分组及给药，随机将50 只大鼠分成对照组，阳性对照组（肾炎康复片10.8 g/kg）和益肾止血颗粒13.5、6.75、3.4 g/kg 3 个剂量组。试验共分5 组，每组10 只。受试药物用蒸馏水配制成混悬液，大鼠ig 体积为10 mL/kg，对照组给予等体积的蒸馏水。模型制备及指标检测[1-4]，灌胃给药1 h 后，戊巴比妥钠40 mg/kg 腹腔注射麻醉，于腹正中线2 cm 切口，把大鼠近盲肠段肠系膜铺于盛有恒定37 ℃台氏液的有机玻璃灌流盒内，通过微循环显微镜和微图像计算机处理装置观察记录肠系膜注射Dextran 0、5、15、30、45、60 min 的微动脉流速、微静脉流速、微动脉血管口径、微静脉血管口径、毛细血管开放数和微静脉血流状态的变化，以10% Dextran 6 mL/kg 舌静脉给药，制备急性微循环障碍模型。血液流态的测定，采用血液流态的加权积分法：线流、线粒流（1、2 态）0 分；粒线流（3 态）为0.2 分；粒流（4 态）为0.8 分；粒缓流（5 态）为1.6 分；粒摆流（6 态）为4.0 分；全停滞（7 态）为6.0 分。

1.3 统计学方法 试验结果以均数±标准差（）表示，统计学处理方法采用组间t检验。

2 结果

2.1 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微动脉流速、微静脉流速的影响 注射Dextran 后5 min 血流速度开始下降，并随时间延长逐渐减慢，微动脉流速、微静脉流速变化规律一致。益肾止血颗粒高剂量组动脉、静脉血流速度在注射Dextran 后5、15、30、45、60 min时，与对照组比较均有显著差异性（P＜0.01或P＜0.05）。并且，益肾止血颗粒高剂量组动脉血流速度在注射Dextran 后45 min 时，与肾炎康复片组比较有显著差异性（P＜0.05）。益肾止血颗粒中剂量组动脉、静脉血流速度在注射Dextran 后30、45、60 min 时，与对照组比较均有显著差异性（分别为P＜0.01 或P＜0.05）。益肾止血颗粒低剂量组动脉、静脉血流速度在注射Dextran 后45、60 min 时，与对照组比较均有显著差异性（P＜0.01 或P＜0.05）。说明益肾止血颗粒高，中和低三个剂量组均能增快微血管血流速度。见表1，表2。

2.2 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微动脉口径、微静脉口径的影响 注射Dextran 后30、45、60 min，益肾止血颗粒高剂量组、中剂量组微动脉、微静脉血管口径与对照组比较均有显著差异性（P＜0.01 或P＜0.05）；注射Dextran 后45、60 min 时益肾止血颗粒低剂量组微动脉血管口径与对照组比较均有显著差异性（P＜0.05）。说明益肾止血颗粒能显著改善微血管痉挛状态。见表3，表4。

2.3 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍毛细血管开放数的影响 注射Dextran 后45、60 min，益肾止血颗粒高剂量组毛细血管开放数与对照组比较均有显著差异性（为P＜0.05）；注射Dextran 后60 min，益肾止血颗粒中剂量组、低剂量组毛细血管开放数与对照组比较均有显著差异性（P＜0.05），说明益肾止血颗粒能显著增加毛细血管开放数。见表5。

2.4 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍毛细血管内血液流态的影响 注射Dextran 5 min 后，微静脉血流有线流或线粒流转变为粒线流或粒流，红细胞聚集，血浆与血细胞分离，可见白细胞贴壁翻滚现象，并逐渐加重至60 min。各给药组出现以上现象均在注射Dextran 15 min 后。说明药物对微循环障碍时的血液流态具有改善作用。益肾止血颗粒高剂量组、中剂量组在注射Dextran 后15、30、45、60 min，可以明显改善微循环血液流态，与对照组比较均有显著差异性（P＜0.01 或P＜0.05）。益肾止血颗粒低剂量组在注射Dextran 后15、45 min，可以明显改善微循环血液流态，与对照组比较有显著差异性（P＜0.05）。说明益肾止血颗粒能明显改善血液流态。见表6。

表1 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微动脉流速的影响（，n =10） μm/s

表1 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微动脉流速的影响（，n =10） μm/s

注：与对照组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01；与肾炎康复片比较，△P ＜0.05

表2 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微静脉流速的影响（，n =10） μm/s

表2 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微静脉流速的影响（，n =10） μm/s

注：与对照组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01

表3 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微动脉口径的影响（，n =10） μm

表3 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微动脉口径的影响（，n =10） μm

注：与对照组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01

表4 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微静脉口径的影响（，n =10） μm

表4 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微静脉口径的影响（，n =10） μm

注：与对照组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01

表5 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍毛细血管开放数的影响（，n =10） 条

表5 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍毛细血管开放数的影响（，n =10） 条

注：与对照组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01

表6 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微静脉流态的影响（，n =10）

表6 益肾止血颗粒对大鼠肠系膜急性微循环障碍微静脉流态的影响（，n =10）

注：与对照组比较，# P ＜0.05，## P ＜0.01

3 讨论

益肾止血颗粒提出以脾肾亏虚为本，湿热瘀阻为标，滋阴补肾、健脾利湿、活血化瘀为治疗慢性肾炎血尿的根本治疗原则。开发中药复方新药益肾止血颗粒，可以满足临床对治疗慢性肾炎血尿的品种的需求[5-6]。益肾止血颗粒由黄芪、枸杞子、女贞子、生地黄、旱莲草、大蓟、小蓟、大黄、栀子、白茅根、槐花、益母草、牡丹皮、赤芍、当归等组方，诸药合用共奏滋阴补肾、健脾利湿，活血化瘀功效。引发慢性肾炎血尿的常见疾病有急性肾小球肾炎、慢性肾小球肾炎、隐匿性肾小球肾炎、狼疮性肾炎和紫癜性肾炎等。其中IgA 肾病是原发性肾小球疾病中呈现单纯性血尿的常见病理类型，约占40%～50%[7-8]。我国慢性肾脏病患病率为10%，原发性肾小球疾病患病率约为5%，其中IgA 肾病患病率可达到2.4%～3%[9-10]。

本实验采用舌静脉注射Dextran 造成大鼠肠系膜微循环血瘀模型的方法，观察大鼠肠系膜微动脉流速、微静脉流速、微动脉血管口径、微静脉血管口径、毛细血管开放数和微静脉血流状态，实验结果表明益肾止血颗粒可以明显地改善大鼠肠系膜微循环障碍，为深入研究益肾止血颗粒的药理学作用提供了实验依据。