吕松杰,牛志刚,丁煜恭,何志鹏,司衣提·克热木,党 乐,陈 军,史洪才,*
(1.新疆石河子大学动物科技学院,新疆 石河子832000;2.新疆畜牧科学院生物技术所,乌鲁木齐830000;3.新疆五征绿色农业发展有限公司,新疆 麦盖提县844600;4.新疆喀什地区畜牧工作站,新疆 喀什844000;5.新疆维吾尔自治区畜牧总站,乌鲁木齐830000)
多浪羊是新疆喀什地区主要的绵羊品种,具有体型大,生长速度快,肉产量高,屠宰性能良好等特点,特别是40~50 kg阶段表现出眼肌面积大、肉色鲜红、肌间脂肪含量高、多汁性好、嫩度理想等特性。多浪羊可以全年舍饲,能适应新疆南疆地区的夏季干燥炎热的环境,抗病力强,耐粗饲,能四季发情,且具有早熟性,一般公羔在6~7月龄性成熟;母羔在6~8月龄可以初次配种,多浪羊是新疆优良的地方品种[1-3]。
促卵泡素(FSH)是一种糖蛋白激素,促性腺激素释放激素(GnRH)由下丘脑释放,作用于垂体,垂体前叶的嗜碱性细胞合成和分泌[4]。与促黄体素(LH)协同促进卵泡发育,诱导排卵并将颗粒细胞转变为黄体细胞[5]。在发情前注射FSH,可以使将要退化的卵泡发育成熟,增加其排卵数[6],在绵羊生产上是常见的超数排卵药物[7]。
大群体多浪羊一般一胎产一只羔羊,平均产羔率大约为107%,繁殖率较低。影响制约着规模化养殖场的经济效益,利用外源激素对多浪羊实施同期发情处理和高效繁殖,从而可以提高繁殖效率,降低生产成本,增加养殖效益。孕酮+PMSG+PG的同期发情方法,可以达到很好的发情效果,FSH是一种超数排卵的常用药物,较小剂量的FSH可以刺激少量卵泡同时发育排卵,产较多数量的羔羊。本课题组此前曾在多浪羊上注射100 IU FSH进行过试验,产羔率达到178%,证明注射小剂量的FSH可以提高繁殖率,给养殖场带来较好的经济效益,但是根据新疆喀什地区规模化养殖场实际经济效益测算情况,产羔率达到200%以上才有一定的盈利,因此本试验在同期发情处理过程中将FSH注射剂量提高到150 IU,观察不同的注射方法对发情效果的影响,为进一步提高多浪羊繁殖效率提供科学依据。
羊用孕酮海绵栓,新西兰Inter Greaulane公司生产、注射用促卵泡素(规格为500单位),宁波市三生药业有限公司、孕马血清促性腺激素(规格为1 000单位)宁波市三生药业有限公司、氯前列烯醇(规格为5 mL)宁波市三生药业有限公司。高锰酸钾粉、酒精、生理盐水、碘酒、链霉素、青霉素、假阴道、集精杯、开膣器、输精枪、显微镜、恒温水浴锅等均为国产。
2020年5月在新疆喀什五征绿色农业发展有限公司,母羊为2~4岁健康体貌良好的纯种多浪母羊172只。种公羊为2~4岁,体型外貌良好且性欲旺盛的成年公羊;试情羊选用体力好、性欲旺盛、有配种史的公羊。
本试验采用单因素设计,选经过B超诊断未怀孕的试验羊,设为3个试验组A、B、C和1个对照组D,在阴道中埋置1个孕酮海绵栓当天记为第0 d,第9 d A、B、C组按不同的FSH注射方法进行处理。
A组上午10:00一次性注射FSH 150 IU;
B组上午10:00注射100 IU FSH,8 h后再注射50 IU FSH;
C组上午10:00注射75 IU FSH,8 h后再注射75 IU FSH;
D对照组不注射FSH。
全部4组第11 d早上10:00撤栓时,肌肉分别注射PG1 mL和PMSG 330 IU。
用试情公羊进行试情。在上午08:00和下午20:00,将试情公羊放到母羊圈各试情1次,以母羊接受爬跨后站立不动为发情标准,试情3 d,将每只羊从撤栓到发情的时间间隔记录下来。
1.5.1 假阴道法进行采精
种公羊精液采出后,先通过肉眼观察,为乳白有“云吞”状,使用显微镜进行观察,选留活力好密度高的精液。
1.5.2精液稀释配制
称取柠檬酸钠1.4 g、葡萄糖3 g,链霉素、青霉素各10万IU,在100 mL高压灭菌双蒸水中溶解,过滤使用0.22μm的滤膜。
1.5.3 精液稀释
将稀释液和精液降至室温。先将等倍稀释液加入精液中,再根据所需输精量,加大稀释倍数,本试验稀释倍数为3倍。
输精时使用阴道开张器,在发情后的12 h和24 h进行两次人工授精,将稀释后鲜精0.1 mL输入于子宫颈口内0.5~1 cm处。
应用SPSS 20.0对发情率数据进行卡方检验。
统计4个试验组6个时间点的发情母羊数,并计算撤栓后12~72 h总体的同期发情率。表1为统计结果。
表1 不同FSH处理方法对多浪羊同期发情的影响
由表1可知:A、B、C组注射FSH后的发情率分别为77.78%;80.65%;87.50%。D对照组发情率为80.36%,统计分析显示四个组之间发情率差异不显著(P>0.05);但C组发情率高于其他组。
FSH是一种对绵羊排卵有重要作用的激素,常用于羊的超数排卵,在绵羊超排试验中,白云喜等在无角道塞特超数排卵试验中,采用孕酮海绵栓+FSH+PG,递减注射FSH的方法,注射总剂量为180~310 IU,其中:235~280 IU组发情率为91%,平均回收可用胚胎为7.8个,7~8次递减注射法效果较好[8]。徐鹏举等在萨福克超数排卵试验中,采用CIDR+FSH+PG的超排方案,递减注射FSH,人工授精时注射2.5μgA3的方法,试验组发情率分别为100%和98.18%,可用胚胎数为6.56个和6.47个[9]。FSH对超排效果的报道主要是FSH总剂量、注射次数、季节和供体羊品种等方面,对发情率和可用胚胎数的比较分析试验也表明这些方面对绵羊的排卵有较大的影响。
在利用FSH提高繁殖率方面,张永固[10]等利用FSH提高滩羊繁殖效率的试验中,六个试验组设计注射剂量在30~80 IU之间,六个实验组发情率在85.7%~93.5%之间,且差异不显著,其中30~55 IU的三个试验组产羔率均为100%,70 IU组最高为136.4%。发情率与本试验平均注射150 IU FSH的发情率为87.5%相近。白丁平等在春节小尾寒羊实验中,采用PG+炔诺酮+FSH,FSH总剂量40 IU和60 IU两次平均注射的方法下,发情率分别为96.5%和94.7%[11]。上述研究表明,FSH注射总剂量30~150 IU都可以诱导发情,并且有较高的发情率。同时FSH剂量的增加可以有效的提高排卵数。
本课题组在此前使用100 IU FSH提高繁殖性能的试验中,产羔率达到了178%,但仍然不能完全达到规模舍饲养羊场扭亏为盈的产羔率期望值。因此本试验将FSH剂量提高到150 IU,并且按照不同的注射方法,观察不同组别的繁殖性能。结果发现,A组(150 IU)发情率为77.78%,B组(100 IU+50 IU)发情率为80.65%,C组(75 IU+75 IU)发情率为87.50%,对照D组发情率为80.36%,统计分析显示四个组之间的发情率差异不显著,此结果与上述两个团队的结果相同,说明不同剂量的FSH对发情率影响较小,在本实验中,C组上下午各注射75 IU的发情率最高。
综上所述,注射FSH后,统计分析显示不同注射方法对发情率没有较大的影响,本研究显示150 IU分等量两次注射后的发情率略高于其他组,后续在继续观察受胎率及产羔率的情况,最终期望能得到提高繁殖性能的FSH注射剂量及方法。