一例兔斯氏艾美尔球虫病的诊断和治疗

韩 莹

吉林农业大学动物医学院，吉林长春 130118

兔球虫病是由艾美尔科的球虫引起的一种寄生性原虫病，随着规模养殖的迅速发展，该病对我国养兔业的危害日益严重，中国是养兔大国，每年由兔球虫病造成的经济损失巨大[1]。目前，报道的感染家兔的艾美尔属球虫有17 种，其中斯氏艾美尔球虫的致病力最强、危害最大，它寄生于兔的肝胆管上皮细胞，能引起严重的肝球虫病。随着我国畜牧产业的迅速发展，家兔养殖集约化程度越来越高，兔球虫病导致家兔死亡率越来越高，给养殖户带来很大的经济损失，各种品种和不同年龄的兔都可感染，但以1 ～3 月龄的兔最易感而且病情严重，死亡率高。成年兔发病轻微，多为带虫者，成为重要的传染源[2]。

1 发病情况及临床症状

吉林省长春市净月区玉潭镇一养兔场，饲养5 000 只肉兔，其中有将近500 只40 日龄幼兔出现拉稀，精神沉郁，腹围增大，触摸有疼痛感，背毛凌乱，每日死亡20 只左右，自行到兽药店购买地克珠利药品治疗3 d，效果不明显，每日幼兔继续出现死亡现象。

2 临床检查

取病死幼兔进行剖检，发现幼兔肠系膜出血，肝脏有大量白色的结节，取粪便，采用饱和食盐水漂浮法检测卵囊，在显微镜下观察，可见大量兔斯氏艾美尔球虫卵囊，肝脏结节压片，在显微镜下观察，可见不同发育阶段的虫体和卵囊。

3 实验室检查

取病死幼兔肝脏，用剪刀剪碎肝脏，用研磨棒在研磨碗里研磨肝脏，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀，将搅拌液过300 目网筛，将滤液以4 000转的速度离心15 min，弃上清液，白色沉淀即为兔斯氏艾美耳球虫卵囊。参考康为提取基因组盒子操作说明提取基因组，提取斯氏艾美尔球虫总DNA。采用巢氏PCR 检测方法鉴定，斯氏艾美耳球虫巢氏PCR 18SrDNA 基因引物序列：Es-18S-eF TGAGAAACG GCTACCACA，Es-18S-eR GAAGTATTCAGGGCGACAA，Es-18S-iF TCGAGGTAGTGACGAGAAATA，Es-18S-iR TGACCACGACAGAAATCCA。两轮反应体系相同，反应体系：2.5 µL 的10×Buffer，2 µL 的dNTP，上游引物和下游引物各1 µL，1 µL 的样本，0.2 µL 的Taq 酶，17.3 µL 的ddH2O，总体积25 µL。两轮反应条件相同，反应条件：94 ℃2 min,94 ℃30 s，55 ℃30 s,72 ℃1 min ，72 ℃10 min ,4 ℃保存，30 个循环扩增。对两组巢氏PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳，电泳结果显示，18 SrDNA 基因组扩增出的条带片段大小约为194 bp，与目的条带大小一致，紫外灯环境中，切掉胶块的目的片段并放置在1.5 mL 的离心管中，送到吉林省库美生物科技有限公司测序，测序结果在NCBI 的BLAST 中比对序列为100%，鉴定结果为兔斯氏艾美尔球虫。

4 治疗

兔斯氏艾美耳球虫是兔球虫病中，致死率最高，且难治愈，主要以前期预防为主，治疗用磺胺氯吡嗪钠可溶性粉，在饲喂的兔粮中混入药物，每1 000 kg 饲料中添加600 g,连用5 ～10 d，休药期为28 d，不得作为饲料添加剂长期应用。虽然死亡率下降了，但是病兔一般都预后不良，生长缓慢，无经济价值和实验价值，肝脏损伤不可逆。

5 防治措施

目前防治措施主要是在饲料和饮水中加入抗球虫药来预防兔球虫病，定期检测兔场粪便，确定感染球虫的种类，不要盲目用药，也不要长期的不科学喂药，防止产生耐药虫株，加强饲养管理，定期清理粪便，饲料槽和饮水槽定期消毒，笼舍采用火焰消毒，或者用10%氨水消毒。定期对成年公兔和母兔进行球虫检测，也可以采用中药复方进行兔球虫病的预防治疗。目前还没有兔斯氏艾美尔球虫疫苗。