白屈菜碱对固始鸡雏鸡生长性能、血清抗氧化功能及免疫功能的影响

■徐 丹 吉莉莉 徐 超 唐子婷 舒 刚*

（1.四川农业大学，四川成都611130；2.成都大学肉类加工四川省重点实验室，四川成都610106）

家禽养殖业在我国畜牧业中具有高度规模化、集约化、组织化和市场化的特点。规模化养殖是把双刃剑，带来超高经济收益和养殖效益的同时动物健康也受到严重威胁。所以建立低成本、高效绿色养殖模式以保证动物与副产品的质量成为了家禽养殖业的重要任务，因此饲料添加剂成为了研究热点。近几年，为了达到控制疾病、促进生长的目的，我国饲料界滥用药物、抗生素等作为饲料添加剂，随之导致动物产生耐药性、动物性产品毒素残留超标和环境污染等问题。寻找价廉、高效、无公害和环保安全促生长绿色饲料添加剂成为了饲料界的重要任务。中药或中药提取物饲料添加剂可以达到在养殖过程预防疾病和保健的目的。

生物碱是最早被研究开发的一类植物提取物，可对机体产生广泛而强烈的生理影响。白屈菜为罂粟科白屈菜属植物白屈菜（Chelidonium majus L）的多年生草本。白屈菜全株含有多种重要化学成分，其中生物碱成分比例最高，目前报道主要有白屈菜碱、白屈菜红碱、血根碱和小檗碱等，白屈菜碱为其主要有效生物碱类物质成分之一，具有抗肿瘤、镇痛、保肝护肾、抗菌、抗病毒、抗炎、杀虫等众多药理学价值。我国多数山区及丘陵地带均有野生白屈菜，白屈菜生物碱资源丰富，开发利用前景良好。目前国内外科研人员虽然对白屈菜生物碱广泛关注并做了大量试验研究其药理作用，但未见白屈菜碱作为家禽饲料添加剂在动物营养方面的试验研究。故本试验考察了白屈菜碱对雏期蛋鸡生长性能、血清抗氧化功能及免疫性能的影响，为其实际应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用白屈菜碱（含量为40%，由北京生泰尔生物科技有限公司提供，批号：20180212）。在试验前期通过预试验确定白屈菜碱添加量为100 mg/kg 饲料。γ干扰素（IFN-γ）和白介素-2（IL-2）酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒，均购自北京索莱宝科技有限公司。

主要试验仪器包括高速冷冻离心机（赛默飞世尔有限公司）、多功能酶标仪、移液枪、恒温培养箱等。

1.2 试验动物和分组设计

试验选取200 只状态良好、体重均匀的1 日龄健康固始鸡（购自河南省信阳市三高农牧股份有限公司），随机分为2个组（空白组和白屈菜碱组），每组4个重复，每个重复25只。空白组饲喂基础饲粮；白屈菜碱组在基础日粮中按照100 mg/kg加入白屈菜碱。试验从雏鸡1日龄开始，至其28日龄结束，共计28 d。

1.3 饲养管理

饲养方式采用3 层叠层式笼养，自由饮清洁水，自由采食粉料，保持鸡舍清洁卫生和空气流通。育雏期每天8:00 和22:00 饲喂5 次逐渐过渡到每天饲喂3 次，同一组人员饲养，其他按正常饲养管理进行。

免疫程序：第7 d，新城疫传染性支气管炎二联苗，二倍量滴鼻点眼；第12 d，法氏囊多价苗，二倍量饮水；第19 d，新城疫Ⅳ系，二倍量饮水。基础日粮及营养水平见表1。

表1 基础日粮及营养成分（风干基础）

1.4 日常观察

观察并记录各试验组鸡只每日精神活动状态、采食饮水情况和粪便形态颜色，并记录病亡情况。

1.5 生长性能测定

分别于试验第1、14 d和第28 d以重复为单位对鸡只进行空腹称质量，记录试验初、末重，每天准确记录每重复雏鸡采食量，计算各重复鸡只平均日采食量、平均日增中和料重比。

平均日采食量（g）=采食量总和/试验天数

平均日增重（g）=（试验末均重-试验初均重）/试验天数

料重比=平均日采食量/平均日增重

1.6 免疫脏器指数测定

分别于试验第14 d和第28 d，每组每个重复随机选取5 只鸡，解剖并分离脾脏、法氏囊、胸腺，剥离周围脂肪后用滤纸吸干水分后称重。计算器官指数。

器官指数（g/kg）=免疫器官重（g）/体重（kg）

1.7 血清中IFN-γ含量和IL-2含量测定

分别在第14、28 d 时，每组随机抽取10 只鸡，翅静脉采血2 mL，置于无抗凝剂的采血管中，静置2 h，3 500 r/min 离心10 min，4 ℃分离血清后置于-20 ℃中保存。酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中IFN-γ和IL-2的含量。

1.8 血清抗氧化指标

分别在试验第14、28 d，每组每个重复随机选取5 只鸡，翅静脉采血1 mL，置于无抗凝剂的采血管中，静置2 h，3 000 r/min 离心10 min，分离血清，置于-20 ℃保存备用。按照试剂盒（南京建成生物工程研究所）说明书检测总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化氢酶（GSH）含量和总抗氧化能力（T-AOC）。

1.9 数据分析

试验数据利用SPSS19.0 进行方差分析，Duncan's法进行多重比较，数据以“平均数±标准差”表示，P＜0.05时有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 一般观察

整个试验过程未见鸡只出现死亡或食欲不振、精神萎靡，所有鸡只采食和饮水正常。

2.2 白屈菜碱对雏鸡生长性能的影响(见表2)

由表2可知，14 d时白屈菜碱组平均体重高于空白组，但是差异不显著（P＞0.05）；28 d 白屈菜碱组平均体重显著性高于空白组（P＜0.05）。1～14 d 及15～28 d两组平均日增重差异不显著（P＞0.05），但白屈菜碱组有增长趋势；1～28 d白屈菜碱组平均日增重显著高于空白组（P＜0.05）。1～28 d及15～28 d白屈菜碱组料重比显著低于空白组（P＜0.05）。

表2 白屈菜碱对雏鸡生长性能的影响

2.3 白屈菜碱对雏鸡免疫器官指数的影响(见表3)

由表3 可知，14 d 脾脏指数及28 d 法氏囊指数、胸腺指数两组间均无显著差异（P＞0.05），但白屈菜碱组有提高趋势。14 d白屈菜碱组法氏囊指数、胸腺指数均显著高于空白组（P＜0.05）。28 d 白屈菜碱组脾脏指数显著高于空白组（P＜0.05）。

2.4 白屈菜碱对雏鸡血清中IFN-γ含量和IL-2含量的影响(见表4)

表4 白屈菜碱对雏鸡期血清IFN-γ和IL-2的影响（pg/mL）

由表4可知，14 d及28 d白屈菜碱组血清中IL-2含量均显著性高于空白组（P＜0.05）。对于14 d及28 d血清IFN-γ含量，各组之间无显著性差异（P＞0.05），但白屈菜碱组相对较高。

2.5 白屈菜碱对雏鸡血清抗氧化指标的影响(见表5)

由表5 可知，两组血清T-SOD 含量在整个试验期间均无显著差异（P＞0.05）。28 d 白屈菜碱组血清GSH 值显著性高于空白组（P＜0.05）。14 d 及28 d白屈菜碱组血清T-AOC 含量均显著高于空白组（P＜0.05）。

表5 白屈菜碱对雏鸡血清抗氧化指标的影响(U/mL)

3 讨论

3.1 白屈菜碱对固始鸡育雏期生长性能的影响

何夏阳在研究苯并啡啶类生物碱时发现，在28日龄断奶仔猪日粮中添加血根碱和白屈菜红碱混合物能提高试验猪的饲料转化率。饶华等在猪饲料中添加血根碱，发现断奶仔猪采食量、平均日增重及饲料营养吸收消化效率都得到了显著提高。Sharma 等研究发现在火鸡饲料中添加1.5%血根碱时可提高火鸡日增重、平均日采食量，表明血根碱能提高饲料转化率。本试验结果与前人研究结果一致，所有时间段白屈菜碱组的平均体重、平均日增重都优于空白组，表明白屈菜碱能提高蛋雏鸡生长性能。有研究表明，苯并啡啶类生物碱能不可逆抑制动物胃肠道内芳香族氨基酸脱羟酶，减少芳香族氨基酸降解，提高了动物机体小肠对色氨酸、苯丙氨酸的利用效率，促进蛋白质代谢，从而促进动物生长发育，这可能是白屈菜碱促进育雏期固始鸡生长发育的机理。

3.2 白屈菜碱对固始鸡育雏期免疫器官指数的影响

近年来，我国研究人员对植物生物碱的研究取得了很多成果。生物碱是碱性含氮化合物，广泛存在于生物体内，具有生物来源广、化学结构多样、多种生物活性等特点。禽类主要的免疫器官包括胸腺、脾脏、法氏囊，对机体的免疫机能起着至关重要的作用。脾脏指数、法氏囊指数及胸腺指数是反映家禽免疫功能的重要指标，其指数升高提示器官的免疫水平提高。倪耀娣等研究发现天然生物碱甜菜碱对肉鸡免疫功能有显著的提高作用。本试验结果表明，14 d白屈菜碱组法氏囊指数、胸腺指数均显著高于空白组，28 d 白屈菜碱组脾脏指数显著高于空白组。本试验结果表明，白屈菜碱能在一定程度上提高育雏期固始鸡的免疫脏器指数，促进免疫器官生长发育。

3.3 白屈菜碱对固始鸡育雏期血液免疫指标的影响

机体血液生理指标处于不断变化却又相对恒定的状态，血液中任何有形成分的病理性改变都会影响到机体各部分健康状况。IL-2能增强T细胞的杀伤活性，在动物体内能增强抗原诱导的TC活性，甚至可以辅助诱导抗原和半抗原直接在祼鼠体内产生。IL-2可促进NK 细胞的增殖，维持NK 细胞长期生长，对原发性及转移性肿瘤，均有明显抵抗作用。本试验结果显示，14 d及28 d空白组IL-2含量均显著低于白屈菜碱组，说明白屈菜碱能提高IL-2的含量。IFN-γ具有增加抗原递呈的作用，可促进CD4+T细胞聚集于病变部位，可起到抗感染作用。本试验结果显示白屈菜碱组血清IFN-γ含量相较于空白组具有增长趋势，说明白屈菜碱具有提高机体抗感染性能的潜力，推测可能与白屈菜碱提高机体免疫力的作用相关。

3.4 白屈菜碱对固始鸡育雏期血清抗氧化指标的影响

生物机体在正常生命代谢过程中会产生氧自由基，氧自由基具有强烈的细胞杀伤力，造成一系列的毒性反应从而导致细胞功能受损。脂质过氧化产物能够使膜蛋白构象发生改变，影响膜蛋白活性，进而影响细胞的各种功能。GSH 是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，易与自由基结合，具有抗氧化作用和整合解毒作用，故能参加机体生物转化，把机体内有害的毒物转化为无害的物质，排泄出体外。本试验结果表明，28 d 时白屈菜碱组GSH 含量显著高于空白组，说明白屈菜碱能提高育雏期固始鸡血清GSH 含量，具有提高机体抗氧化功能的潜力。 T-AOC 的大小可反映机体抗氧化系统对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢强弱。本试验结果表明，14 d 时白屈菜碱组T-AOC 含量显著高于空白组，且在整个试验阶段，白屈菜碱组T-AOC 含量显著高于空白组，说明在育雏前期添加白屈菜碱有助于提高雏肉鸡抗氧化性能，从而增强鸡在育雏前期抵抗氧化应激的能力。

4 结论

在本试验条件下，白屈菜碱能在一定程度上通过提高育雏期固始鸡饲料转化率及免疫器官生长发育，调节血液相关细胞因子的分泌，改善育雏期固始鸡的免疫性能及提高育雏期固始鸡生长性能。在抗氧化性能方面，在育雏前期在日粮中添加白屈菜碱有助于增强固始鸡的抗氧能力，从而增强机体抗氧化应激机能。综上所述，白屈菜碱对育雏期固始鸡的生长、免疫及血清抗氧化性能均有积极的促进作用，相关作用机制等仍需进一步试验来深入研究。