李 倩,陈丕坤,宋 扬
(哈药集团生物疫苗有限公司,哈尔滨 150069)
新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)病又称鸭坏死性肝炎。NDRV在血清学上完全不同于之前的番鸭呼肠孤病毒,造成鸭一种以肝脏不规则坏死、出血斑/点和心肌出血为主要特征的传染性疾病[1],番鸭、半番鸭、麻鸭和北京鸭等均可发病,发病无明显季节性,发病鸭一般为3~25 日龄,鸭的日龄愈小,发病率和死亡率愈高[2]。NDRV的感染严重损害鸭的免疫器官,造成免疫抑制,导致其他传染病的继发[3]。鸭呼肠孤病毒病最先于2005 年在我国的福建、浙江和广东等地鸭群中出现和流行,后蔓延至全国,近年来由于该病的肆虐给我国养鸭业造成较大的经济损失,现地急需有效疫苗或抗体对该病进行防控。为了控制该病的发生,使用卵黄抗体做紧急预防接种有较大的实践意义。但使用卵黄抗体时,卵黄抗体在机体内的被动免疫期是决定卵黄抗体免疫程序的决定性因素。为此,本试验对哈药集团生物疫苗有限公司试制的新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体进行雏鸭接种后不同时间攻毒与抗体保护效果的相关性研究,以确定新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体在雏鸭体内的被动免疫持续期。
新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体,由哈药集团生物疫苗有限公司试制,批号分别为202001、202002、202003。
新型鸭呼肠孤病毒检验用强毒,由哈药集团生物疫苗有限公司制备、鉴定、保管和供应,批号为20202,病毒含量为107.17TCID50/0.1 mL,规格为2.0 mL·瓶-1。
1日龄健康雏鸭,购自海城市凯丹畜禽养殖专业合作社。
选取1日龄易感雏鸭40只作为抗体试验组,于颈部皮下注射卵黄抗体,1.0 mL·只-1;同时设同批次同日龄易感雏鸭各40 只作为攻毒对照组,肌肉注射生理盐水,1.0 mL·只-1;取同批次同日龄易感雏鸭10只,不注射任何药品作为健康对照组。在抗体注射后1、3、5、7 d 分别从抗体试验组和攻毒对照组雏鸭中随机抽取10 只,肌肉注射新型鸭呼肠孤病毒攻毒,0.1 mL·只-(1含106.0TCID50),各组鸭同条件下隔离饲养观察10 d。观察期结束后剖杀全部雏鸭检查肝脏和脾脏病变情况,以攻毒对照组至少80%雏鸭出现呼肠孤病毒感染导致的肝脏或脾脏有典型坏死症状为试验成立,计算抗体保护率[抗体保护率=(总数-发病数)/总数]。共计进行3 批抗体试验。
1日龄易感雏鸭注射卵黄抗体后不同时间攻击新型鸭呼肠孤病毒强毒,攻毒后观察10 d。卵黄抗体对雏鸭的攻毒保护情况见表1~2。
表1 新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体被动免疫持续期试验结果
表2 新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体被动免疫持续期试验统计结果
由表1~2 可知,3 批卵黄抗体注射的1 日龄易感雏鸭,注射后1~5 d,抗体对雏鸭的保护率为93.3%~100%;注射后7 d的攻毒保护率为53.3%;各时间点攻毒对照组鸭均90%~100%发病。
剖检抗体试验组及攻毒对照组发病雏鸭,可见肝脏和脾脏均呈典型的坏死及出血性病理变化;抗体试验组存活雏鸭剖检无病理变化;健康对照组雏鸭均100%健活,剖检无病理变化。
卵黄抗体注射动物机体后,抗体在体内能持续存在一段时间,并产生被动免疫保护作用。本试验用哈药集团生物疫苗有限公司制备的新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体注射雏鸭,并于注射后不同时间注射新型鸭呼肠孤病毒强毒,观察卵黄抗体对雏鸭的保护效果,从而确定卵黄抗体的被动免疫持续期。试验结果显示,接种抗体后1~5 d,抗体对1日龄雏鸭的攻毒保护率均在90%以上;注射后第7天的攻毒保护率为53.3%;各时间点攻毒对照组雏鸭90%~100%发病,剖检抗体试验组及攻毒对照组发病雏鸭,发现肝脏和脾脏均呈典型的坏死及出血性病理变化;抗体试验组存活雏鸭剖检无病理变化;健康对照组雏鸭均100%健活,剖检无病理变化。试验结果表明,注射卵黄抗体后5 d,抗体仍能对雏鸭产生良好地保护作用,而7 d后抗体保护作用大幅减弱。
哈药集团生物疫苗有限公司制备的新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体被动免疫保护期为5 d。