灯盏细辛注射液联合胞二磷胆碱对老年急性缺血性脑卒中患者脑血循环的影响

赵亚军，王桂侠

(1.陕西省第二人民医院神经内科；2.陕西省第二人民医院心血管介入科，陕西 西安 710005)

缺血性脑卒中为脑局部缺血性疾病，是因各种原因导致脑部血管梗死出现血液供应障碍的一种疾病，表现为脑缺血状态，同时脑神经功能也因缺血而严重受损，因此，急性缺血性脑卒中治疗应尽快调整脑血流动力学，改善缺血区域脑血循环[1]。TLR4/核因子-κB(NF-κB)信号通路在缺血性脑卒中发病过程中发挥重要作用，Song Y，等[2]学者指出，TLR4/核因子-κB(NF-κB)信号通路损伤血管内皮为致使血流量下降主要原因。胞二磷胆碱在治疗脑血管疾病中具有较大优势，可有效保护细胞膜功能，减轻血脑屏障损伤，改善微循环等[3]；灯盏细辛注射液(Erigeronbreviscapineinjection)是由一种灯盏花中提炼精制而成的中药制剂，具有活血化瘀、通络止痛之功效，可抑制血小板聚集，降低血黏度，促进脑血管扩张[4]。但单纯胞二磷胆碱或灯盏细辛注射液治疗急性缺血性脑卒中效果有限。本研究首次联合采用灯盏细辛注射液、胞二磷胆碱治疗急性缺血性脑卒中，分析其对患者脑血循环及TLR4/NF-κB信号通路的影响，旨在为临床治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2017年8月至2019年7月陕西省第二人民医院150例老年急性缺血性脑卒中患者作为研究对象，纳入标准：①均符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》中相关诊断标准[5]，并经颅脑CT、MRI等影像学检查确诊；②首次发病，发病时间<72 h；③患者及家属知情并签署知情承诺书。排除标准：①存在颅内出血或大面积脑梗死者；②近期接受重大手术治疗者；③正在接受抗凝治疗者；④伴有严重肝肾功能障碍者；⑤合并恶性肿瘤者；⑥伴有严重凝血功能障碍者；⑦过敏体质或对本研究所用药物成分具有使用禁忌证者。简单随机化分为三组，各50例。对比三组年龄、性别、发病时间、梗死体积、病灶单发/多发、合并症等资料无明显差异(P>0.05，见表1)。本研究经我院医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 三组均根据《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》制定常规治疗方案，包括稳定生命体征、控制血压血糖、吸氧、纠正水电解质平衡等基础治疗，同时根据患者病情程度予以抗血小板聚集、营养脑细胞、降低血黏度、改善脑循环等药物治疗；于此基础上，对照A组予以胞二磷胆碱(吉林百年汉克制药有限公司，国药准字H22026208)治疗，750 mg胞二磷胆碱注射液+100 mL生理盐水，静脉滴注，1次/d。对照B组予以灯盏细辛注射液(云南生物谷灯盏花药业有限公司，国药准字Z53021569)治疗，30 mL灯盏细辛注射液+250 mL生理盐水，静脉滴注，1次/d，连续治疗14 d；观察组予以胞二磷胆碱联合灯盏细辛注射液治疗，方法同对照A、B组。

1.2.2 检测方法 血清SOD、MDA水平：空腹状态下抽取5 mL肘静脉血，高速离心处理(3000 r/min，10 min)，分离血清、血浆，采用化学比色法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)，硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA)，严格按照试剂盒(北京百奥莱博科技有限公司)操作说明书进行；TLR4蛋白和NF-κB蛋白：抽取8 mL肘静脉血，置于肝素抗凝管中，以Ficoll液体分层法将血液分离提纯后取其单个核细胞(PBMCs)，培养液洗涤2次，经重悬后收集PBMCs，加入细胞裂解液裂解，离心收集上层清液取得总蛋白，BCA法测定并配平蛋白浓度，半干法电泳转移至PVDF膜上，以10%脱脂牛奶封闭液室温下封闭2 h，依次加入TBS/T稀释至适当浓度的一抗、封闭液稀释的二抗 ，TBS/T洗膜，化学法发光显色，定影。采用QuantityOne软件测定蛋白条带IOD值，β-actin作为参照组，以目的蛋白与β-actin光密度比值表示目的蛋白相对表达水平。

1.3 观察指标

①临床疗效，参考《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》中神经功能缺损程度(NIHSS)评分标准判断患者疗效，基本控制：NIHSS评分下降>90%；显著进步：NIHSS评分下降46%～90%；进步：NIHSS评分下降18%～45%；无效：NIHSS评分降低≤17或增加。总有效率=(基本控制+显著进步+进步)/50×100%。②治疗前、疗程结束后神经功能及日常生活活动能力，以美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估神经功能，分值越低，神经功能恢复越良好[6]；Barthel指数评估日常生活活动能力，分值越高，日常生活活动能力越强[7]。③治疗前、疗程结束后血流动力学指标，以GEVolusonE8型彩色多普勒超声诊断仪经双侧颞窗检测双侧大脑中动脉血流情况，记录血流速度(Vm)、阻力指数(RI)、血管搏动指数(PI)。④治疗前、疗程结束后血液流变学指标，采用北京普利生IBY-B6A血液黏度仪测定血液流变学指标，包括血浆黏度、全血黏度、红细胞聚集率。⑤治疗前、疗程结束后血清MDA、SOD水平。⑥治疗前、疗程结束后TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 临床疗效

观察组临床疗效高于对照A、B组(P<0.05)，对照A、B组临床疗效相比，无明显差异(P>0.05，见表2)。

2.2 NIHSS评分、Barthel指数

三组治疗前NIHSS评分、Barthel指数相比，无明显差异(P>0.05)；观察组疗程结束后NIHSS评分低于对照A、B组，Barthel指数高于对照A、B组(P<0.05)，对照A、B组相比，无明显差异(P>0.05，见表3)。

表3 三组NIHSS评分、Barthel指数对比分)

2.3 脑血流动力学

三组治疗前脑血流动力学指标相比，无明显差异(P>0.05)；疗程结束后，观察组Vm水平高于对照A、B组，PI、RI低于对照A、B组(P<0.05)，对照A、B组相比，无明显差异(P>0.05，见表4)。

表4 三组脑血流动力学对比

2.4 血液流变学指标

三组治疗前血浆黏度、全血黏度、血小板聚集率相比，无明显差异(P>0.05)；观察组疗程结束后血浆黏度、全血黏度、血小板聚集率较对照A、B组低(P<0.05)，对照A、B组相比，无明显差异(P>0.05，见表5)。

2.5 氧化应激

三组治疗前血清MDA、SOD水平相比，无明显差异(P>0.05)；疗程结束后，观察组血清MDA水平低于对照A、B组，SOD水平高于对照A、B组(P<0.05)，对照A组血清MDA水平高于对照B组，SOD水平低于对照B组(P<0.05，见表6)。

2.6 TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白

三组治疗前TLR4、NF-κB蛋白表达相比，无明显差异(P>0.05)；疗程结束后，观察组TLR4、NF-κB蛋白表达低于对照A、B组(P<0.05)，对照A组TLR4、NF-κB蛋白表达高于对照B组(P<0.05，见表7)。

表5 三组血液流变学指标对比

表6 三组血清SOD、MDA水平对比

表7 三组血液核细胞TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白对比

3 讨论

急性缺血性脑卒中为老年群体常见疾病，具有高发病率、高致残率及高病死率，且近年来，随着我国人口老龄化趋势发展，该病发生率明显增加，严重威胁国民身心健康[8]。目前，临床治疗急性缺血性脑卒中关键在于恢复梗死区域血流，改善神经功能，减轻脑损伤[9]。

现阶段，急性缺血性脑卒中治疗方式多种多样，本研究对急性缺血性脑卒中患者予以灯盏细辛注射液联合胞二磷胆碱治疗，结果显示观察组疗程结束后NIHSS评分、血浆黏度、全血黏度、血小板聚集率、PI、RI低于对照A、B组，Barthel指数、Vm高于对照A、B组，且临床疗效优于对照A、B组(P<0.05)，提示灯盏细辛注射液联合胞二磷胆碱治疗急性缺血性脑卒中，可改善患者血流动力学及血液流变学，促进神经功能恢复，提高日常生活活动能力恢复，效果较为显著。氧化应激机制为急性缺血性脑卒中重要发病机制，卒中发生后，机体内活性氧族的产生与抗氧化防御体系间平衡被打破，致使组织处于氧化损伤状态，其中MDA为活性氧族氧化细胞膜上不饱和脂肪酸反应的最终产物，而SOD为体内重要抗氧化酶，二者水平变化反映机体氧化应激水平。本研究中观察组疗程结束后血清MDA水平低于对照A、B组，SOD水平高于对照A、B组，故灯盏细辛注射液联合胞二磷胆碱可明显减轻急性缺血性脑卒中患者氧化应激反应，进一步证实了二者联合治疗效果。原因在于：①缺血性脑卒中又名脑梗死，属中医学“血瘀”、“血行不畅”范畴，瘀血阻滞贯穿整个病理过程，灯盏细辛注射液具有活血化瘀功效，且现代药理学证实，灯盏细辛注射液可通过抑制血小板活性，抵抗血小板聚集，有效改善机体血液流变学，发挥抗凝及抗血栓作用；抑制炎性因子表达及钙离子超载，保护缺血部位神经细胞，从而减轻脑缺血再灌注损伤；其主要成分野黄芩苷作为一种强氧化剂，可抗氧化，清除氧自由基，抵抗脂质过氧化造成的神经细胞代谢紊乱及细胞结构变化；抑制调节Na+、k+-ATP酶活性，预防脑水肿，改善脑血流供应[10-11]；②胞二磷胆碱可提高线粒体ATP酶活性，抑制磷脂酶A2活性，上调多巴胺与去加肾上腺素水平，从而提高细胞膜稳定性，减少自由基释放，抑制脑缺血后过氧化物生成，从而发挥抗氧化作用[12-13]；③灯盏细辛注射液、胞二磷胆碱作用机制不同，联合应用，协同补充，可最大程度提高疗效。

TLR4作为一种重要的炎性受体类型，可介导机体炎性损伤，启动细胞内信号转导，并通过NF-κB等途径激活炎性细胞，对黏性因子与炎性因子产生作用，促发体内炎性反应。相关研究表明，细胞因子启动包含2个NF-κB结合位点，调节各种物质转录过程，当缺血性脑卒中时，机体转录因子被激活，NF-κB蛋白表达过量，致使脑组织内发生异常变化，导致动脉血管内皮受损，最终发展为脑血管闭塞，致使脑组织血流灌注下降，缺氧缺血程度加重等。顾红梅，等[14]学者证实，急性缺血性脑卒中患者大脑前动脉、中动脉血流峰值与TLR4/NF-κB信号通路状态存在一定相关性。本研究中，观察组疗程结束后TLR4、NF-κB蛋白表达低于对照A、B组，提示灯盏细辛注射液联合胞二磷胆碱治疗急性缺血性脑卒中，可显著调节患者TLR4/NF-κB信号通路。考虑原因可能是由于胞二磷胆碱、灯盏细辛注射液均具有抗炎作用，尤其是灯盏细辛注射液主要成分野黄芩苷具有抗炎作用，可抑制炎性因子及炎性相关信号通路表达[15]。

综上所述，灯盏细辛注射液联合胞二磷胆碱治疗老年急性缺血性脑卒中，可显著改善患者血流动力学、血液流变学，抑制氧化应激反应，调节TLR4/NF-κB信号通路，促进神经功能恢复，提高日常生活活动能力，效果较为显著，值得临床推广与应用。但本研究样本量较小，还需临床多中心、多渠道取样，作进一步证实。