进行骨髓细胞形态学检查在诊断非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的价值

陈德乔

（重庆市万州区第一人民医院检验科，重庆 404000）

非霍奇金淋巴瘤是一种发病率较高的血液系统恶性肿瘤。该病患者的淋巴细胞在分化的过程中会发生克隆性增生。非霍奇金淋巴瘤患者的中位年龄为50 岁左右。该病患者的淋巴瘤细胞侵犯其骨髓的几率高达30% ～50%。不同类型的非霍奇金淋巴瘤患者骨髓侵犯的发生率存在较大的差异。该病患者的淋巴瘤细胞是否侵犯其骨髓是对其病情进行分期的重要指标。准确地诊断非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者的病情有助于临床医生为其制定有针对性的治疗方案。对该病患者进行骨髓活检是目前临床上确诊其病情最准确的方法。但对非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者进行骨髓活检的操作复杂。对该病患者进行骨髓细胞形态学检查及流式细胞术检查也能观察到其骨髓内细胞的情况[1]。本文主要是探讨进行骨髓细胞形态学检查在诊断非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本文的研究对象为重庆市万州区第一人民医院收治的30 例非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者。该医院收治这些患者的时间为2019 年1 月至2020 年1 月。在这些患者中，有男性17 例，占比为56.67%；有女性13 例，占比为43.33%；其中年龄最小的患者34 岁，年龄最大的患者79 岁，其平均年龄为（56.48±18.16）岁。这些患者均对本次研究知情，同意参与本次研究。

1.2 方法

对这些患者均进行流式细胞术检查，方法是：对患者进行骨髓穿刺，采集其3 ～5 ml 的骨髓液，并使用乙二胺四乙酸二钾进行抗凝。对骨髓液进行离心、洗涤等处理后，放入6 色流式细胞仪。使用直接免疫标记法对细胞进行免疫分型。使用CD45/ 侧向角光散射设门法圈定淋巴细胞。若患者骨髓液中的细胞存在以下任意一种状态，即可判定其病情为非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯：1）B 淋巴细胞呈轻链限制性表达状态。2）Kappa 或Lanbda 表型缺失。3）B 淋巴细胞群表型异常。4）CD56 和CD16 双阳性细胞的比例升高，或CD56、CD16 的某一标记缺失。5）T 淋巴细胞表型异常[2]。对这些患者均进行骨髓细胞形态学检查，方法是：对患者进行骨髓穿刺，采集其0.2 ml 的骨髓液。制作骨髓涂片。在涂片自然干燥后，用瑞氏染色液对涂片进行染色。用显微镜观察涂片中有核细胞的数量。在患者的骨髓有核细胞中，若淋巴细胞占比≥30%，可确诊其病情为非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。在患者的骨髓有核细胞中，若淋巴细胞占比＜30%，但其骨髓液中存在异常淋巴细胞或母细胞样淋巴细胞，也可确诊其病情为非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯[3]。对这些患者均进行骨髓活检，方法是：采集患者一块1 cm长的圆柱形骨髓组织标本。对标本进行脱钙处理。将标本切成薄片。用苏木精- 伊红染色法对切片进行染色。在油镜下选取200 个有核细胞进行观察。若患者的骨髓组织标本中存在淋巴瘤细胞，可确诊其病情为非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。所有检查均由同一检验师完成。

1.3 观察指标

将这些患者进行骨髓活检的结果作为确诊其病情的标准。观察根据这些患者进行流式细胞术检查结果及骨髓细胞形态学检查的结果诊断其病情的准确率。

1.4 统计学处理

将本次研究中的数据均采用SPSS 20.0 统计软件进行处理，计量资料用均数± 标准差（± s）表示，采用t 检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ² 检验。以P ＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

对这些患者进行骨髓活检的结果显示，所有患者均发生非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。根据这些患者进行流式细胞术检查或骨髓细胞形态学检查的结果诊断其病情的准确率均较高。根据这些患者进行流式细胞术检查的结果诊断其病情的准确率与根据其进行骨髓细胞形态学检查的结果诊断其病情的准确率相比，P ＞0.05。详见表1。

表1 这些患者进行流式细胞术检查及骨髓细胞形态学检查的结果

3 讨论

非霍奇金淋巴瘤是一种恶性淋巴细胞增殖性肿瘤。该病患者发病的部位主要是其淋巴结、脾及胸腺等淋巴器官。导致非霍奇金淋巴瘤发生的因素主要是患者存在免疫功能异常、发生病毒或细菌感染、接触有害的化学物质、遗传因素等。非霍奇金淋巴瘤患者的临床表现包括发热、盗汗、消瘦、皮肤瘙痒、腹部有饱胀感、腹痛、消化不良、消化道出血、淋巴结肿大、鼻塞及局部黏膜溃疡等。非霍奇金淋巴瘤患者的病理类型不同、受侵犯的部位不同或受侵犯的范围不同，其临床症状会存在一定的差异。目前临床上比较常见的是B 淋巴细胞非霍奇金淋巴瘤。但国外的研究结果证实，亚洲居民T 淋巴细胞非霍奇金淋巴瘤的发生率高于西方国家居民。尽早确诊非霍奇金淋巴瘤患者的病情有利于临床医生尽早对其进行有针对性的治疗。该病患者的淋巴瘤细胞易侵犯其骨髓。非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤细胞是否侵犯其骨髓是对其病情进行分期的重要指标。若非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤细胞侵犯其骨髓，则可将其病情判定为Ⅳ期非霍奇金淋巴瘤。Ⅳ期非霍奇金淋巴瘤患者的预后较差。对非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者进行骨髓活检可全面了解其骨髓组织的结构、骨髓细胞的形态等，从而比较准确地诊断其病情。但进行骨髓活检需要采集患者一块骨髓组织标本，对其造成的创伤比较大，对检验师和检验设备的要求较高，耗时较长。因此，该方法在临床上的推广受到一定的限制。

近年来，随着临床检验技术的不断进步，流式细胞术检查逐渐被用于临床诊断非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。流式细胞术检查是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量检查。流式细胞术检查是目前临床上最先进的细胞定量检查技术之一。进行流式细胞术检查仅需要采集患者少量的骨髓液，对其造成的创伤较小，检查的速度快，可进行多参数检测，从而识别其骨髓液中的异常细胞，并确定异常细胞的细胞周期时相[4]。但流式细胞术无法完全替代骨髓活检。

骨髓细胞形态学检查又被称为骨髓象检查，是指使用显微镜或自动化仪器对骨髓中细胞的形态及数量进行的检查。骨髓细胞形态学检查可用于诊断多种疾病。非霍奇金淋巴瘤细胞在骨髓中的形态呈高度特异性，且不同病理类型非霍奇金淋巴瘤细胞的特征差异非常大。临床医生在对非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者进行骨髓细胞形态学检查时，应充分把握各种非霍奇金淋巴瘤细胞的特点，从而准确地诊断其病情。与进行骨髓活检相比，进行骨髓细胞形态学检查操作简单，取材方便，可清晰地观察到高特异性非霍奇金淋巴瘤细胞的形态特征[5]。非霍奇金淋巴瘤细胞的体积比骨髓中的原始红细胞或原浆细胞大，呈深蓝色，含有嗜天青颗粒，核染色质呈细网状或粗网状，核仁大[6-7]。但骨髓细胞形态学检查仍然无法完全替代骨髓活检。对非霍奇金淋巴瘤患者进行骨髓细胞形态学检查时，其检查结果可能呈假阳性。这主要是因为，滤泡细胞淋巴瘤及套细胞淋巴瘤等非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤细胞特异性较低。因此临床医生在对非霍奇金淋巴瘤患者进行骨髓细胞形态学检查后，还应结合其临床症状、进行流式细胞术检查的结果等诊断其病情[8]。

综上可见，进行骨髓细胞形态学检查可作为辅助诊断非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯的方法之一。对非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者进行骨髓细胞形态学检查可观察到其淋巴瘤细胞的形态，有助于临床医生为其制定有针对性的治疗方案。