两种蛋白酶对肉鸡生产性能、免疫器官指数和消化器官的影响

李忠荣 靳伟刚 陈鑫珠＊ 邱华玲 林海虹 缪伏荣 张世忠 刘 景

（1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福州 350013；2.福建福大百特生物科技有限公司 福州 350007；3.酶高效表达国家工程实验室 福州 350007）

蛋白酶是催化蛋白质水解的一类酶的总称[1]，其广泛存在于动物内脏、 植物茎叶、 果实和微生物中[2]。 在畜禽配合饲料中添加蛋白酶，有利于提高蛋白饲料的消化吸收、 提高饲料利用率。 对于幼龄动物，因日粮中蛋白质含量高、自身分泌的蛋白酶和采食量不协调，蛋白质更不容易消化彻底[3]。 因此，在饲料中添加外源性蛋白酶， 可以有效补充内源性蛋白酶的不足，增强内源性蛋白酶的活性；降低饲料中的抗营养因子，提高蛋白质的消化率，提高日增重，降低料肉比，改善动物生产性能[4]。 在饲料中添加蛋白酶可以有效改善禽畜、水产等动物的生长性能，通过蛋白酶调节可以有效增强免疫力[5]。 蛋白酶在禽类中的应用较为广泛，由于禽类的消化道比较短，通过添加蛋白酶可以有效消化饲料中的营养物质，提高利用率和生产性能。 在肉鸡仔鸡阶段日粮中添加蛋白酶， 不论是高剂量还是低剂量都可以提高生长性能[5]。 庄志伟等[6]报道，玉米-豆粕型基础日粮中添加低温碱性蛋白酶可增加肉仔鸡平均日增重和出栏均重，降低料重比。 李东东等[7]报道，添加碱性蛋白酶可显著提高肉鸡21 d 和42 d 的平均体重以及1～41 d 的平均日增重，显著降低1～21 d 的料重比。 角蛋白酶是一种底物非常广的蛋白酶， 能够降解多种可溶性及不可溶性蛋白质，如胶原蛋白、纤维蛋白、牛乳清蛋白、血红蛋白、酪蛋白等，特别是能够降解天然的角蛋白，使其变成可溶的氨基酸和多肽，并且作用条件温和，相比于常规蛋白酶有明显优势[8]。 于海涛等[9]报道，添加角蛋白酶能够显著提高断乳仔猪的生长性能，降低断乳仔猪的腹泻率。杨久仙等[10]报道， 日粮中添加0.08%～0.12%角蛋白酶可以提高仔猪饲料转化效率和对氮的利用效率， 从而提高断乳仔猪的日增重。 鲜见角蛋白酶在肉鸡日粮中应用的报道。本试验通过研究两种蛋白酶对肉鸡生产性能、免疫器官指数及消化器官的影响， 以期为角蛋白酶在肉鸡日粮中的应用提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 角蛋白酶：由福建福大百特生物科技有限公司提供， 是一种新型碱性复合角蛋白酶产品，酶活力≥1 500 U/g。 进口蛋白酶：加拿大某公司碱性复合蛋白酶产品，酶活力≥25 000 CFU/g。 AA肉鸡：购自福建圣农发展股份有限公司。

1.2 试验设计 选取1 d AA 肉鸡240 羽， 随机分为5 组，每组8 个重复，每重复6 羽，各组肉鸡初始体重差异不显著。 对照组饲喂基础日粮，试验1 组、试验2 组在基础日粮中分别添加200 g/t、400 g/t 角蛋白酶，试验3 组、试验4 组在基础日粮中分别添加100 g/t、200 g/t 进口蛋白酶。 试验期为42 d， 分1～21 d、22～42 d 两阶段饲养，试验设计见表1。

表1 试验设计

1.3 试验日粮 试验日粮参考《鸡饲养标准》（NY /T33-2004）营养推荐量和AA 商品代肉鸡营养标准配制。 试验基础日粮组成与营养水平见表2。

表2 基础日粮组成与营养水平（风干基础）%

1.4 饲养管理 试验采用半封闭式鸡舍笼养方式，各组间重复随机排列。 自由采食粉料、充足饮水。 按AA 商品代肉鸡饲养管理手册进行日常管理和免疫等，记录试验期间疫苗接种、疾病发生及治疗情况。

1.5 样品采集与测定 以重复为单位，测定试验第1 d、第21 d 及第42 d 肉鸡空腹体重，每天记录各重复饲料消耗量、死淘数，计算1～21 d 和1～42 d 平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及料重比(F/G)， 计算肉鸡欧洲生产效率指数。 欧洲生产效率指数=[成活率×体重(kg)]/（料重比×出栏天数）×10 000。

于试验第42 d 禁食12 h 后个体称重， 从每个重复随机选取2 羽接近平均体重的鸡只， 经放血处死后，摘取肉鸡胸腺、脾脏、法氏囊，分别进行称重，计算免疫器官指数。摘取肉鸡腺胃、肌胃、十二指肠、空肠、回肠等消化器官，分别进行称重和测量长度。

1.6 数据统计 试验数据用平均值±标准差表示，采用Excel 软件对数据进行初步整理统计， 采用SPSS 19.0 对试验数据进行单因子方差分析 （oneway ANOVA，LSD），Duncan 氏多重比较检验。

2 试验结果与分析

2.1 不同蛋白酶对肉鸡生产性能的影响 从表3可见， 各组21 d 和42 d 平均体重差异不显著 （P＞0.05）， 与对照组相比， 试验1 组、2 组、3 组、4 组42 d 体重分别比对照组提高了2.67%、2.67%、3.05%、1.53%。 各组1～21 d、1～42 d 平均日采食量、平均日增重、料重比、死亡率和欧洲生产效率指数等生产性能指标均差异不显著（P＞0.05）。

2.2 不同蛋白酶对肉鸡免疫器官指数的影响 从表4 可知，各组肉鸡42 d 胸腺指数和法氏囊指数无显著差异（P＞0.05）；与对照组相比，试验各组脾脏指数均低于对照组， 其中试验3 组和试验4 组脾脏指数显著降低（P＜0.05）。

2.3 不同蛋白酶对肉鸡消化器官的影响 由表5可知，各组42 d 肉鸡腺胃重、十二指肠长度和回肠长度均差异不显著（P＞0.05）。 与对照组相比，试验1 组空肠长显著增加（P＜0.05），试验2 组肌胃重、空肠重和回肠重显著增加（P＜0.05），试验4 组空肠长显著降低（P＜0.05）。 试验2 组十二指肠重显著高于试验1 组（P＜0.05）、空肠重显著高于试验3 组和试验4 组（P＜0.05）。

3 讨 论

为了弥补动物特别是幼龄动物内源性消化酶不足的缺陷，提高饲料的消化吸收及利用率[11]，动物饲料中酶制剂的利用越来越受关注。 在饲料中添加酶制剂可以消除部分或全部饲料中的抗营养成分，提高生产性能，提高饲料报酬，节约粮食，减少环境污染[5,12]。 在肉鸡仔鸡阶段日粮中添加蛋白酶，可以提高其生长性能[5]。 奚刚等[13]报道，外源性中性蛋白酶可提高丝毛乌骨鸡对日粮中氮的利用率， 提高机体内主要蛋白质类消化酶的活性。王秀梅等[14]报道，低磷低蛋白日粮单独或组合添加植酸酶和蛋白酶可使肉鸡的生长性能达到标准日粮的水平， 并能降低料重比，提高饲料利用率。 于海涛等[9]报道，在豆粕中混合小麦麸作为角蛋白酶体外酶解物料， 降低了豆粕中β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白水平，改善了豆粕的风味和品质；提高断乳仔猪的生长性能，降低断乳仔猪的腹泻率和粪便评分。 角蛋白酶是一种特殊的蛋白酶类，它不仅可以降解角蛋白，还可不同程度地降解其他蛋白质和多种多肽，如血红蛋白、明胶和卵蛋白等， 另外对一些胶原蛋白和弹性蛋白等不可溶性蛋白的水解能力高于其对应的蛋白酶[15]。 杨久仙等[10]报道，与对照组相比，添加0.08%和0.12%角蛋白酶组仔猪饲料转化效率分别提高6.3%和8%，有效提高仔猪饲料转化效率和对氮的利用效率，从而提高断乳仔猪的日增重。侯振平等[16]报道，肉鸡日粮中添加适量蛋白酶能够在一定程度上增强免疫力，提高抗氧化能力，从而改善其生长性能，建议1～21 d 肉仔鸡日粮中蛋白酶制剂最佳添加量为200 g/t。本试验中，日粮中添加角蛋白酶和进口蛋白酶对肉鸡生产性能无显著影响， 但均可提高肉鸡42 d 出栏体重。

表3 不同蛋白酶对肉鸡生产性能的影响

表4 不同蛋白酶对肉鸡免疫器官指数的影响

表5 不同蛋白酶对肉鸡消化器官的影响

幼龄动物的消化系统发育不全、 酶分泌不足而导致的腹泻、消化不良等，可通过酶制剂的添加进行改善，提高其免疫力[17]。 周梁等[18]研究报道，随着蛋白酶添加水平的提高，8～21 d 肉鸡的十二指肠和空肠隐窝深度呈显著线性升高，十二指肠绒毛高度/隐窝深度呈显著线性降低， 空肠绒毛高度呈显著二次曲线升高。 玉米-豆粕-肉骨粉型日粮添加0.01%和0.02%蛋白酶能够促进肉仔鸡生长前期的小肠发育，提高粗蛋白质及大部分氨基酸表观消化率，从而改善生长性能[18]。 本试验中， 日粮中添加100 g/t、200 g/t 进口蛋白酶对肉鸡脾脏指数有显著影响，添加400 g/t 角蛋白酶可显著增加肉鸡肌胃、空肠和回肠的重量，促进肉鸡消化器官的生长发育，其影响机理均有待进一步深入研究。

4 结 论

添加角蛋白酶或进口蛋白酶， 对肉鸡生产性能无显著影响，但均可以提高肉鸡42 d 体重，对肉鸡脾脏指数影响较为显著。肉鸡日粮中添加400 g/t 角蛋白酶可显著增加肉鸡肌胃、空肠和回肠的重量，一定程度上可促进肉鸡消化器官的生长发育。