ATP荧光检测法在传染病防治监督领域中的运用分析

郑效海 边廷敏

1.山东省淄博市临淄区卫生健康执法大队,山东 淄博 255400;2.山东省淄博市临淄区疾病预防控制中心,山东 淄博 255400

引言:卫生监督工作综合性、技术性及科学性等诸多特征共存，在现场实现快速检测表现出卫生监督执法的高技术性，也是落实执法任务、高效应对紧急公共卫生事件的重要保障。从本质上分析，ATP荧光检测法隶属于快速的微生物检测方法范畴，在上个世纪90年代ATP荧光系统被引入至国内，经20余年的发展历程，该项技术在环境卫生、食品安全监测等诸多领域中均有应用，取得的成绩也是较理想的。

1 ATP检测原理及其特点分析

该项检测方法是采用荧光素检测ATP的含量值，在Mg2+与荧光素酶的催化作用在，荧光素、氧气会和ATP进行发光反应形成长为560nm荧光，在他类反应物投入过量的情景下，ATP含量越高，发光强度越大，进而通过检测发光强度值去检出试样内ATP含量。

技术的主要优势特征有：(1)操作过程简易、快速，能实现在监测场所的即时性检测；(2)反应敏捷，当下采用的手持式荧光检测仪的检测界限通常是10-15mol，能够符合大部分样本的现实监测需求，台式检测仪的检测界限更高；(3)该检测法下的反应简单、有助于减少操作时的人为误差，再现性优良，对实验操作技术没有提出严苛的要求；(4)食用范围较广，能够精确检测出环境、食品试样内维生素机及他类有机物残留情况。

但ATP检测技术应用阶段也暴露出一定不足，主要表现在外界客观因素容易干扰反应过程、无法鉴定菌种及使用费用较昂贵等方面。

2 ATP检测法在传染病防治监督实践中的应用

2.1医院感染控制 一旦发生医院感染事件，一方面会增加国家医疗卫生资源的耗用量，另一方面也会使广大病患承受更大的痛楚，使患者、社会乃至国家均承受着巨大的经济损失。大部分医院感染患者是接触性感染，医务人员手、受污染的医疗器械等是主要的传播媒介。故而，在医院感染防控阶段，加强医护人员手卫生、器械清洗和消毒质量管理具有很大现实意义。

柯雅娟等[1]采用ATP技术对医院内外科医护人员手的卫生质量作出监测评估，并基于比较发现运用ATP检测方法后有助于提升手术室人员手卫生的依从性。尽管清洗是当下大部分医疗器械实现有效灭菌的关键一环，当针对其清洗质量的评估当下尚未形成标准化的测评方法，ATP生物发光技术评估医疗器械清洗前后清洁度改善情况的报道并不多，但有很多医者陆续研究了该法的应用情况。比如，邢书霞等[2]比较了超声波清洗器清洗前后细菌总数和标定菌量及RLU值曲线之间形成的相关性以后，获得了RLU值对数值，将其与实测值比较后，确认两者没有形成明显差异，表明当细菌总数在1.0×102～1.0×102CFU区间内时，可利用ATP法检出RLU值取代细菌总数，大体上能呈现出清洗前后细菌残留实况，邢书霞等推荐使用ATP荧光法测评器械清洗效果，若检出RLU值≤2000，则提示器械清洗效果达标。还有文献内记载，于两所英国医院内观测63支内镜使用后的清洗效果，均使用微生物学、ATP检测，将ATP、微生物含量分别<500RLU/样品、<103cfu/样品时设定为合格标志，历经研究后发现，ATP法检出的不合格样品要多于微生物法。

2.2疫源地消毒控制

伴随SARS、禽流感等传染病的流行，汶川、芦山地震等自然地质灾害等的发生，不同级别疾控机构陆续建立的背景下，早期有针对性的指导相关单位、群体进行消毒工作，这是早期有效防控传染病的有效办法之一。在控制消毒效果质量方面，细菌采样与培养法检测是经典法，其对专业知识与技能水平提出较高要求，耗用的时间长、成本也较高。既往有人员试图使用ATP荧光法控制疫源地消毒质量，比较其和微生物培养法对模拟及疫源地现场消毒处理前后的细菌总数，发现ATP法能更迅速的检测、测评疫源地物体表层消毒情况[3]。

2.3检测水内细菌总数

水内细菌总数为水质监测实践中的常用指标之一，其能直接呈现出水质被细菌的污染程度。国内有人员在标准实验室内采用既往有人员试图使用ATP荧光法、常规平皿计数法分别检测细菌总数，发现检测结果有较好的线性相关性，据此认定ATP法为一项能快速、便捷、准确检出菌落总数的技术类型，适用于快速检测自来水等领域中。还有人员结合现行规范标准采用ATP法监测温泉水内细菌总数，检出的温泉浴池水污染状况和权威卫生部门作出的测评结果是一致的，其准确度和实验室细菌培养法作比较相关性范围是92%～97%[4]。

3 构建游离ATP有效去除体系，改进ATP荧光法

游离ATP的含量是影响ATP技术检测微生物含量的主要影响因素之一，当下采用的去游离ATP前处理法及酶解ATP法都不能完全去除游离ATP。故而应构建游离ATP有效去除体系，比如将Mg(OH)2添加到菌液内取诱导游离ATP聚沉过程，历经离心过程将其去除；基于正交实验对比多种ATP水解酶在去除游离ATP的效果，进而获取效能最佳的游离ATP去除剂。

虽然既往ATP法在检测微生物方面表现出较高的灵敏度，但部分情景下依然无法达到卫生学要求。为应对如上情况，实践中可联合使用过滤法、前培养法去提高灵敏度。比如，当试验样品内固体成分占比较高以及活菌数目偏少时，辅助使用过滤法也不利于完成 ATP测定任务，工作人员可以在较短时间内进行前培养，诱导被检细菌生长繁殖过程，最后能抵达可用APT法检测的程度。

4 结束语

和传统经典检测技术方法相比较，ATP荧光检测法在操作简便性、快捷性及检测结果精确度等诸多方面均占据优势，在现场卫生监测领域中表现出较高适用性，特别是在传染病防治监管中，但当下关于该法应用的相关研究文献报道并不多。在技术应用阶段，我们应重视微生物数目、pH、温度及游离型APT形成的影响，并思考相关应对措施，进而使用ATP法检测结果的准确度得到更大保障，为我国卫生行业健康发展提供更强大支持。