新生儿遗传代谢性疾病筛查中串联质谱仪的应用探究

贾楠楠

（泰安市妇幼保健院，山东 泰安 271000）

随着我国社会经济的快速发展，人们对健康问题的重视程度也在不断加深，同时科技水平的提升促进了医学领域的蓬勃发展，所以如何将新生人口的素质进一步提升成为当下预防医学领域中的热点所在。相关研究结果表明，新生儿遗传代谢性疾病是导致身体素质较差的主要因素，对其原因进行分析，是因为遗传代谢性疾病会导致新生儿的激素水平与生化水平发生改变，所以需要对新生儿进行相应的筛查工作来明确诊断，从而尽早地给予针对性的治疗措施，对新生儿的健康成长有着重要的现实意义。本文的研究对象为常规筛查的新生儿，共200例，均为我院2020年1月～2021年1月期间进行，以此来研究分析串联质谱仪的作用与效果，现报道结果如下。

1 资料与方法

1.1 基础资料

将我院接受常规筛查的200例新生儿作为研究对象，时间为2020年1月～2021年1月期间，男女比例为130:70，年龄为1.5～6个月，平均年龄为（3.2±0.57）个月，研究已经过医院伦理委员会的批准通过，并且新生儿家属知晓此次研究并签署同意书。研究新生儿均疑似遗传代谢性疾病，包括抽搐、生长迟缓、肝脾肿大、肌张力不足、智力发育不良、精神行为反常、反复性呕吐、生化指标异常等。

1.2 试剂与仪器

（1）试剂：肉碱（游离肉碱，乙酰肉碱、丙酰肉碱、丙二酰肉碱、丁酰肉碱、3-羟甲基丁酰肉碱、异戊酰肉碱、异戊烯肉碱、异戊二酰肉碱、3-羟基异戊酰肉碱、己酰肉碱、己二酰肉碱、辛酰肉碱、辛烯酰肉碱、葵酰肉碱、葵烯酰肉碱、葵二烯酰肉碱、十二碳酰肉碱、十二碳烯酰肉碱、十四碳酰肉碱、十四碳烯酰肉碱、十四碳二烯酰肉碱、3-羟基十四碳酰肉碱、十六碳酰肉碱、十六碳烯酰肉碱、3-羟基十六碳酰肉碱、3-羟基十六碳烯酰肉碱、十八碳酰肉碱、十八碳烯酰肉碱、十八碳二烯酰肉碱、3-羟基十八碳酰肉碱、3-羟基十八碳烯酰肉碱）、非衍生化多种氨基酸（丙氨酸、瓜氨酸、精氨酸、甘氨酸、亮氨酸/异亮氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、缬氨酸）、琥珀酰丙酮（琥珀酰丙酮）串联质谱测定试剂盒均为美国PerkinElmer公司生产，萃取质控血片以及新生儿滤纸干血片后直接上机测定。

（2）仪器：质谱仪、高效液相仪、自动进样系统均由美国Waters公司提供。

1.3 实施方法

使用一次性采血针刺新生儿足跟进行采集，深度不超过3mm，将采集后的血液滴在Scheicherand Schuell 903滤纸样本卡，然后在阴凉处将样本阴干。滤纸干血片中的酰基肉碱、游离肉碱、氨基酸、琥珀酰丙酮萃取由25种稳定同位素标记的氨基酸、酰基肉碱、琥珀酰丙酮内标的溶剂进行，然后通过MS/MS系统展开相关分析。被测物质分子被质谱电离成各种质荷比（m/z）不同的带电离子，根据m/z大小，将这些电粒子在时间或者空间上产生分离，最终形成质谱图谱。对每个分析物以及与之相对应的同位素内标离子峰强度进行测定，根据已知的浓度内标便能够将所测样本的各分析物浓度进行自动计算。具体实验步骤如下：通过3.2mm直径的打孔器在滤纸血片上取样，并将其在96孔U型板中放置，同时，将100μL内标工作液在每个孔内加入，利用黏性封膜将其封套密封后，放置恒温震荡孵育器中，将其震荡5min，温度为45℃，605～750r/min。孵育结束后，将育萃取液75μL转移到V型底检测板内，使用铝膜将其封盖，然后上机进行检测。

2 结果

200例血液标本中，检测结果为阳性的有3例标本，占比为1.5%，2例为甲基丙二酸尿症，1例为异戊酸血症。

3 讨论

临床上有很多遗传代谢性疾病种类，就目前而言，已知的遗传代谢性疾病种类就有1000多种，许多新生儿有着非特异性临床表现，比如，呕吐、抽搐、嗜睡、酸中毒、发育迟缓、肝脾肿大、精神行为反常、肌张力不足等。筛查遗传代谢性疾病的方法有很多，在以往多采取Guthrie细菌抑制法、放射免疫分析法等，这些方法在临床上能够起到一定的应用效果，但这些方法通常只能够进行一种疾病的筛查工作，随着检查项目的不断增加，使得传统的筛查方法工作量增加，从而会不断提高筛查成本，并且工作效率较低，因此难以满足大规模筛查遗传代谢性疾病的需求。换而言之，传统筛查技术所体现出的成本高、工作量大等问题，已经难以满足人们的实际需求，因此，选择新型有效的手段对遗传代谢性疾病进行筛查就显得尤为重要。

有资料显示，我国医科大学附属第一医院对串联质谱分析方法展开了相关研究，其研究对象为172例新生儿，在分析新生儿血液样本中所含有的酰基肉碱谱与氨基酸谱相关浓度后，其结果显示阳性检测结果为6.4%，11例新生儿被检测出来，其中有机酸代谢类疾病患儿6例，氨基酸代谢类疾病3例，脂肪酸代谢类疾病2例。同时，有相关研究表明，串联质谱所检测的遗传代谢性疾病可以达30多种，并且具有良好的检测效果。串联质谱技术所使用的技术原理主要是检测样品物质所具有的质荷，从而定量分析以及定性分析样品物质，与传统技术相比，串联质谱技术是能够检测血液样本中的70多种氨基酸与酰基肉碱，因此，能够快速诊断与筛查30多种脂肪酸、氨基酸、有机酸类代谢性疾病。串联质谱技术在如今已经得到了世界上多个国家的广泛应用，是能够在早期发现遗传代谢类疾病，我国于2002年开始使用该技术，对于新生儿遗传代谢类疾病的筛查与诊断有着显著进步与提高。串联质谱仪虽然有着许多优势，但依旧存在不足，因此，难以将传统检查方法完全取代，比如，质谱仪有着昂贵的价格，维持和操作串联质谱仪的费用相对较高等。临床上对串联质谱仪的机理认知在逐渐加深，同时，该技术的运用也逐渐趋于成熟，我国相对经济较发达的地区也正在逐渐开展串联质谱仪来筛查新生儿遗传代谢性疾病，但要想构建完善的串联质谱仪筛查规范以及相关检测疾病的诊治常规，就需要将二级检测方案应用其中，包括降低假阳性、更多标志物、阳性预测值筛查提升等，串联质谱仪的不断稳定与成熟是能够提高诊断准确率，进而获得更良好的社会效益。综上所述，串联质谱仪的使用是能够对新生儿遗传代谢性疾病起到良好的筛查作用，其应用价值良好，能够有效保障新生儿的健康发育。