饲料中磺胺类药物检测方法研究

高景报，刘二花，田 梅，冯腾垒，高红梅，殷娟岭，何日升

（1.石家庄畜产品和兽药饲料质量检测中心 050000；2. 石家庄现代农业学校 050000；3. 石家庄市栾城区畜产品质量监测站 050000；4. 石家庄市农业综合行政执法支队 050000）

磺胺类药物是一种化学合成的抗菌素，其是指具有对氨基苯磺酰胺类结构药物的总称。其具有抗菌作用强、抗菌谱广、性质稳定、价格低等优点，当多种磺胺类药物同时使用时，可使其抗菌效果增强，应用范围扩大，因此常被广泛用作饲料添加剂。但是，过量使用会造成畜产品中磺胺类药物超标，其通过食物链进入人体后，会给人体健康造成伤害，同时对人体也有一定的致癌性。因此，针对饲料中磺胺类药物的残留检测技术显得尤为重要。目前，饲料中磺胺类药物残留检测的分析测定技术有很多，如液相色谱法、液相色谱－质谱法、免疫测定法、滴定法、分光光度法、流动注射分析法等，其中液相色谱法应用比较广泛。研究磺胺类药物的残留检测分析方法是我国畜牧业良好发展的需要。

1 高效液相色谱法（HPLC）

高效液相色谱法是采用高压输液系统，并利用极性不同的化合物在流动相与固定相之间的吸附能力的不同，实现目标化合物与杂质之间的分离的方法，其具有高效、快速的优点，在畜产品及饲料中的药物残留检测方面应用广泛。陈吉之等利用用新型壳核型色谱柱，以0.1%乙酸水溶液与0.1%乙酸甲醇乙腈溶液未流动相，梯度洗脱，建立了利用高效液相色谱法检测饲料中的9种磺胺类药物的方法。利用该方法，可实现在10min内快速分离9种磺胺药物，线性范围良好，回收率达到80%以上。姜兆兴等以乙腈-冰乙酸-水（18+1+81）为流动相，采用C18色谱柱，建立了采用反相高效液相色谱测定饲料中的磺胺残留检测方法，该方法检测限达到10mg/kg。该法具有准确度高、线性好、高效快速的优点。贾涛利用高效液相色谱法实现了对饲料中6种磺胺类药物同时检测，此方法回收率高，重复性好。

2 气相色谱法（GC）

气相色谱是以气体为流动相，利用分离组分在载气和固定相之间分配系数不同，从而实现分离的检测方法。Cihvarino等利用气相色谱法，建立了饲料中9种磺胺类药物的检测方法，但由于该方法前处理过程复杂，且该类化合物不容易气化，需进行衍生化处理，否则检测结果重现性差，因此该方法已逐步被液相色谱串联质谱法、高效液相色谱法淘汰。

3 液相色谱-质谱联用法（LC-MS）

液相色谱-串联质谱法是利用液相色谱分离，质谱法检测的一种方法。其检测化合物具有灵敏度高、特异性强等优点，常被用于药物分析，兽药残留检测等领域。严凤等利用高效液相色谱串联质谱法，建立了快速检测和定量饲料中19种磺胺类药物的分析方法。在该方法中，样品前处理采用乙腈-0.1%甲酸溶液（ 80∶20， V /V） 超声提取，以 0.1%（ V /V） 甲酸乙腈溶液和 0.1% （ V /V） 甲酸水溶液作为流动相，采用静电场轨道阱全扫描，建立了对饲料中19种磺胺类药物的快速定性检测及准确定量的方法。贾涛等利用液相色谱法串联质谱法测定了饲料中的多种磺胺类药物，该方法将饲料样品用缓冲液提取，固相萃取柱净化，洗脱并过滤膜后，用于液相色谱-质谱仪测定，该方法中回收率均大于70%，检测限达到0.01mg/kg，标准曲线线性良好。陈文慧等利用液质联用法，建立了饲料中9种磺胺类药物检测的分析方法。该方法用乙腈为萃取剂，C18柱为分析柱，以甲醇和乙酸铵缓冲液作为流动相，采用电喷雾离子源，在正离子模式下，对饲料中9种磺胺类药物进行残留检测。该结果表明9种磺胺类药物在浓度0-200ug/L之间，线性良好，最低检测限为2ug/g，回收率在75%以上。

4 酶联免疫分析技术（ELISA）

酶联免疫分析方法是一种新型免疫技术，目标化合物的检测分析主要通过颜色深浅进行判断。该方法具有快速、成本低、分析量大、灵敏度高等特点，并且可用于样品的批量检测，因此，该方法发展迅速，并且在饲料中药物残留检测中应用广范。RobertaGalarini等研究了利用酶联免疫吸附法快速定性检测饲料中的磺胺类药物的方法。在国内，周新民等采用ELISA方法，建立了磺胺对甲氧嘧啶的检测方法。

5 展望

其他针对磺胺的分析检测方法如毛细管电泳法、滴定分析法、分光光度法等也存在色谱法的一些缺点: 前处理复杂、仪器设备贵、对专业人员要求较高。所以在现有饲料中的磺胺检测技术的基础上，需要进一步开发灵敏度高、快速、准确、成本低的定性及定量方法。