虎耳草组培快繁体系的研究

赵玉琳，陈陆琴

(太原植物园，山西 太原 030025)

虎耳草(Saxifragastolonifera)是虎耳草科虎耳草属多年生草本植物。其主要有效成分为异香豆精类、酚酸类、萜类和黄酮类等化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化、美白、保肝、抗肿瘤和止咳的作用，临床上主要用于治疗化脓性中耳炎、肺热咳喘和预防口蹄疫。虎耳草耐光性较弱，为喜阴植物，耐低温，越冬性能好，适宜在北方应用。山西省现有5种虎耳草，分别为虎耳草(SaxifragastoloniferaMeerb)、球茎虎耳草(SaxifragasibiricaLinn.)、零余虎耳草(SaxifragacernuaLinn.)、山地虎耳草(SaxifragamonanthaH.Smith)和爪虎耳草[Saxifragaunguiculata var.limprichtii(Engl. et Irmsch.) J. T. Pan]。为保护山西省虎耳草野生资源，笔者对虎耳草组培快繁体系进行了研究，可为后续山西省虎耳草种质资源保护提供参考。

1 材料和方法

1.1 试验材料

山西省太原市太原植物园生产温室的盆栽虎耳草。

1.2 试验方法

1.2.1 无菌外植体的获得

在盆栽虎耳草上剪取嫩芽，用洗衣粉浸泡10 min 后，置于流水下冲洗1 h，再用75%酒精消毒30 s，0.1%氯化汞洗涤2 min～3 min，无菌水冲洗5次～6次，最后用无菌滤纸吸干外植体表面水分，接种到MS基本培养基中。

1.2.2 基本培养基和培养条件

MS培养基：蔗糖30 g/L，琼脂6 g/L，pH值5.8～6.2.培养条件：温度23 ℃～27 ℃，光照时间12 h/d，光照强度为2 000 lx.

1.2.3 最佳分化培养基的筛选

以MS为基本培养基，设置A1,A2,A3,A4,A55种不同激素浓度的分化培养基。6-BA浓度分别为0.3 mol/L，0.5 mol/L，0.8 mol/L，1.0 mol/L和1.3 mol/L，NAA浓度分别为0.03 mol/L，0.05 mol/L，0.08 mol/L，0.10 mol/L和0.13 mol/L.将获得的无菌外植体转入其中，每瓶6个嫩芽，每种培养基3瓶。25 d后观察生长状态和分化情况。

1.2.4 最佳生根培养基的筛选

以1/2 MS为基本培养基，设置6个不同的激素浓度，分别为0.3 mol/L NAA，0.5 mol/L NAA，1.0 mol/L NAA，0.3 mol/L IBA，0.5 mol/L IBA，1.0 mol/L IBA.将分化好的虎耳草幼苗分割移栽到生根培养基上，观察生根状况。

2 结果与分析

2.1 不同激素浓度对虎耳草分化的影响

不同激素浓度对虎耳草分化的影响见表1.

表1 不同激素浓度对虎耳草分化的影响

由表1可知，不同激素浓度的分化培养基中，虎耳草均可分化增殖。随着激素浓度的降低，增殖系数增大。A5培养基中激素浓度最高，增殖系数最低，玻璃化现象严重，愈伤组织较大，叶片发黄。随着激素浓度的降低，在A3培养基中玻璃化现象消失，分化幼苗长势较好。在A1和A2培养基中分化苗生长迅速，苗壮，叶片较绿。其中，激素浓度最低的A1培养基增殖系数最高，达7.84.因此，虎耳草最佳分化培养基为MS+6-BA 0.3 mol/L+NAA0.03 mol/L.

2.2 不同激素浓度对虎耳草生根的影响

不同激素浓度对虎耳草生根的影响见表2.

由表2可知，在不同激素条件下虎耳草均可生根，且生根率都在90%以上。在NAA条件下，最佳浓度为0.5 mol/L，高于此浓度或低于此浓度苗的生根率和平均根数均降低。IBA比NAA生根效果好，生根率均为100%.IBA为0.5 mol/L时，平均根长和平均根数最高，分别为1.0 cm，17.6条。由此得出，虎耳草最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mol/L.

表2 不同激素浓度对虎耳草生根的影响

2.3 炼苗移栽

将生根苗放于自然光下炼苗2 d～3 d，之后栽入小拱棚炼苗7 d，移栽成活率达98%以上。

3 结论与讨论

本试验得出虎耳草最佳分化培养基为MS+6-BA 0.3 mol/L+NAA 0.03 mol/L，最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mol/L.近年来，虎耳草在医药及园林中的应用越来越广，虎耳草种植资源的收集和保护可为其进一步开发利用奠定基础。本试验研究的虎耳草组培体系可为其它种类虎耳草组培体系的建立提供依据。