寻找巴氏细胞图谱——回顾巴氏与村山桥目的伟大合作

文/胡佐鸿

巴氏何许人也

细胞病理学宫颈癌筛查领域有三个著名的“巴氏”命名：巴氏涂片，巴氏染色及巴氏分级。虽然巴氏涂片及巴氏分级现已分别被宫颈TCT及TBS系统更新，但巴氏染色仍然是目前宫颈细胞学的标准染色。“巴氏”是希腊裔学者巴巴尼可拉乌（Papanicolaou）的简称，巴氏（图1）乃现代细胞学之父。

图1 Dr. George N. Papanicolaou (1883-1962)

巴氏1-21883年生于希腊基米小镇，21岁获雅典大学医学学位，1910年在德国慕尼黑动物研究院获博士学位。1910年第一次巴尔干战争爆发，巴氏在医疗队服军役，遇见许多美籍希腊人志愿者，获悉美国有令人神往的科研机会，由此做出了改变其人生轨迹的重大选择——到美国去！但遭到了双方家庭的强烈反对，惟有妻子支持。1913年巴氏夫妇怀揣250美元踏上纽约。巴氏夫人先在金贝儿百货公司找到了服装钉扣的工作，巴氏获得了一地毯销售的职位，但第二天便放弃，他通过拉小提琴和作为自由撰稿人写一些生物学的文章补贴家用。巴氏有幸结识了哥伦比亚大学的摩尔根（1933年诺贝尔生理学和医学奖获得者），其新著《遗传和性别》引用了巴氏1910年的博士论文。经摩尔根等人推荐，巴氏与康奈尔医学院解剖学系主任斯托卡德会面，获得了解剖学助教一职。巴氏进入康奈尔是在1914年，这一年被称为巴氏涂片的纪元之年。

在斯托卡德实验室，巴氏发现了豚鼠阴道分泌物上皮细胞与卵巢生理相关的周期变化，由此能准确揭示排卵时间。此生理现象是否也同样发生于人体呢？巴氏定期从其妻子身上提取阴道液标本，采用玻璃管吸取阴道液后涂片，酒精固定、巴氏染色，持续研究21年，由此观察了从生育期直至绝经期一个女性一生的阴道细胞改变。正是通过这一特殊标本，巴氏得以观察并描述了正常生理的阴道细胞学。1925年，巴氏过渡到观察志愿者女性标本，毫无疑问，巴氏将有机会撞见异常的宫颈癌脱落细胞，他描述这一事件为“我科学生涯中最激动人心的时刻之一”。巴氏独创了报告系统，即著名的巴氏Ⅰ-Ⅴ分级。1928年1月，美国密西根州巴特克里市，在第三次种属改良会议上，巴氏作了里程碑式的报告“诊断癌的新方法”。1941年巴氏与妇科医生特劳特在《美国妇产科杂志》共同发表了阴道涂片诊断宫颈癌的经典论文。1954年，巴氏出版了巨著《脱落细胞学图谱》，囊括了浆膜腔积液及乳腺、生殖、泌尿、呼吸、消化等人体各个系统的细胞学。1962年巴氏在迈阿密因心肌梗塞去死，终年79岁。巴氏获得过1950年拉斯克奖，曾获5次诺贝尔奖提名。美国癌症协会主席卡梅隆1954年将阴道涂片命名为巴氏涂片。

寻找巴氏细胞图谱

出于对细胞学之父巴氏的崇敬，笔者在网上获取并学习了巴氏的经典论文，“New Cancer Diagnosis”及“The diagnostic value of vaginal smears in carcinoma of uterus”，遗憾 的是，内容丰富的经典巨著Atlas of Exfoliative Cytology在国内却难睹真容，只在北大图书馆的馆藏目录中检索到此书。一个偶然的机会，我在一个旧书网上发现一本福建三明地区卫生局1978年内部印刷，作为当地宫颈癌普查学习班的参考资料（图2），由三明地区第一医院病理科章志安译，福建医科大学病理教研组沈云英主任校正3。该书末尾注明译自：Papanicolaou G. N. Atlas of Exfoliative Cytology，这正是我苦寻的巴氏《脱落细胞学图谱》，不过是节译本，仅包含女性生殖系统部分，而这恰是最精华的章节。

图2 巴氏《脱落细胞学图谱·女性生殖系统部分》中文版（福建三明地区卫生局1978年内部印刷）

图3 正常鳞状上皮细胞

该书由文字及整页插图组成，插图形态丰富，结构细腻、色彩鲜艳（图3-5）。这些巴氏在半个多世纪之前观察的细胞，不论正常与否，今天仍会同样地出现于细胞学者的显微镜下，只不过今天我们用更新的理论及术语来诠释而已。如书中描述：“表层细胞与舟状细胞的核异质细胞在核周围可出现空洞”。现在我们已经熟知这就是HPV病毒感染导致的挖空细胞，现在判读为低级别鳞状上皮内病变。巴氏当时固然不知晓这种细胞的产生机制，但他发现并描述了这些细胞，且认为是不够癌诊断标准的异常细胞，即巴氏所谓核异质细胞。与巴氏同时代的英国著名登山家马洛里有句名言：山就在那里。同样，细胞就在那里！这些精美的插图并不会因年代而过时，而褪色。

图4 鳞状细胞癌细胞

图5 腺癌细胞

图6 巴氏《脱落细胞学图谱》Hashime Murayama (村山桥目)的落款“HM”，1954

图7 村山桥目在美国国家地理杂志工作，1932

图8 纱罗尾金鱼及朱文锦鱼游过丁香蓼 (村山桥目作，1924)

图9 黑色东印度鸭和北京鸭 (村山桥目作，1930)

“HM”之谜

笔者原以为《脱落细胞学图谱》之中的插图是由巴氏手绘，但发现一幅整页插图的下方皆有一落款“HM”（图3-6），但并非巴氏英文名缩写，“HM”成一难解之谜，后来阅读大量评介巴氏的文献才找到答案。“HM”是日本裔画家Hashime Murayama，那些惟妙惟肖的细胞插图皆出自他之手，这是一位几乎被遗忘的为细胞学做出过重大贡献的艺术家（图7）。

图10 20世纪50年代初田纳西州的细胞诊断室（注意墙上所挂图片）

村山桥目（Hashime Murayama）4生于1879年，1905年毕业于京都艺术工业学院，次年到纽约，在康乃尔大学医学院谋到一份技术员工作，从事解剖组织学制备绘图。巴氏较村山晚8年到康乃尔大学，他们办公室比邻，成为好友。凭借其出色绘画，1921年村山被聘为美国国家地理杂志插图画家（图7-9），1941年被解雇。珍珠港事件之后，村山受到敌侨听证会调查，听证会提出拘禁。巴氏代表他的朋友村山向听证会恳请，称这位艺术家的癌细胞绘图对医学的发展至关重要，得到首席检察官比德尔认同，裁决指出村山是美国能够完成这项工作的惟一人选，拘禁被驳回。村山离开国家地理杂志后收到巴氏的邀请，为他提供一份描绘细胞的工作。就村山内心而言，从以画家身份为拥有世界声誉的杂志描绘绚丽多姿的花鸟鱼虫降格为一个普通技术员在医学办公室绘图各类细胞是其人生事业的倒退，但村山别无选择。村山哪里知晓，这是一项伟大医学事业的开始。

宫颈癌研究历史上最主要的一次合作拉开了序幕，巴氏观细胞，村山画细胞！村山依靠投影描绘器的透镜和棱镜将巴氏在镜下观察到的细胞投影到图纸上，然后绘出草图，再增添染料色彩：灰粉色、淡橘色、铁锈蓝和血红色，从1941-1954年村山为巴氏描绘了所有的细胞插图。1952年巴氏说服美国国家癌症协会赞助了大规模的宫颈癌筛查。近150 000名妇女从设在诊所、商场、学校和工厂的简易“巴氏诊所”取材，样本送到田纳西州孟菲斯市的诊断室，那里成排的筛查员在显微镜下细查癌细胞，村山所绘的正常及异常示范图片悬挂在诊断室墙上供参考（图10），这是一次空前胜利的筛查，发现了无症状的557例癌前病变，555例浸润性癌5。如今，宫颈细胞学检查已经成为宫颈癌筛查的标准方法6。

尾 声

巴氏与村山桥目留下的一幅幅精美的图谱像一颗颗珍贵的化石，让我们有幸目睹了当初细胞学诞生时的模样；也像一串串前人留下的足迹，让我们能够回忆起当初细胞学先行者筚路蓝缕走过的道路。从这两位医学家和画家在宫颈癌筛查之中的伟大合作，我们感受到了科学和艺术的完美结合，正如基恩4评论，这是拯救生命的艺术。村山桥目1954年逝世，这一年正是巴氏巨著《脱落细胞学图谱》的付梓之年。他们的精神今天依然激励着我们后来的细胞学工作者，正如巴氏之座右铭所言：我的理想既非富足也非舒适，而是工作、行动和创造，做一个高尚的人，坚强的人。