牛病毒性腹泻诊断方法及综合防治

(武威市畜牧兽医科学研究院，甘肃 武威 733000)

牛病毒性腹泻病毒(简称BVDV)是一种与胃肠道、呼吸系统和生殖系统相关的重要病原体，具有较高的传染性，在全世界内广泛流行。动物感染此类病毒后，会导致动物生产机能下降、产畸形胎或死胎、产奶量下降、食欲减退、呼吸困难等症状，给养殖农户带来巨大的经济损失。在妊娠早期，病毒有通过胎盘的能力，导致胎儿免疫耐受，生产出持续感染的(PI)小牛犊。该病毒在牛犊内长期存在，以各种方式终身排出病毒，并形成传染源，造成病毒在畜群中难以被彻底消灭。持续感染的动物通常比短暂或急性感染的动物更有效地传播BVDV，因为它们能够在一生中排出大量的病毒，被认为是主要的BVDV库。在我国牛群中，BVDV持续感染率高达2.4 %，远远超过很多欧美国家。因此必须要采取有效的防控措施，来阻止病毒的传播。由于病毒感染的性质，到目前为止，还没有完全治愈该病的方法。

1 病原学特征

BVDV属于黄病毒科瘟病毒属的成员，为单股正链 RNA 病毒，基因组大小约12.5 kb，病毒粒子在电镜下观察成球形，直径大约为40～60 nm。按照基因序列的差异，BVDV可分为BVD-1和BVD-2两种基因型。根据病毒感染细胞后，是否产生细胞病变(CPE)。将 BVDV分成两种不同的生物型，致细胞病变型(CP)和非致细胞病变型(NCP)。感染病毒后，两种生物型引起的症状不同，主要表现在疾病的发生和严重程度上不同，这两种生物型在牛群中都会引起疾病。实验表明，牛感染的90 %以上的病毒以及所有PI动物均由NCP引起。据报道，CP型与已经分离的黏膜病的暴发有关系。NCP型在自然界和PI动物中最常见，它对淋巴细胞、白细胞、呼吸道有很强的青睐性。CP型的BVDV起源于NCP的突变菌株。NCP与90 %以上的BVDV感染有关系，可引起轻度感染TI和重度感染PI动物产生。两种生物型引起的症状不同，主要表现在病毒感染后，疾病的发生和严重程度上不同。

2 流行特点

由于气候多变，管理不善，畜体抵抗力下降等因素，造成牛病毒性腹泻病在我国冬春季较为高发。BVDV可通过直接接触病畜传播，也可通过间接吸入受病毒污染的物质传播。经怀孕母畜胎盘传播时，会导致出生的小牛发展为持续性感染(PI)牛，终生带毒、排毒，成为重要的传播来源。该病的传染源多为患病牛，患病牛的粪便、分泌物、部分脏器排出病毒。水平传播主要发生在通过接触病毒脱落的动物，常见的传输介质包括：饲料、水、设备等鼻钳、奶瓶奶嘴和针头、触诊、分泌物和排泄物(尿液、粪便、粘液、牛奶)，马蝇、马蝇、头蝇也有已证明能传播BVDV。垂直传播介质包括：受污染的精液、胚胎移植和改良活疫苗。持续感染的动物持续脱落大量BVDV，存在于全身分泌物中，包括鼻涕、唾液、精液、粪便等。这些动物作为一个主要的病毒库来传播病毒。迄今为止，该病毒已从40多个物种和血清学证据中分离发现，这表明大多数野生反刍动物也会感染BVDV。

3 症状表现

病牛初期精神沉郁、食欲减退或废绝、体温升高至39～41 ℃、白细胞数量减少、发烧、腹泻、脱水、消化道粘液病变、淋巴组织坏死、蹄部炎症、鼻腔有浆液性到粘液性。一般来说，肠系膜淋巴结肿大，水肿，肿胀出血性。在流产的胎儿中，主要病变包括结膜炎、肺炎，胸腺发育不全和非特异性心肌炎。胎盘病变主要包括血管炎，水肿，充血和出血伴有一些变性和坏死。组织病理学显示病变较为严重，外周血淋巴细胞减少和出血，全身淋巴结和淋巴滤泡。

4 诊断方法

4.1 血清学诊断

除了患病动物所表现的临床症状，如腹泻、粪便稀薄、体温升高、眼鼻部出现浆液等典型症状外，血清学诊断也是BVDV最常用的检测方法。通过采集血清，检测血清中BVDV特异抗体来间接诊断。常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、试管凝集试验、琼脂扩散试验等。ELISA检测具有简便、高效、特异性强、高通量等优点，技术较为成熟，且对相关实验人员要求比较低，适合对样本的快速检测。

4.2 分子生物学诊断

主要包括聚合酶链式反应(PCR)、实时定量 PCR(RT-PCR)、核酸探针(Nucleic Acid Probe)、环介导等温扩增(LAMP)等技术，对BVDV进行快速诊断。这些方法各有优点和不足。其中，常规PCR比较简便易行，多用于不同种属的鉴别检测，但容易出现假阳性；荧光定量PCR具有高灵敏度、高通量等优势，但对引物和探针的设计要求比较高；LAMP技术可对乳制品、组织等样本进行检测，具有操作简便、可视性强、特异性高和试验条件要求低等优点，但对引物设计要求很高。

5 防治措施

5.1 提高饲养管理水平

定期对饲养环境进行消毒处理，保持圈舍的清洁通风，冬春季主要防寒保暖，为牛提供一个舒适的生产环境，减少疾病的发生。此外，要合理搭配饲料比例，满足牛的生长发育需求，增强牛的抵抗力、增强体质，预防疾病的发生。

5.2 积极做好免疫接种

通过疫苗接种，让动物体内产生大量的抗体来预防BVDV，降低发病率。目前，国内已经研发了很多疫苗，如牛粘膜病弱毒疫苗、灭活疫苗，都可以用于疾病的预防。

5.3 严格做好检疫工作

对牛群定期进行检查，发现患病动物或者可疑动物，及时进行隔离。做到“早发现、早隔离、早治疗”，对圈舍进行全面消毒，对健康动物进行紧急免疫，控制传染源。对于严重的患病动物，不计得失，尽快淘汰。对引入的外来牛，要严格进行检疫，确保完全健康方可进行混养。

5.4 加强对PI动物的检测

目前世界上许多国家采用的防控方案，主要依靠对PI动物的检测，消灭它们或阻止它们返回牧群。在早期阶段，特别是出生后不久，检测PI动物是非常有益的。执行BVDV控制程序，可用的诊断试验，如病毒分离(VI)、免疫组织化学(IHC)，用抗原捕获ELISA(ACE)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PI牛。每种检测BVDV的方法都有其优点、缺点和适用于不同的诊断情况。根据动物年龄选择合适的抽样策略，优化诊断试验。

6 结束语

综上所述，牛病毒性腹泻的发病率较高，给养殖户带来巨大的经济损失，如果不及时进行治疗，会导致极高的病死率。因此，在日常的养殖中，要加强饲养管理，增强动物的抗病能力，定期对牛群开展检疫工作，定期进行相关检查，为减少疾病的发生率提供科学支撑。