唐 萍,李书敏
(连云港师范高等专科学校海洋港口学院,江苏连云港 222006)
作为一种农业物理技术,磁处理技术具有生理损伤小、简便易操作的特点[1],在医学、农林、环保和生物工程等方面得到了广泛应用。磁处理技术可以产生多种生物学效应[2-5]:有时可以起到促进植物生长发育的作用;有时对植物具有负生物学效应,可以抑制植物生长[6]。何铭章研究了磁场对玉米种子的影响,发现磁场可使玉米加快生长,并能增加叶面积[7]。Dhindsa RS 用一定强度的磁场处理烟草幼苗,发现其生长状况以及叶片中的酶活力都有明显的变化[8]。Ramalingam 等人发现,磁场能促进大豆玉米过氧化物酶活性[9]。李香勇等人发现,用适宜的磁场处理绿豆种子,可以产生应激反应,增加绿豆的抗胁迫性[10]。
芽苗菜是植物种子在适当条件下发育而成的幼嫩的苗、茎或芽,可以用来烹制菜肴。芽苗菜具有丰富的营养,因没有受到农药和激素的污染而被称为绿色食品。芽苗菜具有药用价值和保健功能,是经济价值较高的绿色食品[11-13]。作为一种新型蔬菜,芽苗菜利于消化吸收,又具抗氧化等多种功效,受到人们的追捧。白杆萝卜(Raphanus sativus L.)为十字花科萝卜属,具有下气消食、除痰润肺、解毒生津、增强机体免疫功能的功效。本实验以白杆萝卜种子为实验材料,用40 mT—80 mT 和80mT—100 mT 两种磁场强度,对实验组分别处理5 min、10 min、15 min,与未经磁场处理的对照组进行比较,分析不同磁场强度和处理时间下白杆萝卜的发芽率,芽苗的茎长、茎重和多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性,以期获得有助于提高白杆萝卜芽苗菜产量和品质的技术手段。
电子天平,恒温水浴箱,752 N 型紫外分光光度计,Centrifuge 5804 R 型冷冻离心机,SXG 毫特斯拉计,100 mm×50 mm×10 mm 铷铁硼强磁铁。
将购于种子站的颗粒饱满的白杆萝卜种子浸泡、保湿至萌动,按每组50 粒设实验组,用40 mT—60 mT和80 mT—100 mT 的磁场强度分别处理5 min、10 min、15 min。另选50 粒设立对照组。各处理组分别放置在有适量湿润沙土的瓷盘中,在适宜的条件下进行萌发培养。每组设3 组重复。
培养3 天后统计发芽率,10 天后开始测量茎长、茎重。每组分别取茎2 g,加入适量缓冲液于冰浴条件下研磨,在4 ℃条件下,1 2000 r/min 离心20 min,收集上清液备用。
过氧化物酶(POD)活力、多酚氧化酶(PPO)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力的测量,分别采用氯化硝基氮蓝四唑光照还原法[14]、分光光度计法[15]、愈创木酚法[16]。
播种第3 天,统计白杆萝卜种子在不同磁场强度和处理时间下的发芽率(见表1)。表1 数据显示,经过磁场处理的白杆萝卜发芽率都高于对照组的发芽率;在同一强度的磁场处理下,随着磁场作用时间的延长,发芽率呈现增加趋势;经同样的处理时间,随着磁场强度的增加,发芽率也呈现增加趋势。其中,种子经40 mT—60 mT 的磁场处理15 min 的发芽率比处理5 min 的发芽率高出27%;经在80 mT—100 mT 的磁场处理15 min 的发芽率比处理5 min 的发芽率高15%。与经40 mT—60 mT 的磁场处理的种子相比,经80 mT—100 mT 的磁场处理的种子发芽率在3 个处理时间分别高出17%、14%、5%。当以80 mT—100 mT的磁场处理15 min 时,种子发芽率最高。可见,实验采用的磁场强度能促进白杆萝卜种子的发芽。
表1 磁场对白杆萝卜发芽率的影响
发芽后第10 天,测量白杆萝卜幼苗的茎长、茎重(见表2、表3)。从表2、表3 可以看出,实验组白杆萝卜幼苗的茎长和茎重都高于对照组。茎长和茎重的变化在40 mT—60 mT 和80 mT—100 mT 强度下的发展趋势相同;随着磁场处理时间的延长,茎长、茎重增加的比例增大。相比于对照组,在40 mT—60 mT 的磁场中,实验组幼苗经处理5 min 时茎长为0.86 cm,经处理15 min 时茎长为1.39 cm;经处理5 min 时茎重为0.064g,经处理15 min 时茎重为0.1258 g。在80 mT—100 mT 的磁场中,实验组幼苗经处理5 min 时茎长为0.76 cm,经处理15 min 时茎长为2.01 cm;经处理5 min时茎重为0.0802 g,经处理15 min 时茎重为0.1556 g。可见,经80 mT—100 mT 磁场处理15 min 时,白杆萝卜幼苗的茎长、茎重达到最大值。
表2 磁场对白杆萝卜茎长的影响
表3 磁场对白杆萝卜茎重的影响
利用氯化硝基氮蓝四唑光照还原法检测SOD 活性,结果见图1。经过磁场处理的白杆萝卜幼苗的SOD 表现出应激性增加的特点。经40 mT—60 mT 的磁场处理5 min 的幼苗,其酶活性比未经处理的幼苗高80%。经80 mT—100 mT 的磁场处理5 min 的幼苗,其酶活性比未经处理的幼苗高67%。在同一磁场强度下,幼苗SOD 酶的活性随着时间的延长逐渐降低;在相同的处理时间下,40 mT—60 mT 的磁场处理对幼苗SOD 活性的诱导值略高于80 mT—100 mT 磁场的诱导值。由此可见,白杆萝卜的SOD 活性对磁场反应较敏感,在40 mT—60 mT 的磁场强度下,5 min内即升至最高值。
图1 磁场对白杆萝卜SOD 酶活性的影响
利用分光光度计法对PPO 活性进行检测,结果见图2。在两个不同的磁场强度处理下,与对照组相比,实验组种子在处理5 min 时,其PPO 活性未见增加;随着时间的延长,实验组PPO 活性都高于对照组。在40 mT—60 mT 的磁场中处理15 min,实验组PPO 活性比对照组高88%;在80 mT—100 mT 的磁场中处理15 min,实验组PPO 活性比对照组高64%。两个实验组的测定数据表明,随着实验时间的延长,PPO 活性在不断增加。在40 mT—60 mT 的磁场强度下处理15 min,PPO 活性达到最大值。
图2 磁场对白杆萝卜PPO 酶活性的影响
利用愈创木酚法测定POD 活性,结果见图3。在受到磁场作用后,实验组POD 活性都高于对照组,且在一定磁场强度条件下,POD 活性随着磁场处理时间的延长而增强。在40 mT—60 mT 的磁场中经3 个时长进行处理,实验组POD 活性比对照组分别高出25%、60%、96%。在80 mT—100 mT 的磁场中经3 个时长进行处理,实验组POD 活性分别比对照组高出26%、50%、98%。在80 mT—100 mT 的磁场强度下处理15 min,POD 活性上升幅度最大。
图3 磁场对白杆萝卜POD 酶活性的影响
白杆萝卜的发芽率、幼苗茎重和茎长在磁场作用下都会增加。当磁场强度为80 mT—100 mT、处理时间为15min 时,三者均达到最大值。这可能是由于磁场处理活化了水分子,催化生物大分子特别是水解酶和氧化还原酶活性的增强,加强了种子萌发时蛋白质和淀粉的水解过程,使得代谢速率加快,种子的发芽势以及茎长、茎重都大幅度上升[17-18]。
SOD 酶对植物的抗氧化有重要作用,能够将氧自由基转化为过氧化氢,并解除自由基氧化体内的组成成分,从而避免给机体造成损害。在一定磁场强度的刺激下,白杆萝卜体内SOD 活性的应激性会增强。随着磁场作用时间的延长,SOD 活力会逐渐下降。在40 mT—60 mT 的磁场中作用5 min 内,SOD 活性上升至最高值。
POD 广泛存在于植物体中,是活性相对比较高的一种酶,能将过氧化氢还原,可以延缓衰老[19-20]。磁场也可以刺激白杆萝卜POD 活性,POD 活性也随着磁场处理时间的延长而增强。
PPO 是一类广泛存在于植物、动物和真菌中的金属蛋白酶。PPO 能把植物中的酚氧化成醌,可以抑制病菌的生长,有利于提高植物的存活率和抵抗病菌的侵害。适宜的磁场强度能对白杆萝卜的PPO 活性产生刺激,可以提高白杆萝卜幼苗对病菌的防御能力,提高其生存率[10]。实验表明,白杆萝卜幼苗PPO 在磁场作用下随着时间的延长,其活力也逐渐增大。
实验表明,白杆萝卜无论是发芽率、茎长、茎重,还是体内各种酶的活力,都会在磁场的作用下发生变化。其中,白杆萝卜的发芽率、茎长、茎重在磁场作用下呈增加的趋势;POD 以及PPO 在相同磁场强度条件下,其活力会随着处理时间的变长而变大;SOD 则延续表现出先上升后下降的趋势。将一定强度的磁场作用于白杆萝卜种子,可以增加芽苗菜的产量与营养价值。