昆明市海口林场松材线虫病调查报告

李云松

(昆明市海口林场，云南 昆明 650114)

1 引言

松材线虫病是一种传染性强、蔓延速度快、危害后果严重的森林病害。在松材线虫病爆发严重的年份，会带来严重的经济损失、生态损失。在上级领导重视与支持下，昆明市海口林场于2018年开始全面启动松材线虫病的调查工作，并在每年的春、秋两季，分别进行一次调查，通过掌握松褐天牛寄生线虫的比例和线虫的类型，总结松材线虫病的发生规律等，为开展该病的防控工作提供了必要的支持。

2 材料与方法

2.1 试验材料

本次试验所用材料，均从昆明市海口林场中获取。

2.2 试验方法

2.2.1 室内松褐天牛不同羽化期携带线虫数的测定试验

于2019年的9、10月份，从海口林场内随机选取死亡或枯萎的木材，共计50根。为了方便试验，将其锯成高度为150 cm，直径在10～12 cm的木段。另外设置规格为120 cm×120 cm×120 cm的养虫笼[1]。从2020年成虫羽化开始直到结束。在整个试验周期内，每天记录一次羽化成虫的数量，并分别统计雌性与雄性成虫数量。此外，采用随机抽样的方法，测定羽化成虫携带线虫的数量。测量方法为：将随机抽选到的羽化松褐天牛，用剪刀剪成3～5个小块，然后放于盛有10 mL去离子水的安瓿瓶中。轻轻晃动，然后静置约12 h。用移液枪抽取上层液体0.2 mL，均匀滴在2个载玻片上，移动至低倍显微镜下进行观察。记录观察到的线虫数量，然后将数量扩大50倍，近似为10 mL去离子水中松材线虫的总数[2]。

2.2.2 林内松褐天牛不同羽化期携带线虫数量的测定试验

在2020年5、6月份，于海口林场内随机防止昆虫诱捕器，一段时间后取回诱捕器，并将内部的松褐天牛取出。根据羽化期的不同，分成3部分，5月上、中旬为初期，5月下旬及6月上旬为中期，6月中旬、下旬为后期[3]。在测定方法上与上文一致。

2.2.3 诱木中线虫数量的测定试验

在2020年4、5月份，随机挑选出10段诱木，在每段上设置3～4个样本点。保证取样点均位于树干，且木段木丝为自然状态的含水量，每个样本点上各选择2 g木丝。将选取的样品，用贝尔曼漏斗分离法进行分离、镜检，可以测得每个木段中线虫的数量[4]。在试验过程中，如果发现线虫密度过大，无法准确的统计数量，则可以采用稀释法，稀释一定倍数后，统计线虫数，然后再乘以稀释倍数，可以得到近似数值[5]。

3 结果

3.1 室内松褐天牛不同羽化期携带线虫数量

本次试验中的松褐天牛，从2020年的5月份开始羽化，至7月末结束。统计结果显示，养虫笼内共有松褐天牛134只。其中，有37只携带线虫，占比为27.6%。37只松褐天牛中，共统计到各类线虫18907条，平均每只松褐天牛携带511只线虫。通过初步分类，这些线虫中拟松材线虫数量为7662条，其他线虫数量为11245条。每只松褐天牛最少携带数为86只，最多携带数为2115只。具体情况如表1所示。

表1 室内松褐天牛不同羽化期携带线虫的数量 只

3.2 林内诱捕松褐天牛不同羽化期携带线虫数量

在诱捕器内共捕获松褐天牛114头，其中有25只携带线虫，占比为21.9%。统计携带各类线虫总数为10725只，平均每只松褐天牛携带429只松材线虫。通过初步分类，这些线虫中拟松材线虫数量为3628条，其他线虫数量为7097条。最少携带数为61条，最大携带数为1884条。按照上述方法，将松褐天牛按照羽化期分成3个阶段，5月上、中旬为初期，5月下、6月上旬为中期，6月中、下旬为后期。不同羽化期的松褐天牛携带线虫数量如表2所示。

表2 林内诱捕松褐天牛不同羽化期携带线虫数量 只

4 讨论

4.1 松褐天牛携带线虫数量方面

通过对比可以发现，室内刚羽化的松褐天牛，每只携带的线虫平均数为511条，而林内诱捕的松褐天牛，每只携带的线虫平均数为429条，两者之间的差距较为明显。究其原因，可能与松褐天牛的获取方式有关。在林内诱捕试验中，为了吸引松褐天牛进入到诱捕器内，试验人员会事先在诱捕器内放置一定量的食物[6]。进入到诱捕器的松褐天牛，可以获得较为丰富的食物。部分线虫已从天牛取食的松树嫩梢伤痕进入寄主，松褐天牛成虫体上分离的仅是滞留的部分线虫；而从罹病木截获的刚羽化的松褐天牛成虫未经补充营养，携带的线虫未进入寄主树体[7]。

4.2 不同羽化期松褐天牛携带线虫数量方面

在室内获取的松褐天牛中，羽化后期成虫携带线虫的数量，相比于前期有了一定幅度的下降[8]。以雄性松褐天牛为例，后期羽化成虫的线虫平均携带数量为513条/只，而前期这一数据为538条/只。相比之下，林内捕获的松褐天牛中，羽化后期成虫携带线虫的数量，则比前期有了较为明显的提升。还是以雄性松褐天牛为例，前期数值为459条/只，后期该数值则达到了569条/只。分析其原因，可能与羽化后期，室内枯死木段线虫赖以生存的湿度与温度以及营养条件与外界相差太大，线虫存活量大大减少有关[9]。

5 结语

昆明市从2018年开始，加强了对松材线虫病的调查、研究，通过研究判断掌握了各类线虫的发生规律、活动特点。现有的实验数据表明，海口林场内有一定数量的拟松材线虫和其他线虫，但是未发现有松褐天牛携带松材线虫，说明现阶段海口林场还未有松材线虫病发生，但是仍然需要引起警惕。下一步还要继续进行更加深入和广泛的调查研究，通过扩大样本数量、降低数据误差，提高分析的精度，从而指导海口林场松材线虫病防控工作的更好开展。