NDRG2和AKT2蛋白在原发性肝癌患者中的表达及与病理的相关性研究

吴美花

(泉州市第一医院病理科，福建 泉州 362000)

原发性肝癌是我国发生率较高的恶性肿瘤，好发于东南沿海地区，多发生在40～50岁人群中，且男性发病率略高于女性[1]。原发性肝癌病因复杂，普遍认为与肝硬化、病毒性肝炎、黄曲霉素等化学致癌物质有关，发病早期临床症状不显著，随着病情不断发展可表现为肝区疼痛、消化道症状及肝大等，影响患者的健康和生活[2]。N-myc下游调节基因2(NDRG2)是抑制肿瘤细胞的基因之一[3]。既往研究[4]表明：丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)蛋白在原发性肝癌患者中呈高表达，能参与疾病的发生、发展。因此，本研究以原发性肝癌患者作为对象，探讨NDRG2和AKT2蛋白在原发性肝癌患者中的表达及与病理的相关性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：选择2017年6月～2019年4月原发性肝癌患者73例作为对象，男46例，女28例，年龄43～71岁，平均(58.49±4.61)岁；肿瘤直径1～8 cm，平均(4.10±0.73)cm；分化类型：高分化32例，中分化28例，低分化13例；淋巴结转移：是31例，否42例；病理类型：肝细胞肝癌35例，胆管细胞性肝癌20例，混合型肝癌18例；肿瘤分期：Ⅰ级～Ⅱ级49例，Ⅲ级～Ⅳ期24例。两组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究均获得医院伦理委员会批准。

1.2方法：NDRG2和AKT2蛋白测定。①标本采集：所有患者均拟行手术治疗，术中取病灶组织与癌旁组织(距离病灶≥3 cm)。②检测方法：采用免疫组织化学法测定不同组织中NDRG2和AKT2蛋白阳性表达；取上述采集的标本，完成石蜡包埋后进行切片，常规脱蜡处理，完成抗原修复后，采用双氧水将内源性过氧化物酶活性消除，给予血清封闭后加入NDRG2和AKT2蛋白抗原，控制抗体浓度1∶200，持续过夜反应后加入二抗，反应后完成玻片的清洗，采用DAB常规显色，苏木素复染后，常规梯度酒精脱水，中性树胶封片后，倒置显微镜下观察组织形成。③判断方法：阳性：病变细胞位于细胞核中，呈红棕色；阴性：未发现一个细胞红染。计算并比较两组阳性表达率[5]。不同病理下NDRG2和AKT2蛋白表达。查阅病理资料，记录患者性别、年龄、肿瘤直径、病理类型、分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移，分析不同病理状态下NDRG2和AKT2蛋白表达。

2 结果

2.1不同组织中NDRG2和AKT2蛋白阳性率比较：原发性肝癌患者病灶组织中NDRG2和AKT2蛋白阳性率均高于癌旁组织中，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 不同组织中NDRG2和AKT2蛋白阳性率比较[例(%)]

2.2不同病理下NDRG2和AKT2蛋白表达：原发性肝癌组织中NDRG2和AKT2蛋白阳性率与性别、年龄及病理类型无统计学意义(P>0.05)；与肿瘤直径、分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

3 讨论

原发性肝癌是临床上常见的恶性肿瘤，发病早期临床症状缺乏典型性，且随着患者病情的不断发展，临床多表现为疼痛、全身症状等，导致临床诊断、治疗难度较大。NDRG2是一个在多种恶性肿瘤细胞系中呈高表达的基因，在人中枢神经系统的大脑皮质、白质、神经核、神经细胞同样属终末分化的唾液腺细胞，且在骨骼细胞中亦呈高表达[6]。临床研究[7]表明：NDRG2能参与细胞的增殖与分化，能促进肿瘤细胞系，属于是一种促癌基因。国内学者研究表明：NDRG2在原发性肝癌组织中表达较高，能直接参与肿瘤的发生、发展及转归。AKT2蛋白是PI3K-AKT信号通路的重要组成部分，在原发性肝癌的发生、发展中发挥了重要作用。本研究中，原发性肝癌患者病灶组织中NDRG2和AKT2蛋白阳性率均高于癌旁组织中，差异有统计学意义(P<0.05)，说明NDRG2和AKT2蛋白在原发性肝癌中呈高表达，能直接参与疾病的发生、发展。国内学者[8]以原发性肝癌患者12例作为对象，所有患者均完成NDRG2和AKT2蛋白测定，结果表明：NDRG2和AKT2蛋白在原发性肝癌中呈阳性表达，与本研究结果相符。为了进一步分析NDRG2和AKT2蛋白在原发性肝癌中的作用及在不同病理中的表达，本研究中分析原发性肝癌患者不同病理下NDRG2和AKT2蛋白情况，结果表明：发性肝癌组织中NDRG2和AKT2蛋白阳性率与性别、年龄及病理类型无统计学意义(P>0.05)；与肿瘤直径、分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移具有统计学意义(P<0.05)，说明NDRG2和AKT2蛋白与原发性肝癌病理存在明显的关系，其表达水平能较好的反映患者疾病严重程度。原发性肝癌以手术、放化疗为主，通过手术虽然能切除病灶组织，但是远期预后较差，局部复发率较高；而放化疗属于是一种全身治疗方法，毒副反应发生率较高，导致患者治疗耐受性较差，积极采取有效的措施降低NDRG2和AKT2蛋白表达水平能为原发性肝癌治疗提供新的思路。

表2 不同病理下NDRG2和AKT2蛋白表达(例)

综上所述，NDRG2和AKT2蛋白在原发性肝癌患者中呈高表达，且与病理存在紧密的联系，有望成为原发性肝癌治疗新靶点。