仔猪圆环疫苗免疫程序研究

吴丽艳，赵永旭，李慧

（1.佳和农牧股份有限公司 长沙 410016；2.浙江诗华诺倍威生物技术有限公司 杭州 310018）

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2 型（PCV-2）引起的猪相关疾病的总称，主要包括断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）和母猪繁殖性疾病等[1]。由于猪群感染PCV-2 后，机体免疫功能受到损害，并造成并发或继发感染，给养猪业造成巨大的经济损失。

目前对圆环疫苗的使用的效果评估耗时且难度大，常规的PCR 检测结果并不能确诊已经发生圆环病毒病，需依据临床症状、病理组织学检查和荧光定量PCR 检测或免疫组化（免疫荧光）三方面的结果进行综合诊断。Lóp e z-Soria 等人的研究表明，PCV-2病毒血症和病毒载量的减少程度可作为评估圆环疫苗免疫保护效果的重要实验室检测指标[2-6]。采用荧光定量PCR 进行免疫后仔猪血液中的病毒载量比较，可快速、准确评估圆环疫苗的免疫效果[7]。

本试验通过使用不同厂家圆环疫苗对猪群进行免疫，通过日增重、料肉比、死亡率、PCV-2 抗体水平以及仔猪血液中的病毒载量比较，评估不同圆环疫苗的实际免疫效果。通过对仔猪圆环疫苗免疫效果的评估，积累检测数据，验证检测方法，为定量检测PCV-2 病毒载量的实际应用提供参考依据。

1 试验材料与方法

1.1 试验动物及材料

选择某规模猪场21 日龄健康、体重相近的断奶仔猪70 头为试验动物开展试验。

试验用疫苗：某国产A 厂家圆环灭活疫苗（2mL/ 头份）。

1.2 试验设计与分组

将70 头断奶仔猪，随机分为4 个组，每组10～20 头。实验1组为阴性对照组，不免疫圆环疫苗；实验2 组在3 周龄肌注2mL圆环苗；实验3 组在6 周龄时肌注圆环苗2mL；实验4 组在3 周龄、5 周龄时分别肌注1mL圆环苗。各组除圆环苗免疫外，其他的疫苗免疫程序均按本场现有的免疫程序进行。试验的具体分组情况见表1。

表1 试验分组及免疫程序

1.3 观测指标

1）免疫应激反应观察：观察仔猪在圆环疫苗免疫后的应激反应，包括观察猪只的精神状态、食欲及异常猪情况。

2）详细记录试验期间每组猪的耗料量，称量每组猪的期初重和期末重。计算料肉比、日增重。

3）准确记录试验期间发病猪的头数及其用药治疗情况，记录死亡猪的头数，计算死亡率。

4）抗体检测：①采样时间与标准：全部仔猪打耳号标记，按照耳号跟踪采血，具体采样检测时间点如表2；②检测方法：采用Synb iotic s ELISA 定量检测PCV-2 抗体。

表2 采血时间表

5）病毒载量检测：①采样时间与标准：同抗体检测；②检测方法：采用LSI生产的q PCR 试剂盒定量检测PCV-2 病毒载量。

1.4 记录与数据处理

记录下各项观察指标数据，试验结束时对组间数据进行差异性分析。

2 结果

2.1 抗体检测

2.1.1 抗体滴度平均值由表3、图1 可知，各组均呈现出抗体滴度下降后再上升的趋势，在14 周龄时抗体滴度达最低。

表3 不同圆环疫苗免疫组对不同日龄猪抗体滴度平均值的影响

图1 不同圆环疫苗免疫组对不同日龄猪抗体滴度平均值的影响

2.1.2 阳性率由表4、图2 可知，各组均表现出阳性率先降后升的趋势，在14 周龄时抗体阳性率达最低点。

表4 不同圆环疫苗免疫组对不同日龄猪抗体阳性率的影响

图2 不同圆环疫苗免疫组对不同日龄猪抗体阳性率的影响

2.1.3 离散度由表5、图3 可知，在试验期各阶段各组的抗体离散度高低差别较大，各组的圆环抗体水平整齐度不太理想，这与母源抗体水平及各阶段的免疫、感染情况不同有很大关系。

表5 不同圆环疫苗免疫组对不同日龄猪抗体离散度的影响

2.2 病毒载量检测

由表6 可知，除对照组18W 外，各阶段病毒含量均较低，说明本场圆环感染压力较小。

图3 不同圆环疫苗免疫组对不同日龄猪抗体离散度的影响

表6 不同圆环疫苗免疫组对不同日龄病毒载量的影响

2.3 生产指标与效益评估

由表7 可知，各组期初均重为7.03～7.11kg，期末均重为108.38～110.88kg，平均净增重为101.35～103.77kg，平均日增重为0.62～0.63kg/d，平均日采食量为1.45～1.55kg/d，料肉比为2.32～2.47。各组在期初重、期末重、平均净增重、平均日增重等指标上均无明显差异；在平均日采食量和料肉比上有一定优劣。1组的平均日采食量最高，3 组的平均日采食量最低；1 组料肉比最高，4 组料肉比最低。

表7 不同圆环疫苗免疫组对生产性能指标的影响

由表8 可知，1～4 组头均总成本为2,405.66～2,448.46 元，其中1 组头均总成本最高，3 组的头均总成本最低。1～4 组头均毛利润为1,496.02～1,569.78元，其中3组头均毛利润最低，4组头均毛利润最高。1～4组头均回报率为61.81%～64.82%，其中1组头均回报率最低，4组头均回报率最高，因此，4组的经济效益最好，1组经济效益最差。

表8 不同圆环疫苗免疫组经济效益对比情况

3 讨论分析

综合圆环抗体与病毒载量检测结果可知，整个饲养周期各组病毒含量均控制在较低水平，说明本场圆环感染压力较小。阴性对照组在18周出现较高病毒血症，说明有圆环后期感染情况的发生，这同母源抗体消失有关，与相关研究结果相符[8]。从后期的病毒血症来看，免疫组的病毒载量明显低于对照组。而抗体水平最低点出现的时间点与母源抗体水平、免疫时间及免疫次数关系密切。从对照组抗体水平来看，免疫得当的母猪的母源抗体可以持续至第14周龄。

试验结果显示，免疫两次的试验4组比免疫一次试验2组免疫效果好。虽然双针免疫方案的效果肯定优于单针免疫方案，但如果单针免疫方案的抗体可以完全或部分清除体内的圆环病毒，使得圆环病毒的危害不表现出明显临床症状和损失，在生产数据上就会表现出单针免疫方案和双针免疫方案的经济效益基本相当[9]。

首免时间为6周龄的试验3组比首免日龄为3周龄的试验2组免疫效果好。因此针对母猪已免疫圆环疫苗的猪群，首免日龄需根据母抗监测情况适度调整，高母源抗体会干扰疫苗抗体的产生，从而影响疫苗效果，需要根据母源抗体监测来调整首免时间，从而减少母源抗体的干扰。

由于本场圆环感染压力小，全程各组病毒血症均低于107/m L，因此无明显临床症状，但由于阴性对照组猪群缺乏疫苗保护，在饲养后期18周龄时已感染PCV-2，病毒载量在105/m L左右，虽然没有明显临床症状（明显临床症状，病毒载量需要＞107/m L），但由于隐性感染已造成生产成绩的降低，因此料肉比最高，效益最差。

4 小结

1）本试验通过对不同免疫时间、免疫剂量组仔猪进行圆环抗体和病原载量监测，结合生产性能指标分析，对本场的圆环免疫程序进行了摸索，实验室检测结果、生产数据分析以及经济效益评估均显示免疫组优于对照组，因此圆环苗的免疫对仔猪圆环的免疫保护及提高生产效益都是有益的。

2）因圆环免疫效果受母源抗体、首免时间、免疫次数等影响，对感染压力不同的场，对种猪和商品猪圆环疫苗免疫方案的选择也有所不同。

3）建议通过病毒血症监测评估猪场感染压力，针对感染压力小且无育肥猪的猪场，可只免母猪，商品猪不免；针对感染压力大且有育肥猪的猪场，可种猪、商品猪均免。通过监测猪场的圆环母源抗体水平，母源抗体水平高的话，可适当推延首免时间，且进行加强免疫。