C-myc过表达促进宫颈上皮内瘤变的Meta分析

熊敏涵，秦恩杰，袁炜，孟沙，沐超，成莹，胡新荣

·调查与研究·

C-myc过表达促进宫颈上皮内瘤变的Meta分析

熊敏涵，秦恩杰，袁炜，孟沙，沐超，成莹，胡新荣

523000 东莞，广东医科大学基础医学院病理教研室

宫颈癌（cervical cancer，CC）是我国最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一，对女性健康造成了巨大的威胁。据报道，近年来我国每年新发宫颈癌患者 10 万余人，宫颈癌患者的死亡率为 2.60/10 万[1]。随着对宫颈癌发病机制研究的进一步深化，发现宫颈癌的发生、发展与原癌基因的表达失衡、细胞生长周期的调节紊乱等因素存在密切关系[2]。宫颈上皮内瘤变（cervical intra-epithelial neoplasia，CIN）与宫颈癌密切相关，其中，宫颈 CIN II ~ CIN III 具有发展为宫颈癌的潜在风险。进行宫颈癌致病机制的研究，积极寻找可靠的诊治靶点，对于提高宫颈癌患者的生存率、改善患者预后具有重要意义。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 研究类型 国内外公开发表的、并提供原始数据的 C-myc 蛋白在 CINs 中表达差异的病例-对照研究，文种限中、英文。C-myc 蛋白检测方法为链菌素亲生物素-过氧化物酶免疫组织化学法（SP 法，阳性界定值 > 10%）。

1.1.2 纳入标准 ①全部受试者取材前都未经放疗或化疗；②病例诊断标准明确，研究方法相似，且为病例-对照研究；③全部受试者不界定种族和国籍。

1.1.3 排除标准 ①无相应对照组及对照来源；②非 SP 法或阳性判定标准不一致；③相同作者重复报道；④综述和摘要。

1.2 检索策略

检索自数据库建库到 2019 年 10 月期间 CNKI、PubMed、Embase、 Medline、CBMdisc、维普及万方等数据库，并辅以文献追溯的方法。中文检索词包括宫颈上皮内瘤变、病例对照研究。英文检索词包括 C-myc；cervical intraepithelial neoplasias；case-control study。

1.3 文献筛选与资料提取

文献的筛选、提取由两位研究人员独立进行，最终根据纳入与排除标准决定文献是否被纳入。提取内容包括：文题、编号、作者姓名、发表年限、纳入病例年龄范围、样本大小、CINs 中 C-myc 表达阳性例数等。

1.4 统计学处理

首先通过 RevMan5.3 对各个纳入研究进行程序性操作分析。其中效应量的选择经查找相关资料，选定优势比（OR）和 95% 可信区间（95%CI）。先对所纳原始数据行异质性检验（χ2检验，α = 0.1）。采用值及2进行异质性检验，若> 0.10，各研究间不存在异质性，若< 0.10，研究间存在异质性。2代表研究间的异质性水平，可分为4 级：0 ~ 40% 表示各研究间存在轻度异质性；40% ~ 60% 表示各研究间存在中度异质性；60% ~ 75% 表示各研究间异质性较大；75% ~ 100% 表示各研究间存在非常大的异质性。根据 Cochrane 建议，推荐2不宜大于 40%，其异质性可以接受，采用固定效应模型进行分析；反之异质性较大，采用随机效应模型，需通过敏感性分析，寻找到异质性原因，以消除其影响。

2 结果

2.1 文献检索结果

初步检索 345 篇相关文献，经严格标准筛选后，共纳入 10篇[3-12]文献，共1744 例受试者，包含正常宫颈（NC 组） 302 例和 CINs 968 例（其中 CIN I 337 例、CIN II303 例、CIN III 328 例），宫颈癌组 474 例。文献筛选流程见图 1。

2.2 纳入研究的基本特征和方法学质量评价

其中 10 个研究报道了 NC 组、 CIN I级、CIN II级、CIN III级、宫颈癌组中 C-myc 的蛋白表达情况[3-12]。纳入研究相关信息和 NOS 评分见表 1。

2.3 Meta 分析结果

2.3.1 CIN 组与 NC 组 共 10 个研究报道了 CIN 组（968 例）与 NC 组（302 例）中 C-myc 蛋白表达情况[3-12]。森林图显示2= 55%，= 0.02，各组间存在中度异质性，符合随机效应模型条件，可知关于 C-myc 蛋白表达阳性率，CIN 组大于 NC 组[OR = 10.74，（4.34，26.55），< 0.00001]（图 2）。

2.3.2 宫颈癌组与 CIN 组 共 10 个研究报道了宫颈癌组（474 例）与 CIN 组（968 例）中 C-myc 蛋白表达情况[3-12]。森林图显示2= 66%，= 0.002，各组间存在高度异质性，符合随机效应模型条件，可知关于 C-myc 蛋白表达阳性率，宫颈癌组大于 CIN 组[OR = 7.79，95%CI（4.51，13.45），< 0.00001]（图 3）。

图 1 文献筛选流程与结果

表 1 纳入研究基本特征和 NOS 评分

2.3.3 CIN I与 NC 组 共 10 个研究报道了 CIN I组（337 例）与 NC 组（302 例）中 C-myc 的蛋白表达情况[3-12]。森林图显示2= 33%，= 0.14，各组间无异质性，符合固定效应模型条件，可知关于 C-myc 表达阳性率，CIN I组大于 NC 组[OR = 5.83，95%CI（3.26，10.44），< 0.00001]（图 4）。

2.3.4 CIN II组与 CIN I组 共 10 个研究报道了 CIN II 组（303 例）与CIN I组（337 例）中 C-myc 的蛋白表达情况[3-12]。森林图显示2= 32%，= 0.15，各组间无异质性，符合固定效应模型条件，可知关于 C-myc 表达阳性率，CIN II组大于 CIN I组[OR = 2.24，95%CI（1.55，3.24），< 0.0001]（图 5）。

2.3.5 CIN III组与 CIN II组 共 10 个研究报道了 CIN III组（328 例）与 CIN II组（303 例）中 C-myc 的蛋白表达情况[3-12]。森林图显示，2= 27%，= 0.20，各组间无异质性，符合固定效应模型条件，可知关于 C-myc 表达阳性率，CIN III组大于 CIN II组[OR = 3.48，95%CI（2.40，5.06），< 0.00001]（图 6）。

图 2 CIN 组与 NC 组 C-myc 蛋白表达的 Meta 分析

图 3 宫颈癌组与 CIN 组 C-myc 蛋白表达的 Meta 分析

图 4 CIN I 与 NC 组 C-myc 蛋白表达的 Meta 分析

2.3.6 宫颈癌组与 CIN III组 共 10 个研究报道了宫颈癌组（474 例）与CIN III组（328 例）中 C-myc 的蛋白表达情况[3-12]。森林图显示2= 72%，= 0.0002，各组间存在高度异质性，符合随机效应模型条件，可知关于 C-myc 表达阳性率，宫颈癌组大于 CIN III组[OR = 2.95，95%CI（1.38，6.33），= 0.005]（图 7）。

2.3.7 敏感性分析 为探究各研究间的异质性是否由单个研究引起的，本研究就具有中高度异质性的 CIN 组与 NC 组、宫颈癌组与CIN 组、宫颈癌组与CIN III组的研究进行敏感性分析，通过逐个剔除单个研究对合并效应进行分析，见表 2 ~ 4。

CIN 组与 NC 组中纳入所有研究的 C-myc 蛋白表达的合并效应为OR = 10.74，95%CI（4.34，26.55），2=

55%，< 0.00001。表 2 中显示剔除刘海青[5]的研究后，OR = 7.96，95%CI（3.92，16.14），2= 26%，< 0.00001，异质性显著降低。剔除其他单个研究后，OR 为9.46 ~ 13.22，2为 48% ~ 61%，< 0.00001，异质性变化不明显。

图 5 CIN II 组与 CIN I 组 C-myc 蛋白表达的 Meta 分析

图 6 CIN III 组与 CIN I 组 C-myc 蛋白表达的 Meta 分析

图 7 宫颈癌组与 CIN III 组 C-myc 蛋白表达的 Meta 分析

宫颈癌组与 CIN 组中纳入所有研究的 C-myc 蛋白表达的合并效应为OR = 7.79，95%CI（4.51，13.45），2= 66%，< 0.00001。表 3 中显示剔除车爱文[8]的研究后，OR = 6.40，95%CI（4.03，10.17），2= 50%，< 0.00001，异质性降低较明显。剔除其他单个研究后，OR 为7.17 ~ 8.81，2为 61% ~ 69%，< 0.00001，异质性变化不明显。

宫颈癌组与 CIN III组中纳入所有研究的 C-myc 蛋白表达的合并效应为OR = 2.95，95%CI（1.38，6.33），2= 72%，= 0.0002。表 4 中显示剔除车爱文[8]的研究后，OR = 2.20，95%CI（1.19，4.09），2= 54%，= 0.01，异质性降低较明显。剔除其他单个研究后，OR 为 2.51 ~ 8.56，2为 68% ~ 75%，为 0.003 ~ 0.02，异质性变化不明显。

表 2 剔除单个研究后 CIN 组与 NC 组的合并效应

表 3 剔除单个研究后宫颈癌组与 CIN 组的合并效应

表 4 剔除单个研究后 CIN III 组与宫颈癌组的合并效应

3 讨论

宫颈癌是临床常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率居女性恶性肿瘤第二位。随着宫颈癌病因学的研究发展，发现它的发生和发展是一个长期的、多因素相关的复杂病理过程[13-14]。

研究报道，由 CINs 各级别转归至宫颈癌的发生率分别为 15%、30% 和 45%[15]。但是由什么原因促使 CINs 进展还未可知。因此，找到一个相关 CINs 进展的分子标志，对进展型 CINs 的早期诊断及早期治疗并中断宫颈癌的发生、发展尤为重要。

C-myc 基因位于 8 号染色体长臂 24 区域（8q24），全长 6 ~ 7 kb，含有3 个外显子[16]。C-myc 作为癌干细胞重编程因子，促进癌细胞无限增殖及增加恶性程度[17-18]，C-myc 的表达预示癌干细胞特性的形成[19]，可作为预测子宫颈疾病进展的标志物。

本次系统评价显示，C-myc 基因在 NC 组中相对低表达，在 CIN I~ CIN II 相对中等表达，在 CIN III及宫颈癌中相对高表达，与一些学者的独立研究报道的结果[3-5, 7-12]一致，提示 C-myc 异常表达可增加正常宫颈向癌前病变发生的可能，并且在不同级别的 CINs 中，C-myc 表达趋势同 CINs 严重程度相符合，表明 C-myc 可以促进 CINs 的进展。然而，在以往的相关报道中，C-myc 表达趋势并不都同 CINs 严重程度相符合。例如，施浩帆等[6]认为 CIN 组和 NC 组相比，C-myc 阳性表达无显著差异，可能与获取的样本来自同一医院等相关。

本研究结果在较大数据层面支持 C-myc 蛋白表达在 NC 组、CINs组、宫颈癌组以及 CINs 各个级别比较中差异均具有统计学意义。综上所述，C-myc 过表达促进了CINs 的发生和发展，检测 C-myc 的表达有助于 CINs 的诊断及进展型 CINs 的预测。

本次研究虽已有较为全面的研究方法，但不排除存在一定的局限性：①只收集了公开发表的相关中文文献，没有查找到数据信息符合的英文文献，且文献数量偏少，不能排除发表偏倚的影响；②各研究使用的组织标本的处理方法、免疫组化操作及评价方法等因素可能会影响原始数据的一致性。因此，需要开展更多高质量的研究来进一步证实 C-myc 的表达有助于 CINs 的诊断及进展型 CINs 的预测。

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10.3969/j.issn.1673-713X.2020.06.015

国家自然科学基金（81572566）

胡新荣，Email：huxinrong@gdmu.edu.cn

2020-03-25