浅谈动物寄生虫病粪便检查方法

廖跟东 梁素联 王金含

（广西田东县动物疫病预防控制中心 531500）

动物寄生虫病的诊断，是在进行流行病学调查和临床诊断的基础上，最后通过实验室检查出病原体而确诊。而寄生虫病实验室检查方法很多，不同种类的寄生虫病其检查方法亦不同。本人2010～2019 年间从事寄生虫病粪便检查诊断工作，现将实验室粪便检查的方法及体会浅谈如下，供大家参考。

1 粪便的采集和保存

被检便应该是新鮮而未被污染的，最好从动物直肠直接采取。小动物采集自然排出的新鲜粪便，从粪便的中间或上部采集，采集的粪便依次编号，并将其装入清洁的容器内。采集用具应每采一份，清洗一次，以防交叉污染。采集的粪便应尽快检查，不能立即检查的应放在阴暗处或冰箱内保存。需要长期保存的可将其浸入50～60℃的5%～10%福尔马林溶液中，使粪便中的虫卵失去生活能力，起固定作用，防止虫卵变形。

2 粪便检查方法

2.1 漂浮法

主要对线虫卵、绦虫和球虫卵囊有很好的检出效果。

漂浮法最常用的漂浮液是饱和盐水溶液，其制法是将食盐加入沸水中，直至食盐不再溶解生成沉淀为止(1L 水大约加入食盐400g)，即为饱和盐水溶液。然后用4 层纱布滤过后，冷却备用。

2.1.1 饱和盐水漂浮法

取5～10g 粪便置于100～200ml 烧杯(或塑料杯) 中，加入少量漂浮液搅拌混合后，继续加入约20 倍的漂浮液。然后将粪液用金属筛或纱布滤入另一杯中，舍去粪渣，静置滤液。经40min 左右，用直径0.5～1cm 的金属圈平着接触滤液面，提起后将黏着在金属圈上的液膜抖落于载玻片上，如此多次取不同部位的液面后，加盖玻片镜检。

2.1.2 试管浮聚法

取2g 粪便置于烧杯中或塑料杯中，加入约15 倍的漂浮液搅匀，用纱布滤入另一杯中。将滤液倒入直立的平口试管中，直到液面接近管口为止，然后用滴管补加粪液，滴至液面凸出试管为止。静置30min 后，用清洁盖片轻轻接触液面，提起后放于载玻片上镜检，加盖玻片镜检。

2.2 沉淀检查法

沉淀法多用于吸虫病和棘头虫病的诊断。

2.2.1 彻底洗净法

取粪便5～10g 置于烧杯（或塑料杯中），加10～20 倍清水充分混匀，再用金属筛或纱布滤过到另一烧杯中，滤液静置20min 后倾去上层液，再加清水与沉淀物重新混匀、静置。如此反复水洗沉淀物多次，直至上清液透明为止。最后倾去上清液，用吸管吸取沉淀物滴于载玻片上，加盖玻片镜检。

2.2.2 离心沉淀法

取粪便3g 置于小杯中，加10～15 倍水搅拌混匀，将粪要液用金属筛或纱布滤入离心管中，在电动离心机转数为2500～3000r/min，离心沉淀1～2min。取出后倾去上层液，再加水混匀，离心沉淀。如此离心沉淀2～3 次，最后倾去上层液，用吸管吸取沉淀物滴于载玻片上，加盖玻片镜检。

2.3 幼虫期孵化法

此法主要用于鉴别虫的种类。取一灭菌的培养皿，在培养皿底部加滤纸一张，然后将欲培养的便加水调成硬糊状，塑成半球形，放在培养皿内的纸上，使半球形粪便的顶部略高出平皿边缘，使加盖时与培养皿盖相接触。将此培养皿置于25℃恒温箱中，使底部的垫纸始终保持潮湿状态，经7d 后，多数线虫虫卵即可发育成第三期幼虫，并集中于培养皿盖上的水滴中。将幼虫析出，置于载玻片上，放在显微镜下检查。

2.4 虫卵计数法

此法主要用于判断寄生虫感染的强度。取新鲜便1g 置于小杯中，加入10 倍量的水搅拌混匀，用金属筛过滤入试管中，静置30～60min 后倾去上层液，再加饱和盐水。混匀后用滴管滴加饱和盐水到管口，然后管口覆以盖玻片。经20min 取下盖玻片，放在载玻片上镜检。计算虫卵的数量。每份便用同样的方法检查3 片，其总和为1g 粪便的虫卵数（EPG）。

2.5 毛蚴孵化法

此法适用于鉴别吸虫的种类。取便约30g 左右，先经沉淀法浓集处理后，将粪便沉渣倒入三角烧瓶内，加清水（城市中需用去氯水） 至瓶口，在20～26℃的条件下进行解化，经4～6h后用肉眼或放大镜观察。如见水面下有白色点状物作直线来往游动，即是毛蚴。必要时也可用吸管将毛蚴吸出镜检。如无毛蚴，每隔1～5h 观察记录一次。气温高时，毛蚴可在短时间内解出，因此，在夏季要用1.0%～1.2%食盐水成冰水冲洗粪便，最后一次才改用室温清水，防止毛蚴过早孵出。

3 体会

粪便检查的方法有很多种，应根据不同寄生虫病的种类，选择检出效果好的检测方法。

采集的粪便最好直接从动物直肠采取，这样新鲜又不被污染。采集的粪便应尽快检查，放置过久易导致虫卵破坏。不能立即检查的应用密封袋单独包装好放在阴暗处或冰箱内保存，以防交叉污染。

要长期保存的粪便可将其浸入50～60℃的5%～10%福尔马林溶液中，使粪便中的虫卵失去生活,并起固定虫卵作用，防止变形难以识别。装粪便的容器要清洁、干燥、无吸水和渗漏，以防交叉污染。

饱和盐水漂浮法漂浮时间应20～30min 为宜，时间过短虫卵不完全漂浮，有时可能找不到虫卵。时间过长造成虫卵变形、破裂，难以识别。检查虫卵时，先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分，发现疑似虫卵物时，再用高倍镜仔细观察。