如东县部分猪场猪伪狂犬病血清流行病学调查

沈强兵 缪忠明 陆淑华

摘  要：为了解如东县猪场猪伪狂犬病免疫和感染现状，为该病的防制和净化提供依据，本研究利用酶联免疫吸附试验对从如东地区14个乡镇84家（户）猪场和散养户采集的276份血清样本进行猪伪狂犬病病毒野毒株感染抗体（gE抗体）和其中59家（户）猪场和散养户的204份血清样本进行疫苗毒株免疫抗体（gB抗体）的检测。结果显示猪场（散养户）猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为20.2%（17/84），血清样本阳性率为20.7%（57/276）;血清样本猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性率为78.4%（160/204）。结果表明：如东县猪群的猪伪狂犬病病毒野毒株感染比较严重，疫苗免疫比较理想，应加强猪伪狂犬病的免疫接种和抗体检测，从而更好地防控该病。

关键词：如东;猪伪狂犬病;血清学;流行病学调查

伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由疱疹病毒属的伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起猪等家畜以及野生动物共患的一种流行很广的急性传染病，多种动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要特征[1]。猪是感染后唯一可以存活的动物，是该病毒最主要的贮存宿主和传染源。猪伪狂犬病主要引起母豬繁殖障碍，表现为流产以及产死胎、木乃伊胎和弱仔等;新生仔猪感染后，主要表现为震颤和运动失调等神经症状，伴有发热、呼吸困难、呕吐和腹泻症状，死亡率可达50%～100%;生长育肥猪多为隐形感染，死亡率虽低，但增重缓慢。感染猪伪狂犬病病毒的猪抵抗力下降，极易继发或并发其他疾病，会给养猪业造成重大经济损失。目前，给猪接种猪伪狂犬病基因工程缺失疫苗后，该病的流行性有所缓和，但其潜伏感染情况仍相当普遍，临床症状已经从典型转为非典型，虽死亡率大幅降低，但是仍严重影响猪群的生长速度和繁殖性能，给我国养猪业造成了严重的经济损失。

为掌握江苏省如东县部分猪场的猪伪狂犬病感染和免疫的状况，为有效控制和消灭猪伪狂犬病提供科学依据，我们对部分猪场进行了猪伪狂犬病血清流行病学调查，现将调查结果报告如下：

1  材料与方法

1.1 血清样本

2017年5月，从如东县14个乡镇采集到猪血清样本276份，其中：中小规模化猪场28家，血清样本140份，全部来自接种过猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗的猪群;散养户56户，血清样本136份，       64份来自接种过猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗的猪群（表1）。血样采集后，静置2 h，       3 000 r/min离心 5 min，分离血清，随后在-20 ℃下冻存备用。

1.2 检测试剂

猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒和猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒由法国ID-VET公司生产。

1.3 检测方法

采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对血清样本分别检测PR野毒株感染抗体和PR疫苗株免疫抗体，操作过程与结果判定按照试剂盒说明书进行。

1.4 结果判定

如果检测到gE抗体阳性猪，则可以判定该猪场的猪群感染了猪伪狂犬病病毒野毒株。如果猪场有1个血清样本为阳性，则判定该猪场为猪伪狂犬病病毒野毒株阳性场。

2  检测结果

2.1 猪伪狂犬病病毒gE抗体检测

共检测猪血清样本276份，其中猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性样本57份，样本阳性率为20.7%;检测84家（户）猪场和散养户，猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性猪场和散养户17家（户），阳性率为20.2%。

2.1.1 不同类型猪场检测情况

在本次调查中，小规模化猪场检测28家，gE抗体阳性场9家，阳性率达32.1%;散养户检测56户，gE抗体阳性户8户，阳性率达14.3%;中小规模化猪场检测的血清样本140份，gE抗体阳性血清样本39份，阳性率达27.9%;散养户检测血清样本136份，gE抗体阳性血清样本  18份，样本阳性率达13.2%（表2）。检测结果表明，猪伪狂犬病病毒野毒株感染在如东县中小规模化猪场有较高的比例，且中小规模化猪场的感染率高于散养户的，存在散发流行的可能。

2.1.2 不同猪群猪伪狂犬病gE抗体检测情况

为了方便调查统计，根据猪的生长状况，我们将猪群分为三个生长阶段：仔猪群（2月龄以下）、育肥猪群（2月龄以上）和种猪群（包括后备母猪、生产母猪和种公猪）。血清样本检测结果显示，不同猪群的猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率存在差异，其中种猪群、育肥猪群和仔猪群的阳性率分别为30%、28.9%和13.3%（表3）。育肥猪多为隐性感染，为猪伪狂犬病的防控增加了难度。

2.2 猪伪狂犬病病毒gB抗体检测

共检测血清样本204份，其中猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性样本160份，阳性率为78.4%;在采集自接种疫苗的28家中小规模化猪场的140份血清样本中，猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性样本118份，阳性率达84.3%;在来自31户散养户的64份血清样本中，猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性样本42份，阳性率达65.7%（表4）。检测结果表明，中小规模化猪场的猪伪狂犬病免疫效果好于散养户的，通过疫苗免疫预防猪伪狂犬病具有较好的保护效果。

3  讨论

猪接种猪伪狂犬病基因缺失疫苗后，不会产生针对缺失基因编码蛋白（gE）的抗体，如果用血清学方法检测到这些缺失蛋白的抗体，则表明动物感染了猪伪狂犬病病毒野毒株，通过缺失疫苗与配套的诊断试剂盒，很容易区分免疫猪和感染猪，从而为猪伪狂犬病的净化提供强有力的工具，对处于猪伪狂犬病病毒感染风险中的猪场或散养户，可按照“首次检测→隔离/淘汰→免疫→二次检测→隔离/淘汰→再次检测→淘汰”等步骤进行净化。

在抽查的中小规模化猪场中，猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性猪场占32.1%，猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性血清样本占27.9%;在调查的散养户中，猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性散养户占14.3%，猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性血清样本占13.2%，因此中小规模猪场和散养户在猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率上存在明显的差异。分析其原因可能是：中小规模化猪场不能自繁自养，大部分收购苗猪进行育肥，苗猪来源复杂，感染猪伪狂犬病病毒野毒株的途径和方式较多，容易发生感染，且中小规模化猪场的日常管理存在较多漏洞，防病意识淡薄，不重视生物安全措施，无严格的防疫和管理制度。

本次调查的血清样本检测结果发现，种猪群、育肥猪群和仔猪群的猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率分别为30.6%、28.9%和13.3%，不同生长阶段的猪在感染猪伪狂犬病病毒野毒株上存在差异。仔猪群猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率低，一方面是体内有母源抗体存在，另一方面是由于仔猪感染猪伪狂犬病病毒后死亡率较高，而调查所采集的血清多来自假定健康的猪群。育肥猪群和种猪群的猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率高，主要是成年猪常呈隐性感染，长期排毒和带毒。

中小规模化猪场比较重视猪伪狂犬病的预防，全部对猪接种了猪伪狂犬病疫苗，猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为84.3%，而散养户的猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为65.7%，且有44.7%（25/56）的散养户未免疫。中小规模化猪场和散养户免疫效果存在明显的差异，必须引起重视。分析其原因可能与对猪伪狂犬病防控重视程度、疫苗质量、免疫程序合理性和免疫操作等密切相关。

如东县存在比较高的猪伪狂犬病病毒野毒株感染率，说明猪伪狂犬病的防控工作目前仍然任重道远。要坚持预防为主和防重于治的方针，采取综合防控措施，做好猪伪狂犬病的消灭和净化工作。具体措施有：①实施严格的引种检疫;②加强消毒，做好灭鼠工作，严格控制猫和犬等其他动物进入猪场;③严格实施自繁自养和全进全出的饲养模式;④做好猪伪狂犬病gE缺失活疫苗的免疫;⑤持续开展检测和淘汰阳性猪，建立阴性猪群;⑥加强生物安全等多方面措施，从而最终达到免疫净化的目标任务。

参考文献：

[1] 殷震，刘景华. 动物病毒学（第2版）[M]. 北京：科学出版社，1997：998