孔祥运
(太原市妇幼保健医院,太原市儿童医院,山西 太原 030000)
病原菌的种类与分布的情况随着地区、年代的不同而有所改变[1],如在以往引起败血症的病原菌通常为溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌等,而近几年来由内源性低毒力致病菌造成的败血症比例逐渐上升。临床医生通过对患者血液中细菌耐药性的监测情况来选择抗菌药物。儿童作为一种特殊群体与成年人相比因其年龄较小,免疫系统与一些器官功能也未发育完善,因此儿童对病菌入侵抵抗力较弱从而更容易出现病原菌感染。血液病菌感染作为儿科常见的一种全身感染性疾病,具有发病急、进展快、病情重等特点,有时候临床表现并无特异性,除此之外血液感染在感染的的轻重程度上和临床的抗感染治疗等方面中也有其不同之处,因此其病死率与发病率与医院其他科室相比居于前列。临床中对于儿童血液感染患者以抗菌药物治疗为主,但是随着药物的不断使用,病菌的耐药性也逐渐增强,耐药菌株种类日益增多,如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)肠杆菌[2],而血培养作为确诊病原菌血液感染的一种重要手段,可以及时知晓病原菌的分布和耐药情况,有助于临床治疗中合理、正确、及时地选择抗菌药物。本次研究通过选取太原市儿童医院2018年6月-2018年12月住院患儿对其血培养病原菌阳性的标本进行分析,了解其病原菌分布特点和耐药性情况,以此为临床治疗提供诊断参考,现作如下报道。
1.1 一般资料 血标本来源于本院2018年6月-2018年12月14周岁以下门诊以及住院患儿送检的血培养标本,样本采集的时间为患儿发热、寒颤期间或者为发热前30 min,患者静脉血抽血无菌操作按照《血培养操作规范》执行,共获取血培养标本7125份,并剔除同一患儿来源的重复菌株。
1.2 仪器与试剂 选择法国生物梅里埃BACT/ALERT 3D 120全自动血培养仪作为培养系统,阳性分离瓶选择郑州安图儿童专用血培养瓶,采用梅里埃New ATB自动化微生物鉴定系统进行菌株鉴定。
1.3 药敏实验 采用纸片扩散法和E.test法等对细菌药物敏感性进行测定,操作流程按照《全国临床检验操作规程》(第4版)。
1.4 质控菌株 采用大肠埃希菌(ATCC 25922)、粪肠球菌(ATCC 29212)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)以及铜绿假单胞菌(ATCC 27853)来对病原菌药物敏感性实验进行质量控制。
1.5 统计学分析 药物敏感性操作及结果判定参照《美国临床实验室标准化协会(CLSI)2018年指南》标准,使用WNONET 5.5操作软件对菌株鉴定及药敏结果进行数据统计分析,采用SPSS 22.0软件进行统计学分析,计数资料用%表示,统计学分析方法采用χ2检验,P<0.05表示有统计学意义。
2.1 病原菌分布 2018年6月-2018年12月共计送检血培养样本7125份,共分离209株病原菌,占比2.93%,209株病原菌中革兰阳性菌株168株,占比80.38%,以凝固酶阴性葡萄球菌为主,占革兰阳性菌的69.3%,其他病原菌分别如下:肺炎链球菌10.53%,屎肠球菌3.83%,藤黄微球菌5.26%,无乳链球菌1.43%,金黄色葡萄球菌2.39%,口腔链球菌1.43%,克柔念珠菌0.96%;革兰阴性菌株41株,占比19.62%,以肺炎克雷伯菌为主,占革兰阴性菌的30.2%,其他如下:鞘氨醇单胞菌0.96%,大肠埃希菌5.74%,铜绿假单胞菌0.96%,约氏不动杆菌1.43%,伦敦沙门菌2.39%,蒙得维多沙门菌0.48%,解甘露醇罗尔斯顿菌0.96%。
2.2 主要革兰阳性球菌耐药情况 由于样本统计量过少,此次耐药性分析只统计菌株数较多的凝固酶阴性葡萄球菌和肺炎链球菌,在2018年6月-2018年12月期间分离的葡萄球菌属中,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌属(MRCNS)的检出率为82.61%,青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)检出率为68.18%,两者对青霉素G、红霉素、苯唑西林、氨苄西林/舒巴坦、四环素等药物耐药情况较严重,耐药率均高于60.00%,但对利奈唑胺、万古霉素、替考拉丁以及替加环素等药物敏感性达到了100.00%。
2.3 主要革兰阴性菌耐药情况 革兰阴性菌中未发现对亚胺培南具有耐药性的菌株,革兰阴性菌中对抗菌药物敏感性最高的是阿米卡星和亚胺培南,头孢唑啉和氨苄西林是耐药率最高的两种抗菌药物,大肠埃希菌对氨苄西林耐药率高于80.00%,肺炎克雷伯杆菌对头孢唑啉、氨苄西林和氨苄西林/舒巴坦的药物耐受率大于85.00%。
血液感染事件严重时常危及患者生命安全,临床上通常认为检测出的病原菌分布特点以及其耐药性行为有较强的地域性区别,因此获取本地区病原菌分布特点以及耐药性行为资料对于指导临床用药具有重要意义。
本文研究结果显示,本院14岁以下儿童血培养病原菌阳性率为2.93%,该结果与罗巧二等人的研究结果基本相似(2.5%)[3],但是与其他文献报道结果相比较(9.6%-17.5%)有明显差异,这可能由于早期抗菌药物治疗等因素造成,本次耐药性分析发现,革兰阳性细菌耐药检出率明显高于革兰阴性菌,与Lakshmi等[4]研究报道相一致,葡萄球属位居首位,其中凝固酶阴性葡萄球菌所占比例最高,此外凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素高度耐药,对红霉素耐药情况也较严重,此项数值表明其作为血液感染病原菌日益增加的重要性,引发感染疾病的病理机制可能与细菌分泌粘质等毒力因子有关,凝固酶阴性葡萄球菌感染人体常依赖特定的侵入条件,如手术时间过久、体表穿透性创伤、深静脉导管留置,由于人体黏膜正常菌群也存在凝固酶阴性葡萄球菌,血标本污染率较高,因此临床上对于血培养阳性的意义较难确定,有研究发现若是阳性报警时间超过24 h后,可以作为诊断致病菌或污染菌的一种指标,其特异性高达90%,但最终确诊仍需要综合分析和结合实验室资料。除此之外,链球菌对红霉素、四环素高度耐药,因此应当暂停该类药物的临床使用,待明确细菌耐药追踪结果后再确定是否继续用于临床治疗。
综上所述,血培养作为诊断血液感染性疾病的重要一环正被学术界日益重视,因此临床上更需规范采血操作、采血量和其他操作要求。通过对我院近半年期间儿童血液感染菌的监测数据分析发现本院患儿血培养的主要病原菌为革兰阳性菌,儿童血培养阳性标本检出病原菌以肺炎链球菌和表皮葡萄球菌为主,临床药物选择中应参考其检测结果,合理搭配抗菌药物,避免盲目的使用广谱类抗生素,以此防止多重耐药菌株的出现,从而提高血液感染性疾病的诊治率。