规模化猪场如何建立实验室监测体系

周松峰，黄全奎，华 俊，秦树英 ，覃绍敏，吴健敏*

（1.广西里建桂宁种猪有限公司，广西 南宁 530105；2.广西壮族自治区兽医研究所，广西 南宁530001）

近年来，随着散养户的大量退出，特别是受非洲猪瘟的影响[1]，规模化猪场在我国已占到了绝对的比重[2]，整体提升了养猪行业的综合管理水平，但是仍存在很多不足。例如一些规模场由于生产管理方式、生物安全措施和技术防控手段较为落后，行业间缺乏沟通，对疾病缺乏有效的监控手段等原因[3]，使得疾病频繁出现且无法有效控制，造成较大的经济损失。另外，一些规模场虽然没有发生重大动物疫情，但是由于没有建立实验室监测技术体系，无法判断猪群中是否存在带毒猪。带毒猪持续不断地向外界排毒[4]，造成散发性疫情不断发生。

规模化猪场要积极创造条件，开展免疫抗体及病原监测，积极做好种猪垂直传播疫病病原的净化工作。通过监测，有针对性地提升猪场综合生物安全措施并把它作为今后规模场工作的重点。完整的、准确的实验室监测体系是疫病防治的科学武器和有效手段，规模场实验室监测体系的建设势在必行[5]。本文就如何建立规模化猪场实验室监测体系，进行简单阐述。

1 监测的分类

规模化猪场监测可以分为常规监测和发生疫病时的快速检测两种。

1.1 常规监测

常规监测是指在猪群表现正常的情况下，开展的针对猪群及原料品质的监测。主要包括抗体监测、病原监测和饲料监测3个方面。

抗体监测：通过血清学诊断技术，检测猪血清中的特定抗体水平。包括抗体水平的高低、维持的时间、抗体均匀度及群体免疫水平等。抗体水平监测可以评价疫苗的质量，评估猪群的免疫状况[6]，从而为制定合理的免疫程序(如免疫次数、免疫时间及免疫剂量等)提供依据。免疫抗体监测常根据不同的群体进行，一般大致分为公猪、母猪、育肥猪和仔猪4个群体。想要精确地反映猪场的实际情况，还应细分群体，包括后备母猪、1～2 胎次、3～4 胎次、5～6 胎次及高胎次等 5个母猪群体；哺乳仔猪（新生仔猪、断奶前）；断奶仔猪；保育猪和育肥猪。公猪可被视为一个单独群体进行普检，其他猪群按实际情况进行抽检。其中母源抗体消长规律的监测最为重要，它对制定合理的免疫程序，及时根据变化修定免疫程序意义重大[7]。

病原监测：通过PCR技术、细菌分离鉴定和药敏试验等方法对病毒、细菌、真菌及寄生虫等病原进行监测。一般采集猪血液、鼻咽拭子、肛拭子、粪、尿、分泌物及养殖环境样品等进行检测，监测本场病原的感染情况(感染程度、感染时间及感染对象等)，从而采取合理的应对措施，有针对性地选择疫苗及消毒药物进行预防，以及使用敏感药物进行治疗，防止耐药菌株的产生。通过隔离、淘汰带毒猪等合理的净化手段，建立某种特定疾病的阴性场，再通过定期监测，持续保持对某种疾病的阴性状态，是确保猪场生产安全稳定，创造更大效益最为有效的措施。

对疫病的控制应以预防为主，而常规监测是疫病预防的重要手段，通过常规监测和动态分析，及早发现问题、解决问题，可形成猪场生物安全屏障。

饲料监测：饲料安全对于猪群的健康尤为重要[8]，它是保证猪群健康的基本前提。饲料常规监测主要分为以下几个方面：常规理化指标，如水分、粗蛋白质、总磷、粗灰分、钙、粗纤维、粗脂肪、氯化钠、脂肪酸和各种氨基酸等；重金属，如镉、铬、砷和汞等；抗生素，抗生素残留；违禁药物，如三聚氰胺、克伦特罗和莱克多巴胺等；霉菌毒素，如赤霉烯酮、呕吐毒素和黄曲霉毒素；对猪群有害病原的检测，如蓝耳病病原、非洲猪瘟病原等。

1.1.1 常规监测需注意的问题。科学合理的常规监测方法必须做到以下几点（以抗体和病原监测为例），数据才有意义。首先保证检测样品的数量和质量。育肥猪群（本公司将育肥猪群分为3个阶段：小猪阶段、中猪阶段、大猪阶段）的每个生长阶段都至少要采集总量的5%，母猪群至少要采集总量的10%，公猪需要全群采集。样品数量决定整个猪群检测结果的准确性，所以样品越多结果越可靠。规范采血操作，合理地分离和保存血清。血清应为无色至淡黄色澄明液体，无溶血，检测时最好是新鲜血清，血清保存时间越久，结果越不准确。采集的病料必须新鲜且具有代表性，最好是未经药物治疗的活病猪的病料。要根据不同病原的不同特性，合理保存病料，特别是在夏季高温天气下，更要防止病料腐败变质。要保证猪场监测的连续性[9]。开展定期监测，必须根据本场现状并结合以前和周边的疫情形势进行。制定合理的监测时间，要确保监测时间的连续性，一般每隔4个月监测1次。对于特定监测项目，要确保监测的阶段性和连续性，如母源抗体的监测，哺乳猪、保育猪等的抽样检测，后备猪的病原和抗体监测等。要具备实验室及试验条件。基本实验室主要包括解剖室、病原检测室、血清学检测室、样品及档案保存室、洗涤与废弃物无害化处理室等。所需的必要仪器设备主要有荧光定量PCR检测仪、超净工作台、生化培养箱、酶标仪、普通显微镜、微量移液器、电热水浴锅、高压灭菌锅、冰箱及一些解剖器具、试管和离心管等。试验药品、试剂盒及常规的培养基、药敏试纸等按试验需要配备。其中人员条件主要指具有较强的专业理论知识和生产管理经验的工作人员，因为对监测结果进行合理的分析和判断是规模化猪场生产监测的重要组成部分。同时还需制定严格的实验室管理制度，包括岗位责任制、仪器设备操作使用管理制度、生物安全管理制度、病料采集保存制度、试验记录制度及档案资料管理制度等。

1.2 发病时的快速检测

当猪群生产状况低下或临床出现病态时，为了快速查明病因，需要根据实际情况调整检测内容，从而判定猪场是否受到特定病原侵袭。

1.2.1 监测方法。利用血清学技术(如ELISA试验、血凝试验)检测免疫抗体或某种疾病的野毒抗体(如猪伪狂犬病gE抗体等)。监测项目包括猪瘟、蓝耳病、猪伪狂犬病、圆环病毒病、口蹄疫、细小病毒病、猪乙型脑炎和弓形体病等的抗体。运用分子生物学技术，从基因水平监测动物病原菌(如PCR方法)，利用特异性引物可以快速扩增某种特定病原的核酸，从而判定所检病料中是否存在特定病原，随后通过测序及基因序列的遗传进化分析[10]，判定该病原是否变异或进化，及时准确地掌握疫病流行动态，为疫苗的筛选及进一步制定防控措施提供依据。检测项目包括猪瘟、猪伪狂犬病、圆环病毒病、蓝耳病和猪细小病毒病等的病原。运用微生物学技术，对细菌性致病菌进行分离鉴定[11]，检测分离菌株的致病性及对抗生素的耐药情况等。检测项目包括副猪嗜血杆菌、链球菌、大肠杆菌、寄生虫、药物残留和霉菌毒素等。利用快速诊断试剂 (如胶体金试纸条等)，现场可以快速、准确地检测抗体、病原和药物残留等，非常方便。

2 本公司常规的监测方案

2.1 后备种猪

后备种猪饲养至60 kg后，转至后备猪驯化隔离舍饲养，对不符合选留条件的及时淘汰出群，对符合条件的采样监测。监测项目包括猪瘟抗原及抗体、蓝耳病抗原及抗体、猪伪狂犬病抗原及抗体、猪口蹄疫抗体、圆环病毒病抗原及抗体等。

2.2 生产公猪和母猪

公猪全群监测，生产母猪分胎次抽检，每年2次。监测项目：猪瘟抗原及抗体、蓝耳病抗原及抗体、猪伪狂犬病抗原及抗体、圆环病毒病抗原及抗体、口蹄疫抗体、乙脑抗原及抗体、细小病毒病抗原及抗体、弓形体等。

2.3 生长猪群

按周龄定期抽检，监测项目为：猪瘟抗原及抗体、猪伪狂犬病抗原及抗体、圆环病毒病抗原及抗体、蓝耳病抗原及抗体、口蹄疫抗体及弓形体等。

2.4 特殊时期的检测

猪群中个体或群体出现疫病时，以临床判定为参考，制定相应的检测项目，根据所需检测项目，采集相应的样品，详细记录采集样品的来源、采集日期、猪只日龄及临床症状等项目，并合理地保存样品，尽快送到本公司实验室检测。公司具有专门的疫病诊断实验室，能够做到现采现检，省去了诸多中间环节，使得检测更加快速、准确。

目前国家对猪瘟、蓝耳病、猪伪狂犬病及口蹄疫等严重影响我国养猪业的病原开展净化工作。虽然不同的疫病有不同的净化方案，但是其净化的大体思路基本相同：筛选评估适合本场的优质疫苗，定期、持续开展病原及抗体监测，采取强有力的淘汰措施和合理的饲养管理及全方位的生物安全措施等[12]。

3 讨论

3.1 实验室监测数据的积累

规模化猪场实验室监测，只是生产综合管理环节中的一环，猪场的生产监测远不止这些。对猪场的每一个生产环节、每一个细节都需要监测，只有这样才能够了解整个猪场的真实情况，从而对猪场整体的生产进行合理地指导。另外，监测可以是长远的，也可以是短期的，只有对生产环节处处留心，积累试验数据，从大量的数据中归纳和总结出影响猪场生产的不利因素，才能做到及时采取应对措施。

3.2 监测体系有助于特定病原的净化

通过猪场实验室监测体系的建立和应用，规模化猪场可以根据检测的具体情况，净化某些特定病原(如猪伪狂犬病、猪瘟、蓝耳病等)，并提出控制方案，有效提高猪群的健康水平[13]。

3.3 多种举措并举，保证猪场生产稳定

猪场的实验室监测体系是保障猪场安全生产的有力武器，但是并非决定性因素，实验室监测体系只是猪场的一个较为合理的参考系统。在运行实验室监测体系的同时，提高猪场的管理水平，采取综合性措施，才能使猪场真正实现安全、健康生产[14]。