食品中氯霉素类药物残留量检测方法研究进展

梁泳欣

番禺海关综合技术服务中心 广州番禺 511400

1 氯霉素类药物的危害分析

随着科学技术的不断发展，氯霉素能够有效地对细菌感染所导致的疾病起到抑制的作用，具有很大的医疗作用，但同时也存在一定的缺陷，作为一种抗生素药物，氯霉素会在人体中积累到一定的量时就会对人体健康产生致命性伤害，抑制骨髓细胞内线粒体蛋白质的合成，对人和动物骨髓细胞和肝细胞产生毒性作用，能引起再生障碍性贫血，并伴有白细胞和血小板减少现象，新生儿、早产儿灰色综合症等，还会诱发致病菌的耐药性。这种对人体健康会产生极大威胁的药物引起了人们极大的关注，要求相关部门要进一步增强对食品安全的监察力度，并注重对食品中氯霉素残留物进行一系列的检测工作，从而确保食品的安全。到目前为止，国内外用于氯霉素类化合物的检测方法已近十几种，本文选取几种常用方法进行简要概述[1]。

2 食品中氯霉素类药物残留量检测方法的研究

2.1 微生物检测方法的应用

通过利用氯霉素对部分特定的微生物起到抑制感染这种特性，采取微生物学检测方法来检测这些药物是否残留在食品中。目前将以牛奶作为检测对象，采取微生物法检测法来检测牛奶中是否残留氯霉素这类药物，该方法是通过快速检测试纸而获取较为精准的数值结果。此外，对于鳆发光杆菌的应用，简单来说，氯霉素能够在一定程度上对发光微生物的发光效应起到抑制作用，通过利用该特性来对氯霉素在食品中的实际残留量展开检测，根据其原理能够建立起发光微生物发光抑制效应与对应氯霉素浓度对数含量等之间的具体线性关系，最终所取得的数值结果若属于该方法所建立的线性关系之间的幅度内，就代表着该食物中含有氯霉素类药物。采取微生物检测方法来对食品中的氯霉素类药物残留量进行检测具有简便快捷、低成本等优势特征，并且也适用于对多种抗生素的同时检测占有一定的优势，但同时存在敏感性和专一性低，易漏检，且容易出现假阳性的缺陷，应用规模受到一定的限制，因此仅仅在水产品养殖领域中进行应用。

2.2 气相色谱法的应用

采用气相色谱法来对食品中氯霉素类药物的残留进行检测首先需要在食物样品中进行乙酸乙脂的提取浓缩工作之后，把提取物溶于水中，之后使用正己烷进行脱脂--净化--衍生化等一系列操作，最后采取气相色谱仪来对成品进行检测，最终的数值结果还需要通过对比范围的方法来确认食品中是否残留氯霉素类药物。气相色谱法在近些年得到了改良，在监测的过程中对虾类样品的食物前期展开了改良操作，增加了提取时间并且引入了超声波这种辅助手段，这对提升数值结果的准确性带来重要的作用。

2.3 液相色谱法的应用

在对食品中氯霉素类药物残留量进行检测的过程中采取液相色谱法的应用首先是通过提取了蛋白沉淀剂以及选取了取溶剂的流程，例如采用甲醇来成为首选展开实验，对CAP、FFa、FF等具体含量进行测定来展开评判工作。如食品中CAP 的含量数值在1至400ug/kg之间，而FFa的具体含量在10至2000ug/kg之间，FF的含量数值在20之2000ug/kg 之间时，也就是说最后的数值在三者的含量内，就基本上可判定该食物样品中存在氯霉素的残留情况。液相色谱适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于药物残留的分析检测[2]。

2.4 质谱法的应用

主要有气相色谱-质谱联用(gas chromatographmass spectrometer,GC-MS)和液相色谱串联质谱(liquid chromatographymass spectrometry,LC-MS/MS)法。我国国家标准GB/T 22338—2008《动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定》[15]规定了水产品中氯霉素类 (CAP、氟甲砜霉素和甲砜霉素) 残留的气相色谱-质谱 (GC-MS) 和液相色谱-质谱/质谱 (HPLC-MS/MS) 的测定方法。GC-MS法的样品用乙酸乙酯提取，4%氯化钠溶液和正己烷液-液萃取，经Florisil柱净化后，以甲苯为反应介质，用N, O双 (三甲基硅基) 三氟乙酰胺-三甲基氯硅烷于70℃衍生化60min，用气相色谱/负化学电离源质谱测定，内标工作曲线法定量，对CAP的检出限为0.1µg/kg；HPLC-MS/MS法的样品用饱和乙腈正己烷提取，提取液用LC-Si固相萃取柱进行净化，CAP采用内标法定量分析，对CAP的检出限为0.1µg/kg[3]。

2.5 免疫分析法的应用

酶联免疫法的测定原理是在氯霉素全抗原中加入氯霉素抗体,再加入酶标记物，用四甲基联苯胺(tetramethyl benzidine,TMB)底物显色，样本和标准液中氯霉素含量与吸光度呈反比。氯霉素在0.05～4.05 ng/m L范围内有良好的线性关系,回收率在85%以上。这种方法的应用能够预防由于放射性同位素所造成的不必要危害，并且采取免疫分析法所涉及到的检测仪器及其设备的操作相对简单，能够在一定程度上降低由于操作流程繁琐而造成的实验误差率，同时也具备良好的检测灵敏度，值得加大应用推广率。