关于粮油中真菌毒素检测技术分析及其应用探讨

黄铭仕

摘 要：粮食食品的安全问题一直是人们关注的重点问题，在粮油的收购、存储管理过程中，需要对粮油的真菌毒素进行检测，才能保证粮油的安全，通过对粮油真菌毒素检测技术主要内涵进行分析，探究了多种粮油真菌毒素的检测技术以及新型检测技术的应用。

关键词：粮油;真菌毒素;检测技术

Abstract：Food safety has always been the focus of peoples attention. In the process of grain and oil purchase and storage management， it is necessary to detect the mycotoxins in cereals and oils in order to ensure the safety of cereals and oils. By analyzing the main connotation of mycotoxins detection technology of cereals and oils， this paper explores a variety of detection technologies of cereals and oils mycotoxins and the application of new detection technologies.

Key words：Cereals and oils; Mycotoxins; Detection technology

中图分类号：TS207.5

粮油食品的真菌毒素的检测关系到国民的健康与安全问题，需要对粮食中的各种真菌毒素进行检测。一般情况下，粮食中常见的真菌素有黄曲霉毒素（AFT）、玉米赤霉烯酮（ZEN）等，如果粮油中含有这些真菌素，会对人体造成巨大的伤害，例如黄曲霉毒素毒性十分厉害，如果花生、玉米、谷物等农产品中的黄曲霉毒素（AFT）过高，会对人畜的健康造成影响，是严重威胁农产品消费安全的关键因素之一。粮油中的真菌毒性具有强致癌、致畸、致突变性，如果食用量过大，对人体的健康造成重大的危害，对粮油中的真菌毒性进行检测，以降低粮油中这些真菌毒素对人体造成的危害[1-4]。

1 粮油中真菌毒素检测技术概述

1.1 粮油中真菌毒素检测技术分类

粮油中真菌毒素检测技术主要对粮油或者一些其他农作物中的真菌毒素进行检测，判断其在粮油中的含量。随着新型检测技术在粮油检测中的应用，对粮油中真菌素的检测技术也产生不同的检测技术，一般情况下，粮油检测技术可以分为常规真菌毒素检测技术与新型真菌毒素检测技术两种类型。常规的真菌检测技术是采用经典的分析技术，也是应用时间较长的较为经典的检测手法，检测手段稳定、可靠，这种检测方法主要包括薄层色谱法、色谱法、免疫分析法等，主要针对粮油中的黄曲霉毒素（AFT）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭曲霉毒素（OTA）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）等有毒真菌素进行检测，但在检测的过程中，需要时间较长，过程比较复杂;而新型真菌毒素检测技术是在经典检测技术的基础上发展起来的新型检测技术方法，利用现代化学检测技术对粮油中的真菌毒素进行检测，转变了传统的粮油检测技术，常用的方法主要包括胶体金免疫层析测定分析技术、免疫生物传感器检测分解技术、光谱筛选技术、分子运动控制印迹技术等新型的检测技术，新型真菌毒素技术具有快速、检测范围广泛等优势。

1.2 粮油中真菌毒素检测技术选择

粮油中真菌毒素的化學性质比较稳定，如真菌毒素对热、紫外线、酸等物质有较强的抵抗力，但在碱性环境中，就容易分解，发生化学反应。针对真菌毒素的这种特性，可以采用简洁、准确的方法对其进行检测，还能够节约检测的成本。在具体的检测过程中，不同的真菌毒素检测技术检测特点不尽相同，可以采用多种检测方法对综合性的真菌毒素进行检测，对不同的真菌毒素检测效果也具有不同的优势，它们在具体的粮油毒素检测的过程中，分别具有检测准确率高、检测效果好、检测手段稳定、检测便捷可靠以及经济实惠等不同的特点。真菌毒素与农兽药不同，无法有效地对药源进行控制与管理，为了保证在粮油检测中真菌毒素检测的准确和高效，需要针对不同的粮油品质，采用不同的检测方法，并尽可能地节约检测的成本，检验部门的工作人员，就需要合理的应用高效的技术，根据实际情况进行粮油中真菌毒素的检测选择合适的技术，采用快速、准确、绿色模式为主的真菌毒素检测技术为主要方式，以提高检测的效率。

2 常见粮油中的真菌检测技术及应用

2.1 常规真菌毒素检测技术分析

常规真菌毒素的检测方法准确可靠、检测灵敏度高，使用的检测规模一般要求不高，但这种方法的前期处理比较复杂，需要采用成套的提取净化浓缩设备，对粮油中的真菌毒素进行提取，一般情况下不适用于粮油收购现场检测。

2.1.1 薄层色谱法检测技术的应用

薄层色谱法是一种十分经典的真菌毒素检测技术，是在20世纪70年代发展起来的技术，主要依据真菌毒性在酸性环境中的稳定性，利用真菌毒素在紫外线照射下的荧光特性，结合真菌毒素的物理与化学性质，选择合适的有机溶剂对粮油样品中毒素进行溶解与提取，然后利用液液萃取、免疫亲和、固相萃取、凝胶色谱等技术进行净化，提取粮油的真菌毒素，然后对粮油中的真菌毒素的分布情况进行分析，从而确定粮油中的真菌毒素含量与分布情况。在实际应用的过程中，薄层色谱法首先需要粮油中的真菌毒素的检测样本进行提取、浓缩，进行薄层分离操作，然后根据各种真菌毒素的荧光特性进行比对分析，达到对粮油中的真菌素进行定量与定性分析，这种分析方法操作过程比较复杂，分析比对过程时间比较长，而且，在具体的测试过程中，由于薄层色谱法使用中具有一定的真菌霉素暴露风险，容易对周围的环境造成污染，对检测人员造成感染，在具体的检测过程中，需要操作人员注意保护自身安全。这种方法将色谱的分离功能与质谱的分析功能结合起来，可以有效地对粮油中的复杂真菌毒素进行综合性的检测与分析，这种方法对真菌毒素或其衍生物所具有的荧光特性要求不高，适用于绝大多数真菌毒素的分析，方法灵敏度高、准确性和重现性好，在省级以上的科研所或者质检单位中应用十分广泛。目前，薄层色谱法检测在大范围的粮油真菌检测中逐渐被其他的新型检测方法所代替，但将薄层色谱法与色谱法、质谱法进行联合使用，可以快速的对粮油中的某种真菌毒素进行检测，准确度高，效果比较好，但采用联合检测的方法同样对检验的设备与仪器有较高的要求，在一定程度上，检测的成本也比较高，在具体应用中，往往也会受到一定的限制。

2.1.2 经典仪器分析方法

（1）液相色谱-质谱联用分析方法。它是利用真菌毒素的色谱与质谱分布，对毒素进行检测的方法，通过对粮油中的真菌毒素进行萃取、免疫亲和、固相萃取、凝胶色谱进行分析，然后对粮油中的真菌毒素进行比对分析，快速的实现对粮油中的真菌毒素进行准确定性与定量分析，从而准确的分析出粮油中的真菌毒性的含量。采用这种分析方法与其他的分析方法结合在一起，灵敏度高、准确性、便捷高效和重现性较好，但采用这种方法，仪器昂贵，检测成本高，而且对检测的工作人员提出了很高的要求，一般适用于大型的科研单位。

（2）气相色谱法。气相色谱法也是利用真菌毒素色谱分布的特征，主要应用于沸点低、容易被气化的物质，通过相应的处理与分离，采用气相色谱法能对单端孢霉烯族类化合物中的真菌毒素进行检测，如呕吐毒素，通过衍生试剂对其衍生化处理，然后采用气化的方法处理，并运气相色谱附电子捕获检测器进行分析，并对其进行色相比对分析，得到粮油中的真菌毒素含量。采用气相色谱法分析粮油中的真菌毒素十分快速，但是在处理过程中需要进行经衍生化处理，操作过程比较复杂，已经很少使用。

（3）荧光光度法。这种方法主要运用粮油中的真菌毒素或其衍生物具有荧光特性，分析粮油真菌毒素的含量，通过将真菌毒素进行提取、净化、浓缩后，直接通过荧光分光光度计进行检测，快速的得到荧光光度含量。采用荧光光度法可以快速的对粮油中的真菌毒素进行检测，检测的结果直接得出，在一些基层实验室经常使用，但是采用这种方法必须要用真菌毒素免疫亲和柱进行样品的净化，而且检测的方法也比较单一，而且运用这种方法来检测黄曲霉毒素，一次只能检测出一种黄曲霉毒素总量或单一分量，检测效率比较低。

2.2 新型真菌毒素检测技术

2.2.1 新型免疫分析技术

免疫分析检测方法主要是利用粮油中的真菌毒素是小分子物质、半抗原体的特征，没有免疫功能，它们只有与大分子结合在一起才具有活性。采用免疫分析检测方法避免了使用仪器测量带来的风险，在粮油真菌毒素检测中具有十分重要的作用，应用也比较广泛。目前，通过以基础对免疫分析检测技术进行研究和优化，新型免疫技术已经出现了多种分析方法，从而能够更便捷、快速地对粮油真菌病毒进行检测。常用的免疫检测分析方法有胶体金免疫层析测定、免疫生物传感器、时间分辨荧光免疫技术等，虽然这些新型检测方法还是采用了真菌病毒的半抗原特性，在运用新技术与新方法，使得检测技术更加有效。新型免疫分析技术的基础原理，在检测方法上还是利用真菌毒素的半抗原特性对毒素进行检测，但在检测方法上进行了更新，将各种检测方法结合在一起。比如，胶体金免疫层析测定方法，就是对原有的技术进行改进，将免疫金标记技术与抗原抗体反应结合在一起进行检测，也突破单一检测方法的限制。胶体金免疫层析测定方法是将胶体金标记试剂与待检测物质进行充分混合，让二者之间产生化学反应，通过标记将反应的特异性特征综合在一起，将检测的結果与检测带进行对比分析，利用肉眼对检测的结果进行观察与测定，快速对粮油中的真菌病毒含量进行判定，采用胶体金免疫层析测定具有准确、快速、便捷、稳定等特点，而且检查也比较方面，适用于广泛的粮油真菌病毒检测。放射免疫分析技术是一种新型的粮油真菌病毒检测方式，主要是借助放射性同位素对检测的样品进行标记，然后与粮油样品进行混合，然后混合液体中添加定量的特异性抗原体，在液体中形成竞争性抑制，进而能够快速的对粮油真菌病毒含量进行判断，但采用这种检测方法容易在检测过程中造成污染，影响后期的检测效果与质量，而且检测的成本也比较高，使得该技术在具体的应用中受到了一定的限制。

2.2.2 其他新型真菌病毒检测技术

随着现代生物技术与科学技术的发展，一些新型粮食真菌毒素检测技术也得到了广泛的应用。例如，生物芯片技术、膜载体酶标记快速检测技术等技术，都是采用新型检测技术，运用免疫学的原理，利用真菌毒素与测试试剂混合时产生的化学反应，对粮油中的真菌毒素含量进行检测，主要是通过对反应物不同的反应表现、荧光测定、光谱测定等方法对粮油中的真菌毒素进行测量分析，进而能快速对粮油中的真菌毒素含量进行测试。随着检测环境的变化，在对粮油真菌毒素进行检测，可以结合不同检测技术的优点，可以采用多种方法对真菌毒素进行综合性检测，不仅能够提高粮油真菌检测的效率，还能降低检测的成本。

3 结语

在粮油真菌毒素的检测过程中，为了提高检测的效果与检测的准确性，在具体的检测过程中，可以将仪器检测法、免疫分析法等多种技术结合在一起，实现对粮油检测目标物的准确定量分析与定性分析，结合具体的工作要求，发展方便、快速、低毒、准确及低成本的快速检测技术，从而能够为基层粮油使用与收购单位提供高效的检测技术，进而促进我国的粮油产业的进步和发展。

参考文献：

[1]陈冉，周天智，吴秋蓉，等.粮油中真菌毒素检测技术及其应用[J].粮食储藏，2017（5）：35-39.

[2]吴淑华.粮油中真菌毒素检测技术及其应用[J].食品安全导刊，2018（8）：118.

[3]魏文忠，梁艳红，马红峰，等.粮食中真菌毒素检测技术研究进展[J].粮油食品科技，2018（4）：37-39.

[4]刘颖，梁慧盈，林亲录，等.粮油及其制品中真菌毒素快速检测技术的研究进展[J].粮油加工（电子版），2014（5）：46-50.