郑俊峰谢建华庞 杰
(1. 漳州职业技术学院食品与生物工程系,福建 漳州 363000;2. 农产品深加工及安全福建省高校应用技术工程中心,福建 漳州 363000;3. 福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350002)
茉莉酸甲酯(methyljasmonate, MeJA)是一种植物内源生长调节物质,不仅参与果蔬成熟等生理生化过程,还可诱导果蔬在贮运过程中产生抗病性、抗冷性、抗氧化活动,对保持果蔬生理品质和营养价值起到积极作用[1]。MeJA外源使用无毒、无污染,主要有熏蒸、浸泡、喷雾等方式,采用熏蒸主要是利用MeJA具有挥发性的特点,其可有效透过细胞膜进行信号传递,对改善果蔬采后代谢具有广谱的调控作用[2-4]。研究发现,外源MeJA处理可诱导龙眼[5]、夏橙[6]、猕猴桃[7]、蓝莓[8]等水果在冷藏过程中产生抗性,调控果实物质代谢,更好地保持采后水果的商品价值和营养价值。
近年来,随着国内外鲜果产业的快速发展和消费者生活水平的稳步提高,对鲜果品质和营养价值的要求也越来越高,釆后品质成为影响水果适销性的重要因素[2]。研究[2,9]表明,MeJA处理诱导柑橘类、核果类、浆果类等不同种类水果出现了不同的抗冷性机理及品质影响效果;MeJA外源应用具有明显的浓度效应,只有达到适宜浓度时才能有效发挥作用,但当浓度过高时,对果实采后品质影响反而不明显。
枇杷(EriobotryajaponicaLind1)是中国南方特色的佳果,解放钟枇杷是福建省的主栽优良品种,成熟于五月上旬,为晚熟、红肉类枇杷,果实特大、汁液多、果肉致密,酸甜适度,很受国内外市场欢迎[10-11]。枇杷果实皮薄、肉软、含水量高,易发生失水、腐烂、木质化、褐变等系列问题,引起食用品质下降进而失去商品价值,成为制约枇杷鲜果产业发展的瓶颈[12]。外源MeJA因其使用安全、方便和用量少等优点,被广泛应用于采后水果贮藏保鲜,可明显提高果实品质和耐贮性[13]。徐俐等[14-16]探讨了温度对枇杷贮藏效果的影响,优化MeJA复合热空气处理、低温预贮等手段的枇杷保鲜和抗冷性工艺。基于此,试验拟设定10,20,50 μmol/L MeJA浓度熏蒸处理,研究外源MeJA浓度差异对解放钟枇杷果实冷藏期间[(4±1) ℃]采后品质的影响,为筛选枇杷果实贮前MeJA处理适宜浓度,开发外源MeJA熏蒸保鲜技术提供参考。
解放钟枇杷:福建省云霄县果园,使用泡沫网袋单个包装并分层放置塑料筐中,立即运回实验室,剔除病虫害果和机械损伤果,挑选外观饱满、果型大小均一、九成熟的果实作为试材;
外源MeJA:纯度95%,美国Sigma公司;
2, 6-二氯靛酚钠:分析纯,生工生物工程(上海)股份有限公司;
氢氧化钠、硫酸铜、葡萄糖、酒石酸钾钠、草酸、氯化钡:分析纯,广东汕头西陇化工公司;
气相色谱仪:GC-2010型,日本岛津仪器有限公司;
酸度计:PHSJ-4A型,上海仪电科学仪器股份有限公司;
糖度计:WYT型,广州市爱宕科学仪器有限公司;
离心机:80-2型,上海浦东物理关学仪器厂。
设置处理组和对照组,处理组以10,20,50 μmol/L 3个不同浓度的外源MeJA分别在20 ℃恒温的密闭容器中连续熏蒸枇杷果实8 h,对照组(CK)在同等条件下的密闭容器空气中放置8 h,取出自然风凉,以塑料盒(18 cm×12 cm×4 cm)分装,每盒约500 g,并采用PE薄膜包装,置于(4±1) ℃、RH 90%~95%的条件贮藏36 d,每隔6 d取样测定指标,每个指标重复3次。
1.3.1 呼吸强度 采用静置法[17]。
1.3.2 失重率 按式(1)计算失重率。
(1)
式中:
L——失重率,%;
m1——贮前果实重量, g;
m2——贮后果实重量, g。
1.3.3 乙烯释放速率 参照王丽敏等[18]方法,按式(2)计算乙烯释放速率。
(2)
式中:
S——乙烯释放速率, μL/(kg·h);
G——乙烯浓度, μL/L;
V1——容器气相体积, L;
m——样品质量, g;
t——释放时间, h。
1.3.4 可溶性固形物(TSS)含量 采用手持式糖度计法[19]。
1.3.5 总糖含量 采用斐林试剂滴定法[20]。
1.3.6 维生素C(VC)含量 采用2, 6-二氯酚靛酚法[21]。
1.3.7 可滴定酸(TA)含量 采用酸碱中和法[22],以苹果酸表示。
1.3.8 腐烂率 按式(3)计算腐烂率。
(3)
式中:
C——腐烂率,%;
N1——测定时发生腐烂果实数;
N2——贮前果实总数。
1.3.9 数据处理 采用Excel和SPSS软件对数据进行统计、差异分析并制图。
由图1可知,贮藏0~6 d,MeJA处理组和对照组呼吸强度均快速下降;贮藏6 d后,MeJA处理组呼吸强度随贮藏时间的延长而缓慢下降,而对照组在贮藏第6~12天出现上升,随后逐渐降低。贮藏期间,MeJA处理组呼吸强度均极显著低于对照组(P<0.01),说明MeJA处理能显著抑制枇杷果实的呼吸强度,减缓其新陈代谢速率,延缓果实衰老。这可能是由于MeJA诱导呼吸作用相关酶产生抗逆作用,从而抑制呼吸作用,使其维持较低水平生命代谢活动[23]。此外,20 μmol/L MeJA处理组枇杷果实的呼吸强度最低,其次依次为10,50 μmol/L MeJA处理组,且20 μmol/L MeJA处理组显著低于50 μmol/L MeJA处理组(P<0.05),但其与10 μmol/L MeJA处理组差异不显著(P>0.05),说明在适当的浓度范围内,随着浓度的增加,MeJA抑制枇杷呼吸作用的能力增强。综上,20 μmol/L MeJA处理组抑制枇杷果实呼吸强度的效果较佳。
图1 枇杷果实贮藏期间呼吸强度的变化
由图2可知,贮藏期间,MeJA处理组和对照组枇杷果实失重率随贮藏时间的延长而上升。贮藏0~18 d,MeJA处理组失重率呈缓慢上升趋势,贮藏18 d后快速上升,其中20,50 μmol/L MeJA处理组的失重率显著低于对照组(P<0.05)。这可能是由于MeJA参与调控细胞膜和细胞壁物质代谢,有效维持了细胞组织的完整性,抑制了果实组织失水[1]。贮藏第36天,20,50 μmol/L MeJA处理组的失重率分别为10.29%,11.91%,而对照组的为23.77%,果实失水皱缩现象明显差异化。说明20,50 μmol/L MeJA处理可明显降低枇杷果实贮藏后期失重率的上升速度,进而达到抑制失水失重、皱缩的效果。
由图3可知,贮藏期间,MeJA处理组和对照组枇杷果实乙烯释放速率呈先降后升再降趋势。贮藏0~18 d,MeJA处理组的乙烯释放速率均显著低于对照组(P<0.05),贮藏第18天,对照组先出现乙烯释放速率的峰值[0.195 μL/(kg·h)],而10,20,50 μmol/L MeJA处理组出现峰值的时间均晚于对照组,分别为第30,30,24天,峰值分别为0.177,0.167,0.194 μL/(kg·h),且峰值均小于对照组,其中以10,20 μmol/L MeJA处理组延缓出现峰值和降低乙烯释放速率的峰值效果较为明显,说明MeJA处理能显著抑制贮藏前半期枇杷果实的乙烯释放速率,并能延缓后半期乙烯释放速率峰值的出现,其主要是MeJA对植物激素乙烯有调控作用,可诱导减轻乙烯释放速率加剧[24-25],进一步延缓成熟和生理衰老进程。
图2 枇杷果实贮藏期间失重率的变化
图3 枇杷果实贮藏期间乙烯释放速率的变化
由图4可知,对照组和MeJA处理组枇杷果实的TSS含量均呈先升后降趋势,其中对照组在贮藏第12天最先达到峰值,而10,20,50 μmol/L MeJA处理组出现峰值的时间分别为贮藏第18,24,18天,均晚于对照组;贮藏第24~36天,MeJA处理组枇杷果实的TSS含量均显著低于对照组(P<0.05),说明经MeJA熏蒸处理可延缓枇杷果实贮藏前期TSS含量峰值的出现,并有效保持果实贮藏后期TSS含量。TSS含量出现先升后降,可能是枇杷果实在贮藏过程中进一步成熟,导致TSS含量上升,随后在衰老生理代谢过程中逐渐减少,而MeJA处理能促进营养成分的有效积累,提高果蔬采后营养价值[24]。贮藏第24~36天,20 μmol/L MeJA处理组的TSS含量极显著高于10,50 μmol/L MeJA处理组(P<0.01),说明20 μmol/L MeJA处理组对保持枇杷果实贮藏后期TSS含量的效果最好。
图4 枇杷果实贮藏期间可溶性固形物含量的变化
由图5可知,贮藏期间,MeJA处理组和对照组枇杷果实总糖含量逐渐下降。贮藏0~6 d,对照组的总糖含量高于MeJA处理组,并于6~12 d出现较快速下降;贮藏12 d后,10,20 μmol/L MeJA处理组的总体含量显著高于对照组(P<0.05),说明MeJA处理可显著维持枇杷果实贮藏中、后期的总糖含量。这可能与MeJA降低呼吸速率,提高可溶性糖相关合成酶的活性,降低酸性转化酶的活性有关。贮藏第12~36天,20 μmol/L MeJA处理组维持总糖含量的效果显著优于10 μmol/L处理组(P<0.05),而50,10 μmol/L MeJA处理组间的差异不显著(P>0.05),主要是MeJA外源使用具有明显的浓度效应[2],浓度过高,维持总糖含量效果反而不明显。综上,20 μmol/L MeJA处理组对保持枇杷果实总糖含量的效果较好。
由图6可知,对照组和MeJA处理组枇杷的维生素C含量均随贮藏时间的延长而降低,其中10,20 μmol/L MeJA处理组的维生素C含量显著高于对照组(P<0.05),说明采用适宜浓度的MeJA熏蒸处理延缓了维生素C含量的下降,主要是外源MeJA参与调控维生素C代谢,诱导相关抗氧化酶的活性,延缓维生素C含量下降,使其维持较高的抗氧化活性[1],但其诱导抗氧化机理有待进一步研究。贮藏第12~36天,20 μmol/L MeJA处理组的维生素C含量高于其他两个处理组,表明20 μmol/L MeJA处理组对保护枇杷果实维生素C含量的效果较好,有效维持了果实的新鲜度。
图5 枇杷果实贮藏期间总糖含量的变化
图6 枇杷果实贮藏期间维生素C含量的变化
由图7可知,贮藏期间,MeJA处理组和对照组枇杷果实TA含量均呈下降趋势,且对照组低于MeJA处理组,可能与MeJA抑制枇杷果实贮藏期间的呼吸速率,导致中间代谢物(酸)较慢分解有关[7]。贮藏18 d后,10,20 μmol/L MeJA处理组枇杷果实的TA含量均显著高于对照组(P<0.05),说明MeJA处理对枇杷TA含量的影响与其浓度有关。
由图8可知,贮藏0~6 d,各组枇杷均未发生腐烂;随着冷藏时间的延长,枇杷腐烂率均呈上升趋势,且以对照组的上升最为明显;贮藏6 d后,MeJA处理组枇杷腐烂率均显著低于对照组(P<0.05)。这可能是由于外源MeJA诱导采后果蔬抗病性、抗冷性、抗氧化活动,延缓枇杷采后生理衰老导致的腐败劣变进程[1]。20 μmol/L MeJA处理组的腐烂率显著低于其他两个处理组(P<0.05);贮藏第36天,对照组腐烂率为43.10%,10,20,50 μmol/L MeJA处理组的腐烂率分别为23.79%,18.62%,29.31%,其中20 μmol/L MeJA处理组枇杷果实的腐烂率最低。
图7 枇杷果实贮藏期间可滴定酸含量的变化
图8 枇杷果实贮藏期间腐烂率的变化
通过研究10,20,50 μmol/L外源茉莉酸甲酯熏蒸处理枇杷果实在(4±1) ℃贮藏条件下的呼吸强度、失重率、乙烯释放速率、腐烂率等生理生化指标和可溶性固形物、总糖、维生素C、可滴定酸含量等营养物质的变化,评价不同浓度茉莉酸甲酯熏蒸处理对解放钟枇杷采后品质的影响。结果表明,采用浓度为20 μmol/L 茉莉酸甲酯熏蒸处理可明显抑制枇杷果实呼吸强度,降低失重率、腐烂率、贮藏前期乙烯释放速率,有效维持总糖、维生素C、可滴定酸、贮藏后期较高可溶性固形物含量。后续可对外源茉莉酸甲酯处理对枇杷果实采后冷害褐变、木质化的影响及其抗氧化、膜脂代谢、细胞壁代谢等机理进行进一步探讨。